
Questo video mostra una procedura per analizzare l'efferocitosi mediata da macrofagi peritoneali di timociti di topo apoptotico mediante microscopia a fluorescenza.
Video Duration: 5 minutes and 36 seconds
JoVE Encyclopedia of Experiments
Immunologia
Enciclopedia video di esperimenti di ricerca avanzati per scienziati in ambito accademico e industriale.

Ripreso nei migliori laboratori universitari
Pratica e teoria per ogni esperimento

Questo video mostra una procedura per analizzare l'efferocitosi mediata da macrofagi peritoneali di timociti di topo apoptotico mediante microscopia a fluorescenza.
Video Duration: 5 minutes and 36 seconds
Questo video mostra una strategia di gating citometrico a flusso che utilizza un pannello multicolore per analizzare la vitalità cellulare e specifici marcatori anticorpali anti-umani coniugati fluorescenti. Questo approccio consente di determinare con precisione la percentuale di popolazioni cellulari infette da Mycobacterium tuberculosis.
Video Duration: 3 minutes and 18 seconds
Questo video mostra la colorazione e la preparazione di cellule batteriche per studi immunologici utilizzando un colorante fluorescente rosso. I batteri colorati vengono diluiti e risospesi in un mezzo di crescita per ottenere la concentrazione batterica desiderata per l'infezione della cellula ospite, che rappresenta la molteplicità dell'infezione.
Video Duration: 2 minutes and 57 seconds
Questo video dimostra il rilevamento dell'interazione della vitronectina con le proteine di superficie batteriche. L'analisi di citometria a flusso misura il segnale di fluorescenza di anticorpi marcati in fluorescenza legati alla vitronectina, confermandone la presenza sulla superficie batterica. Questa tecnica fornisce informazioni sulle interazioni ospite-patogeno e sulle potenziali terapie per le infezioni batteriche.
Video Duration: 3 minutes and 5 seconds
Questo video dimostra la valutazione della fosforilazione intracellulare delle proteine indotta da citochine stromali nelle cellule leucemiche. Queste proteine fosforilate intracellulari vengono quantificate utilizzando la tecnica della citometria a fosfoflusso.
Video Duration: 3 minutes and 40 seconds
In questo video, dimostriamo il test per valutare l'attivazione dei basofili in presenza di un allergene di prova utilizzando la citometria a flusso.
Video Duration: 5 minutes and 37 seconds
Questo video mostra una tecnica per l'estrazione dell'acido nucleico da sangue umano intero utilizzando particelle di vetro magnetiche (MGP) - piccole perle magnetiche rivestite di silice. Dopo aver lisato le cellule del sangue utilizzando un tampone di lisi, gli acidi nucleici rilasciati si legano alla superficie degli MGP rivestiti di silice, estraendo le molecole dal campione.
Video Duration: 3 minutes and 43 seconds
Questo video mostra l'esocitosi dei mastociti indotta da un reagente attivante che include uno ionoforo di calcio, avviando il rilascio di granuli secretori contenenti la proteina reporter fluorescente NPY-mRFP. Successivamente, valutiamo quantitativamente l'esocitosi misurando l'NPY-mRFP rilasciato utilizzando un lettore di piastre a fluorescenza.
Video Duration: 3 minutes and 14 seconds
Questo video dimostra il metodo per analizzare il metabolismo energetico nelle cellule NK umane attivate utilizzando un analizzatore di flusso extracellulare. Diversi inibitori dei complessi della catena di trasporto degli elettroni influenzano la sintesi di ATP, che viene misurata attraverso il tasso di consumo di ossigeno o OCR, fornendo informazioni sul metabolismo cellulare e sulla bioenergetica.
Video Duration: 4 minutes and 41 seconds
Questo video dimostra l'attività litica delle cellule natural killer contro le cellule bersaglio colorate in modo fluorescente. Il metodo consente la misurazione della citotossicità indotta dalle cellule NK colorando le cellule morte e utilizzando un citometro a flusso per quantificare le cellule bersaglio vive e morte.
Video Duration: 2 minutes and 40 seconds
Questo video mostra la rilevazione del fattore Rhesus (Rh) in campioni di sangue utilizzando uno strumento di levitazione magnetica. Il campo magnetico allinea e fa levitare le perline e le cellule del sangue in base alla densità. Il trattamento dei campioni con anticorpi anti-Rh provoca la formazione di complessi di perle di cellule a densità intermedia, consentendo la differenziazione dei globuli rossi Rh-positivi e Rh-negativi.
