Rilevamento del legame della vitronectina alle superfici batteriche mediante citometria a flusso

In questo articolo

Abstract

Fonte: Singh, B. et al., Saggi per studiare il ruolo della vitronectina nell'adesione batterica e nella resistenza al siero.J. Vis. Exp.(2018)

Questo video dimostra il rilevamento dell'interazione della vitronectina con le proteine di superficie batteriche. L'analisi di citometria a flusso misura il segnale di fluorescenza di anticorpi marcati in fluorescenza legati alla vitronectina, confermandone la presenza sulla superficie batterica. Questa tecnica fornisce informazioni sulle interazioni ospite-patogeno e sulle potenziali terapie per le infezioni batteriche.

Protocollo

1. Analisi di Vitronectina, Vn come ligando proteico di superficie batterica

Rilevamento del legame Vn sulla superficie batterica mediante citometria a flusso
nota: Nella citometria a flusso, abbiamo utilizzato la dispersione laterale e la dispersione diretta per il gate degli eventi positivi. Per esaminare le interazioni con Vn, sono stati selezionati isolati clinici di Hif di tipo f e Hif (n=10) insieme a E. coli BL21 (DE3) come controllo negativo (Figura 1A).
1. Colture Hif isolati clinicamente in terreno di infusione cervello-cuore (BHI) integrato con ....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

figure-results-1
Figura 1: Il sierotipo f di Haemophilus influenzae lega Vn attraverso il PH espresso in superficie.(A) Risultati della citometria a flusso che mostrano il legame di Vn alle cellule degli isolati clinici di Hof. Ogni isolato clinico (5 x 10,⁶ CFU) è stato incubato con 250 nM di Vn umano. Il ligando legato è stato rilevato utilizzando pAb anti-Vn di.......