Articolo metodologico

Determinazione del ruolo della vitronectina nella resistenza batterica all'attività battericida del siero umano

8 luglio 2025

In questo articolo

Abstract

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Fonte: Singh, B. et al., Saggi per studiare il ruolo della vitronectina nell'adesione batterica e nella resistenza al siero.J. Vis. Exp.(2018)

Questo video dimostra il ruolo della vitronectina, una glicoproteina sierica umana, sulla resistenza batterica. Gli anticorpi nel siero interagiscono con le proteine della superficie batterica, attivando le proteine del complemento e formando il complesso di attacco alla membrana, causando la lisi cellulare batterica. Il legame della vitronectina sulla proteina della membrana batterica impedisce la formazione del complesso di attacco alla membrana, con conseguente sopravvivenza batterica.

Protocollo

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Tutte le procedure che prevedono la raccolta dei campioni sono state eseguite in conformità con le linee guida IRB dell'istituto.

1. Analisi della resistenza Vn-dipendente all'attività battericida del siero umano

  1. Acquista il normale siero umano (NHS) da una fonte commerciale. Preparare la vitronectina o il siero impoverito di Vn (VDS). Rifornire il VDS con 180 nM Vn che equivale al Vn presente nel NHS.
  2. Preparare il siero inattivato termicamente (HIS) riscaldando NHS a 56 °C per 30 minuti al fine di inattivare le proteine del complemento.
    nota: La concentrazione sierica ottimale....

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Dichiarazioni

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Nessun conflitto di interessi dichiarato.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Provetta a fondo tondo in polistirene da 6 mL VWR89000-478Modello da 12 × 75 mm con tappo
Siero umano normale (NHS)Complemento Tecnologia, Inc.NhsSiero umano aggregato
Cloruro di calcio (CaCl2)Sigma-AldrichC5670-500G
glucosioSigma-AldrichG8270-1KG
gelatinaSigma-AldrichG9391Adatto per colture cellulari
EmocitometroMarienfeldCodice 640210
Cloruro di magnesio (MgCl2)Sigma-AldrichM8266-1KG
Vitronectina (Vn) dal plasma umanoSigma-AldrichV8379-50UGGrado di coltura cellulare
scuotitore Stuart ScientificSTR6Agitatore a piattaforma

Ristampe e permessi

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Tag

Complesso di Attacco alla MembranaAttivazione del ComplementoAttivit Battericida del SieroSopravvivenza BattericaSaggio CFUIncubazione su Agar CioccolatoTampone DGVB

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