Video Duration: 4 minutes and 10 seconds
Questo video dimostra una tecnica in vitro per studiare la formazione di sinapsi immunitarie tra le cellule T umane primarie e i doppi strati lipidici supportati (SLB). Le proteine della superficie delle cellule T interagiscono con i rispettivi ligandi immobilizzati su SLB per formare una sinapsi immunitaria, seguita dal movimento dei granuli litici verso la sinapsi, che viene visualizzato utilizzando la microscopia a fluorescenza.
Video Duration: 5 minutes and 29 seconds
Questo video mostra un metodo per convertire le cellule dendritiche (DC) in DC tollerogeniche (TolDCs) utilizzando un agente farmacologico immunomodulatore. Questa conversione è confermata dalla valutazione della funzione di TolDC attraverso il loro effetto immunosoppressivo sulle cellule T CD4+.
Video Duration: 2 minutes and 40 seconds
Questo video mostra un metodo per dedurre un complesso di istocompatibilità peptide-maggiore fotoattivabile utilizzando l'irradiazione UV. Il processo di deforestazione espone la sequenza peptidica nativa, consentendo un'attivazione precisa delle cellule T.
Video Duration: 4 minutes and 54 seconds
Questo video dimostra una tecnica per il rilevamento della tubercolosi extrapolmonare. Le nanosonde superparamagnetiche all'ossido di ferro (SPIO), coniugate ad anticorpi specifici per Mycobacterium, vengono iniettate in un topo precedentemente infettato con Mycobacterium bovis BCG, marcando il granuloma e fornendo un migliore contrasto di imaging per il suo rilevamento.
Video Duration: 2 minutes and 59 seconds
Questo video dimostra un metodo per studiare l'assorbimento e il trasporto retrogrado di nanocorpi funzionalizzati per comprendere i loro percorsi di traffico intracellulare. Introducendo il solfato radiomarcato e utilizzando tecniche di isolamento e rilevamento, questo metodo consente lo studio dell'assorbimento endocitico e dell'arrivo nella rete trans-Golgi delle proteine cargo.
Video Duration: 5 minutes
Questo video mostra il test della chemiotassi dei neutrofili utilizzando un metodo all-on-chip. Il metodo consente l'isolamento diretto dei neutrofili dall'intero sangue mediante selezione immunomagnetica negativa seguita da un test di chemiotassi su un chip microfluidico.
Video Duration: 3 minutes and 54 seconds
Questo video dimostra la valutazione delle attivazioni multiple delle caspasi nei macrofagi derivati dal midollo osseo attraverso la stimolazione con il virus dell'influenza. Dopo la lisi dei macrofagi, l'inattivazione termica del lisato e la centrifugazione, le caspasi intracellulari vengono raccolte per la successiva analisi immunologica.
Video Duration: 4 minutes and 1 second
Questo video illustra un test multiplex basato su perline per l'analisi delle citochine nelle lacrime umane. Il metodo consente l'analisi simultanea di più citochine da un singolo campione, fornendo una maggiore sensibilità per lo studio delle risposte immunitarie in varie condizioni fisiopatologiche.
Video Duration: 4 minutes and 46 seconds
Questo video dimostra un metodo per valutare l'alloreattività in popolazioni di cellule T miste osservando le interazioni con le cellule dendritiche portatrici di alloantigene, che portano alla formazione di sinapsi immunologiche. La colorazione differenziale e la quantificazione dei doppietti contenenti sinapsi tramite citometria a flusso rivelano l'alloreattività delle cellule T.
Video Duration: 5 minutes and 13 seconds
Questo video dimostra l'uso della citometria a flusso per identificare e contare varie cellule immunitarie nel liquido di lavaggio broncoalveolare. Inizialmente, le singole cellule immunitarie vengono identificate utilizzando un colorante di vitalità, seguito dalla colorazione differenziale delle proteine marcatrici di superficie, consentendo l'enumerazione precisa di ciascun tipo di cellula.
Video Duration: 3 minutes and 3 seconds
Questo video mostra un metodo per caratterizzare le cellule T di memoria CD8+ specifiche per il virus dell'immunodeficienza delle scimmie (SIV) utilizzando tetrameri del complesso di istocompatibilità maggiore peptidico di classe I (pMHC-I). Un tetramero pMHC-I è un complesso di quattro molecole MHC-I legate a peptidi specifici per SIV e coniugate a un fluoroforo. Questi tetrameri si legano selettivamente ai recettori delle cellule T (TCR) sulle cellule T CD8+ specifiche per SIV, facilitando la...
