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Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Topi utilizzati per l'esperimento
- Usa topi maschi e femmine di 8 settimane sullo sfondo B6.
2. Procedura chirurgica per rimuovere il linfonodo drenante inguinale
- Eutanasia dei topi utilizzando l'asfissia da CO2 seguita da lussazione cervicale.
- Immobilizzare i topi sul palco acrilico con del nastro adesivo e applicare olio minerale con un batuffolo di cotone sulla pelle addominale per prevenire la deposizione di pelo intorno all'incisione (Figura 1B). La rimozione del pelo non è necessaria.
- Eseguire un'incisione sulla linea mediana utilizzando forbici curve per microchirurgia (11,5 cm) e pinze curve per microchirurgia (12,5 cm) nell'addome dal pube al processo xifoideo (Figura 1C).
- Dissociare la muscolatura addominale dalla pelle (Figura 1D).
- Praticare incisioni cutanee orizzontali nella parte superiore e inferiore della linea di incisione verticale per creare lembi cutanei sul lato di interesse (in base al lato dell'iniezione della miscela di anticorpi) e sbattere la pelle per visualizzare il linfonodo (Figura 1E).
- Fissare con nastro adesivo il lembo cutaneo sulla lastra acrilica (Figura 1F).
- Rimuovere il linfonodo drenante inguinale utilizzando una pinza curva per microchirurgia (Figura 1F). I linfonodi appariranno come sfere traslucide, solitamente bilobulari, sotto la pelle.
