Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Valutazione delle caratteristiche dell'occhio secco
Misura il danno corneale con la colorazione con fluoresceina.
- Aggiungere 2 μl di fluoresceina allo 0,2% alla cornea del ratto. Aprire e chiudere passivamente le palpebre del ratto 3 volte con un dito guantato per stendere il colorante fluoresceina sulla superficie dell'occhio.
- Dopo 1 minuto, aspirare 1 mL di soluzione fisiologica con una siringa da 3 mL (senza alcun attacco dell'ago), posizionare la siringa a circa 2-3 mm anteriormente alla cornea e spingere delicatamente la soluzione salina sull'occhio.
- Acquisire immagini sotto il filtro blu cobalto (cioè ~400 nm) di un microscopio per immagini oculari con le luci di sfondo spente.
nota: Le immagini sono state successivamente analizzate con un sistema di classificazione modificato rispetto alle pubblicazioni precedenti. Le immagini sono state quindi analizzate classificando soggettivamente il numero, l'area e l'intensità delle macchie verdi da 0 a 2, dove 0 indica la loro assenza, 1 indica una colorazione puntiforme di meno di 50 macchie e 2 indica una colorazione puntiforme di oltre 50 macchie.