Video Duration: 4 minutes and 25 seconds
Questo video mostra un test basato sul flusso laminare per caratterizzare l'interazione tra leucociti e partner cellulari come le cellule endoteliali. Questo metodo fornisce informazioni dinamiche sull'adesione, la deadesione e la trasmigrazione dei leucociti quando perfusi su uno strato intatto e confluente di cellule vascolari.
Video Duration: 3 minutes and 54 seconds
Il video mostra un test per valutare l'attività di sequestro autofagico di massa nelle cellule di mammifero. Utilizza l'elettroporazione per rilasciare proteine citosoliche, tra cui la lattato deidrogenasi (LDH). Le frazioni di LDH sequestrate e LDH cellulari totali sono determinate per valutare il sequestro di LDH, fornendo informazioni sull'attività complessiva di sequestro di massa.
Video Duration: 4 minutes and 33 seconds
Questo video mostra un test basato su cellule reporter per lo screening di potenziali nanoparticelle bioattive che inibiscono la segnalazione del recettore Toll-like (TLR). Il test prevede l'introduzione di lipopolisaccaridi (LPS) mescolati con ibridi di nanoparticelle peptidico-oro ai macrofagi reporter che esprimono le proteine reporter: fosfatasi alcalina embrionale secreta (SEAP) e luciferasi. La riduzione del segnale TLR indotto da LPS mediata dagli ibridi è determinata misurando i segnali...
Video Duration: 3 minutes and 53 seconds
Questo video dimostra il metodo per valutare l'impatto dello sforzo di taglio sulle piastrine. Il trattamento con anticorpi induce dissociazione e cambiamenti conformazionali nei complessi meccanorecettori, attivando le piastrine ed esprimendo marcatori sulla superficie. Questi marcatori vengono osservati tramite immunocolorazione e citometria a flusso.
Video Duration: 3 minutes and 11 seconds
Questo video dimostra la misurazione della resistenza elettrica transepiteliale nelle cellule Caco-2 irradiate, sia in presenza che in assenza di cellule PBMC. Questo metodo consente lo studio degli effetti sinergici delle radiazioni e delle cellule immunitarie sulla barriera cellulare epiteliale.
Video Duration: 2 minutes and 17 seconds
Questo video mostra un test per studiare l'efficienza di richiusura della membrana plasmatica nelle cellule di mammifero. Le cellule sono esposte a una tossina batterica che forma i pori nella membrana cellulare. In presenza di ioni calcio extracellulari, il poro provoca l'afflusso di calcio, inducendo eventi di richiusura della membrana. L'efficienza di richiusura viene valutata utilizzando il colorante allo ioduro di propidio legante il DNA, che entra nelle cellule solo senza una membrana...
Video Duration: 4 minutes and 34 seconds
Questo video dimostra la colorazione immunoistochimica per il rilevamento dell'antigene del virus della rabbia nel tessuto cerebrale di topo infetto. Il processo include la deparaffinazione e il trattamento con alcol, seguiti da un trattamento proteolitico per migliorare l'accessibilità dell'antigene. La colorazione immunoistochimica rivela precipitati rossi, confermando la presenza di antigeni della rabbia nella sezione tissutale.
Video Duration: 4 minutes and 34 seconds
Questo video dimostra una tecnica per quantificare il rapporto relativo dei macrofagi tra le popolazioni totali di cellule immunitarie infiltrate nella biopsia dell'arteria temporale. La colorazione immunoistochimica di una sezione di tessuto affetta da malattia autoimmune colora selettivamente le cellule immunitarie con recettori specifici per differenziarle visivamente dal resto delle cellule.
Video Duration: 4 minutes
Questo video mostra il metodo di immunoprecipitazione reticolante potenziata (eCLIP) per identificare le proteine leganti l'RNA nel testicolo del topo. eCLIP consente l'identificazione precisa dei siti di legame in cui le proteine leganti l'RNA (RBP) interagiscono con i loro RNA bersaglio.
Video Duration: 5 minutes and 7 seconds
Questo video mostra un test per analizzare le cellule T CD8+ antigene-specifiche in diverse fasi del ciclo cellulare. Le cellule vitali marcate con fluorescenza vengono selezionate utilizzando la citometria a flusso e le cellule nelle diverse fasi del ciclo cellulare vengono identificate dal loro contenuto di DNA utilizzando anticorpi contro la proteina nucleare associata alla proliferazione cellulare e una colorazione dell'acido nucleico.
Video Duration: 6 minutes and 20 seconds
Questo video dimostra la citometria a flusso per misurare l'assorbimento microgliale di bioparticelle fluorescenti dopo la somministrazione intravitreale in un occhio di topo. La citometria a flusso rileva le cellule vive che esprimono CD11b e distingue le cellule della microglia fagocitaria che mostrano fluorescenza verde da altre cellule mieloidi, inclusi i monociti che esprimono Ly6C e i neutrofili che esprimono Ly6G.
Video Duration: 4 minutes and 34 seconds
Questo video mostra una tecnica basata sulla citometria a flusso che utilizza due fluorocromi per identificare le cellule T CD4+ e CD8+, le cellule T γδ, le cellule B, le cellule natural killer (NK) e i monociti nelle cellule mononucleate del sangue periferico umano (PBMC). Dopo l'incubazione delle cellule con anticorpi coniugati con fluorocromo contro i marcatori di superficie, i sottogruppi cellulari vengono identificati utilizzando una strategia di gating citofluorimetrico ottimale.
Video Duration: 4 minutes and 57 seconds
Questo video mostra l'imaging di cellule vive per l'analisi dell'attività antifungina nei neutrofili umani utilizzando conidi reporter fluorescenti di Aspergillus. Inizialmente, sia la fluorescenza rossa che quella magenta sono rilevate all'interno dei neutrofili, mentre la fluorescenza rossa diminuisce nel tempo, indicando la degradazione dei conidi e confermando l'attività antifungina dei neutrofili.
Video Duration: 2 minutes and 22 seconds
Questo video mostra un test per quantificare la Salmonella typhimurium citosolica e vacuolare all'interno di macrofagi derivati dal midollo osseo utilizzando la permeabilizzazione differenziale. I macrofagi sono infettati da una proteina fluorescente che esprime Salmonella, che viene internalizzata all'interno di una struttura vacuolare specializzata chiamata vacuolo contenente Salmonella o SCV. Un sottogruppo di batteri sfugge all'SCV ed entra nel citosol. La membrana plasmatica ricca di...
Video Duration: 6 minutes and 27 seconds
Questo video illustra un test cellulare che coinvolge cellule di glioblastoma che esprimono recettori chemochine CXCR4. Il test impiega un colorante sensibile al calcio per misurare le variazioni di fluorescenza in seguito all'interazione con l'agente, offrendo informazioni sulle dinamiche di segnalazione cellulare.
Video Duration: 5 minutes and 52 seconds
Questo video mostra un test che indaga il ruolo delle cellule simili ai neutrofili nella salvaguardia delle cellule di linfoma contro la citotossicità degli agenti chemioterapici. Una co-coltura 3D, costituita da linfoma e cellule simili ai neutrofili, viene stabilita ed esposta alla vincristina, un farmaco chemioterapico. Il contatto diretto con le cellule simili ai neutrofili induce una sovraregolazione delle proteine anti-apoptotiche nelle cellule del linfoma, favorendo così la loro...
Video Duration: 4 minutes and 23 seconds
Il video dimostra un metodo immunologico per monitorare in vivo la produzione di linfociti T citotossici indotti da adiuvanti o CTL. A un topo viene pre-iniettato linfociti T CD8+ di donatori geneticamente modificati e colorati con colorante proliferativo. L'iniezione sottocutanea di ovoalbumina con adiuvanti genera linfociti T CD8+ citotossici che vengono identificati dopo il prelievo attraverso l'immunocolorazione e la citometria a flusso.
Video Duration: 4 minutes and 45 seconds
Il video mostra un test basato sulla citometria a flusso per analizzare l'immunodominanza nei linfociti T citotossici o le risposte CTL. Le cellule bersaglio fluorescenti iniettate mostrano una fluorescenza variabile corrispondente agli epitopi immunogenici. La raccolta e lo smistamento post-milza rivelano una riduzione delle cellule fluorescenti ad alta intensità, confermando l'immunodominanza nelle risposte CTL.
Video Duration: 3 minutes
Il video dimostra l'analisi elettrofisiologica dei neuroni derivati da cellule staminali embrionali dopo l'esposizione alle neurotossine. Il trattamento di questi neuroni con neurotossine botuliniche riduce la frequenza delle correnti post-sinaptiche eccitatorie spontanee in miniatura, confermando l'inibizione della trasmissione sinaptica.
Video Duration: 4 minutes and 37 seconds
Il video dimostra la valutazione dell'impatto del trattamento fotodinamico sull'efficienza fagocitaria dei macrofagi murini con la primachina. I macrofagi infetti trattati generano specie reattive dell'ossigeno, portando alla morte fungina selettiva, evidente dalla riduzione delle colonie sulla piastra.
Video Duration: 3 minutes and 45 seconds
Il video dimostra una tecnica per valutare l'influenza del trattamento fotodinamico (PDT) con un fotosensibilizzatore sull'attività metabolica dei macrofagi murini. Le cellule vengono sottoposte a trattamento con il fotosensibilizzatore seguito da esposizione alla luce UV, avviando la PDT. Questo processo innesca il fotosensibilizzatore a generare specie reattive dell'ossigeno (ROS) all'interno delle cellule, causando tossicità cellulare. L'impatto dei ROS viene quindi valutato dagli...
Video Duration: 3 minutes and 10 seconds
Questo video mostra un metodo per valutare l'impatto dell'aspirina e dell'ibuprofene, alle loro concentrazioni minime inibitorie, sulla fagocitosi dei macrofagi utilizzando cellule fungine colorate con colorante fluorescente sensibili al pH. I farmaci inibiscono la cicloossigenasi-2, diminuendo la formazione di prostaglandine e aumentando la fagocitosi dei macrofagi, come osservato attraverso misurazioni a fluorescenza di colorante sensibile al pH.
Video Duration: 3 minutes and 6 seconds
Questo video dimostra l'isolamento delle proteine dai neutrofili, che vengono ulteriormente elaborate e digerite in peptidi più piccoli. Questi peptidi possono essere utilizzati per analisi future.
Video Duration: 4 minutes and 50 seconds
Questo video mostra la purificazione dei peptidi attraverso la procedura STAGE Tip. Una colonna in miniatura contenente perle di resina legate a lunghe catene di idrocarburi facilita la purificazione basata sull'interazione idrofobica. Dopo aver caricato un campione di peptide predigerito nella colonna, i frammenti di peptidi si legano alle perle di resina, consentendo il passaggio delle impurità. Per eluire i frammenti peptidici viene applicato un tampone di eluizione che interrompe...
Video Duration: 5 minutes and 43 seconds
Questo video mostra un test per misurare la citotossicità delle cellule natural killer contro le cellule tumorali utilizzando la colorazione Calcein AM. Il numero ridotto di cellule tumorali fluorescenti a seguito di co-coltura con cellule natural killer indica la citotossicità mediata da cellule natural killer nei confronti delle cellule tumorali.
Video Duration: 2 minutes and 53 seconds
Questo video dimostra la stimolazione in vitro di trappole extracellulari per macrofagi (MET) in macrofagi umani derivati da monociti utilizzando diversi stimoli infiammatori come TNF-alfa, PMA e HOCL. Il video mostra anche il metodo di colorazione con colorante SYTOX dei MET per la visualizzazione.
Video Duration: 4 minutes and 31 seconds
Questo video mostra l'imaging a fluorescenza enzimatica reporter (REF) per il rilevamento in vivo dell'infezione da Mycobacterium tuberculosis. I topi infetti vengono iniettati per via intraperitoneale con un substrato per l'imaging REF. Dopo essere stato idrolizzato dall'enzima batterico β-lattamasi, il substrato emette fluorescenza, il cui rilevamento aiuta la valutazione dell'infezione.
Video Duration: 5 minutes and 26 seconds
Questo video indaga la virulenza della Leishmania trattando i macrofagi con promastigoti metaciclici, con conseguente formazione di amastigoti intracellulari. La conferma della virulenza della Leishmania si ottiene attraverso la colorazione con colorante fluorescente con acido nucleico. Questa intuizione può contribuire allo sviluppo di nuove terapie per la leishmaniosi.
Video Duration: 4 minutes and 46 seconds
Questo video dimostra un metodo per valutare la crescita intracellulare di mutanti di Coxiella marcati con GFP all'interno di cellule epiteliali in coltura. Il fenotipo mutante viene visualizzato utilizzando l'immunocolorazione e la microscopia a epifluorescenza, consentendo lo studio dell'effetto della mutazione sulla crescita intracellulare.
Video Duration: 5 minutes and 13 seconds
In questo video, dimostriamo una procedura per visualizzare il Porphyromonas gingivalis internalizzato, un batterio patogeno anaerobico, all'interno di cellule endoteliali umane utilizzando la microscopia confocale. I batteri vengono colorati con un colorante fluorescente mentre il citoscheletro di actina delle cellule endoteliali dell'ospite viene marcato con un colorante fluorescente diverso. Il Porphyromonas gingivalis internalizzato all'interno delle cellule endoteliali viene visualizzato...
Video Duration: 4 minutes and 19 seconds
Questo video dimostra una tecnica per studiare la localizzazione in vivo di anticorpi specifici per il tumore in un modello di xenotrapianto tumorale di topo. Dopo l'iniezione sottocutanea di cellule tumorali nei topi per la formazione del tumore, vengono iniettati anticorpi marcati in fluorescenza che si legano ai recettori specifici del tumore, consentendo la valutazione in vivo della localizzazione degli anticorpi tramite imaging.
Video Duration: 4 minutes and 13 seconds
Questo video dimostra una tecnica di imaging in vivo per rilevare e quantificare l'infiammazione oculare in un modello murino di uveite post-infettiva. La tecnica, nota come tomografia a coerenza ottica (OCT), genera immagini in sezione trasversale ad alta risoluzione dell'occhio per valutare la progressione della malattia.
Video Duration: 3 minutes and 12 seconds
Questo video mostra la visualizzazione di batteri nel tessuto vescicale deparaffinizzato di un paziente infetto dal tratto urinario. La sonda marcata in fluorescenza ibridata con RNA ribosomiale batterico 16s rivela i batteri associati ai tessuti e la loro distribuzione, fornendo preziose informazioni spaziali sulla loro densità all'interno del campione.
Video Duration: 6 minutes and 10 seconds
Questo video dimostra il monitoraggio del reclutamento dei leucociti utilizzando larve di pesce zebra transgenico che esprimono proteina fluorescente verde fotoconvertibile. La pre-iniezione di batteri marcati con colorante fluorescente rosso nella vescicola otica e l'induzione della fotoconversione consentono di osservare la migrazione, la fagocitosi e la dispersione dei leucociti in tutto il corpo, fornendo preziose informazioni sulle dinamiche della risposta immunitaria.
Video Duration: 4 minutes and 2 seconds
Questo video dimostra l'identificazione senza marcatura della morfologia e della biochimica dei linfociti attraverso l'imaging di fase quantitativa 3D. Questa tecnica consente un'analisi approfondita dei linfociti, scoprendo le loro strutture e proprietà interne senza la necessità di procedure di marcatura.
Video Duration: 4 minutes and 37 seconds
Questo video mostra una tecnica per visualizzare la formazione della sinapsi immunologica nelle cellule natural killer (NK) su un doppio strato lipidico supportato (SLB). L'SLB viene prima marcato con un ligando del recettore attivante delle cellule NK marcato con fluoroforo, seguito dall'incubazione con cellule NK. Successivamente, le cellule vengono colorate per l'actina polimerizzata e i granuli litici perforin-positivi. Questo approccio consente la visualizzazione della formazione delle...
Video Duration: 7 minutes and 53 seconds
Questo video mostra una tecnica per visualizzare l'esocitosi nei mastociti. Le cellule sono incubate con FITC-destrano, un reporter fluorescente, che viene assorbito dalle cellule all'interno di granuli secretori (SG), dove il pH acido spegne la sua fluorescenza. Dopo la stimolazione dell'esocitosi dei granuli, il pH più elevato del mezzo induce la fluorescenza reporter all'interno degli SG fusi, che viene visualizzata utilizzando un microscopio a fluorescenza.
Video Duration: 3 minutes and 34 seconds
Il video mostra una tecnica di ferimento e intrappolamento del pesce zebra per osservare l'infezione da patogeni fungini marcati in modo fluorescente nelle larve di pesce zebra. L'infezione iniziale attira i macrofagi e, man mano che l'infezione persiste, il reclutamento dei neutrofili progredisce nel sito di iniezione.
Video Duration: 2 minutes and 58 seconds
Il video dimostra l'uso della fotoconversione per studiare la dinamica delle cellule infiammatorie nelle pupe di Drosophila. Gli emociti verdi sono attratti dall'epitelio ferito, seguiti da una migrazione a distanza. La fotoconversione sposta alcuni emociti dal verde al rosso, facilitando il loro tracciamento del movimento.
Video Duration: 3 minutes and 44 seconds
Questo video mostra l'imaging di cellule vive della topologia immunologica delle sinapsi, studiando le interazioni tra i linfociti T e le cellule epiteliali che trasportano antigeni fluorescenti. La microscopia a fluorescenza rivela lo spostamento del citoplasma rosso e gli anelli gialli della membrana nelle cellule endoteliali, indicando la formazione di sinapsi immunologiche.
Video Duration: 5 minutes and 3 seconds
Questo video dimostra una tecnica di localizzazione in immunofluorescenza (IVIL) in vivo per studiare la biodistribuzione di anticorpi mirati al tumore in un modello murino di cancro al seno. Dopo l'iniezione endovenosa di un anticorpo specifico per il tumore nel topo, il tumore viene isolato chirurgicamente e la localizzazione dell'anticorpo all'interno del tessuto tumorale viene confermata tramite immunocolorazione ex vivo.
Video Duration: 6 minutes and 15 seconds
Questo video dimostra un metodo per tracciare le infezioni virali in modelli murini utilizzando una luciferasi ricombinante e un virus dell'influenza A che esprime la proteina ricombinante e la proteina fluorescente. Questo metodo consente studi sia in vivo che ex vivo, consentendo ai ricercatori di ottenere informazioni sulle dinamiche virali e sugli effetti degli interventi.
Video Duration: 3 minutes and 49 seconds
Questo video dimostra l'applicazione della reazione a catena di ibridazione (HCR)-Ibridazione in situ a fluorescenza (FISH) per visualizzare la distribuzione spaziale dell'RNA subgenomico di SARS-CoV-2. La combinazione dell'HCR con le tecniche di immunofluorescenza ha il potenziale per fornire informazioni sulle interazioni ospite-virus a livello di singola cellula.
Video Duration: 2 minutes and 59 seconds
Questo video mostra la risonanza plasmonica di superficie localizzata per rilevare le secrezioni proteiche da una singola cellula. Utilizzando una configurazione microfluidica e un chip di nanostruttura plasmonica legata a peptidi, i cambiamenti nell'intensità della luce riflessa all'angolo di risonanza rivelano interazioni con le proteine secrete da una singola cellula.
Video Duration: 5 minutes
Questo video mostra il test di micro-neutralizzazione basato sull'imaging per analizzare le relazioni antigeniche tra i virus dell'influenza A e B. Fornisce un modo quantitativo e visivo per valutare l'efficacia degli anticorpi o di altri trattamenti nella prevenzione dell'infezione virale.
Video Duration: 3 minutes and 17 seconds
Questo video mostra un test in vivo progettato per misurare la fagocitosi batterica nelle mosche adulte di Drosophila. Dopo l'iniezione di batteri marcati in fluorescenza nell'addome di mosche adulte, gli emociti associati al vaso dorsale si impegnano nella fagocitosi. L'introduzione del colorante blu di tripano serve a spegnere la fluorescenza emessa dai batteri extracellulari non fagocitati. Questo processo di quenching migliora l'identificazione dei batteri fagocitati quando osservati al...
Video Duration: 4 minutes and 50 seconds
Il video mostra un metodo per valutare le forze dei recettori applicate dalle cellule immunitarie utilizzando nanoparticelle d'oro ancorate al polietilenglicole e sonde di tensione a forcina di DNA. Le interazioni delle cellule T CD8-positive innescano il dispiegamento della sonda, emettendo fluorescenza, mentre i filamenti di blocco sostengono il segnale per quantificare le forze applicate dalle cellule immunitarie.
Video Duration: 5 minutes and 58 seconds
Questo video mostra un metodo di rilevamento colorimetrico di E. coli, che coinvolge un biomarcatore di E. coli che attiva un DNAzima, portando alla scissione del legame RNA e al distacco di un coniugato DNAzima-ureasi. Un successivo test colorimetrico rileva il biomarcatore di E. coli attraverso le variazioni di pH indotte dall'ammoniaca.
Video Duration: 3 minutes and 4 seconds
Questo video mostra un test per studiare la regolazione della traduzione nelle cellule infettate da poxvirus. Le cellule non infette e infettate da virus sono state co-trasfettate con mRNA codificanti per la luciferasi della lucciola (Fluc) e la Renilla luciferasi (Rluc), con l'mRNA di Fluc contenente una sequenza leader 5' Poly(A). Dopo l'aggiunta di substrati bioluminescenti su cellule lisate, misurare il segnale di entrambe le luciferasi per identificare il vantaggio traduzionale dell'mRNA...
Video Duration: 4 minutes and 7 seconds
Questo video mostra la microscopia time-lapse quantitativa per valutare la disseminazione di Listeria monocytogenes dipendente dalla rigidità della matrice extracellulare attraverso le cellule endoteliali. Un idrogel più morbido facilita una più rapida diffusione batterica attraverso le cellule endoteliali rispetto alle controparti più rigide, evidenziando l'influenza della rigidità della matrice sulla disseminazione batterica.
Video Duration: 4 minutes and 24 seconds
Questo video mostra una tecnica di microscopia a fluorescenza a riflessione interna totale (TIRF) ad alta risoluzione per la visualizzazione in tempo reale della formazione e della chiusura dei fagosomi durante la fagocitosi mediata dai macrofagi dei globuli rossi (RBC) opsonizzati da IgG attaccati alla superficie di un piatto con fondo di vetro. I macrofagi estendono gli pseudopodi attorno ai globuli rossi e li inghiottono all'interno dei fagosomi, staccandoli dalla superficie del vetro.
Video Duration: 4 minutes and 13 seconds
Questo video descrive l'imaging di cellule T CD8 infiltranti il tumore residenti marcate con anticorpi accoppiati in fluorescenza all'interno di fette di tumore polmonare umano. Questa tecnica consente di analizzare in tempo reale la migrazione delle cellule T CD8 utilizzando la microscopia confocale.
Video Duration: 4 minutes and 23 seconds
Questo video mostra un test di immunofluorescenza progettato per misurare la neutralizzazione del citomegalovirus umano (HCMV). Gli anticorpi specifici del virus vengono mescolati con il virus e incubati con cellule di fibroblasti umani. Gli anticorpi neutralizzano il virus, rendendolo incapace di infettare le cellule ospiti, mentre i virus non neutralizzati infettano le cellule. Dopo l'incubazione, l'entità della neutralizzazione viene determinata quantificando le cellule infettate dal virus...
Video Duration: 4 minutes and 5 seconds
Questo video dimostra la quantificazione del contenuto di sodio nei tessuti umani utilizzando la risonanza magnetica al sodio (23Na-MRI). La parte inferiore della gamba del paziente viene posizionata all'interno della bobina a radiofrequenza (RF) della macchina e viene eseguita una sequenza tridimensionale gradiente-eco. Le immagini di risonanza magnetica multinucleare vengono generate utilizzando nuclei di idrogeno e sodio per quantificare i livelli di sodio in vari tessuti.
Video Duration: 3 minutes and 16 seconds
Questo video mostra un metodo per stabilire un modello di infezione da organoidi gastrici microiniettando l'agente patogeno gastrico Helicobacter pylori nel lume degli organoidi. Questo modello aiuta a studiare i cambiamenti indotti dall'infezione nelle cellule gastriche.
Video Duration: 3 minutes and 30 seconds
Questo video dimostra lo sviluppo di un modello murino in vivo per studiare la formazione di biofilm di Candida albicans nel tessuto sottocutaneo. L'esperimento prevede l'impianto di dispositivi infetti da Candida nella regione posteriore dell'animale per lo sviluppo del biofilm.
Video Duration: 3 minutes and 50 seconds
Questo video dimostra lo sviluppo della malattia da enterocolite necrotizzante in un modello enteroide neonatale di derivazione umana indotto dal trattamento con lipopolisaccaridi. Questo modello aiuta a studiare la fisiopatologia intestinale.
Video Duration: 5 minutes and 31 seconds
In questo video, dimostriamo una procedura di taglio della coda in un modello murino per raccogliere sangue periferico. Il sangue raccolto viene successivamente sottoposto a centrifugazione per separare il plasma, che può essere utilizzato per ulteriori esperimenti.
Video Duration: 2 minutes and 51 seconds
Questo video dimostra un metodo per indurre l'apoptosi nelle cellule Jurkat - una linea cellulare di leucemia di linfociti T umani. Le cellule sono esposte alle radiazioni ultraviolette C (UVC), che causano ingenti danni al DNA e portano alla morte cellulare apoptotica.
Video Duration: 3 minutes and 54 seconds
In questo video, descriviamo una procedura per gonfiare polmoni umani isolati con agarosio e preparare fette di polmone umano tagliate con precisione. Le fette polmonari ex vivo preparate possono essere utilizzate per ulteriori esperimenti immunologici.
Video Duration: 4 minutes and 26 seconds
Questo video illustra una tecnica per valutare la citotossicità in fette di polmone umano tagliate con precisione attraverso il test WST-1. Le fette di polmone umano tagliate con precisione sono sottoposte a concentrazioni incrementali di una sostanza chimica citotossica per quantificarne la citotossicità. Una diminuzione dell'intensità del colore serve come conferma dell'impatto dannoso della sostanza chimica sulle cellule polmonari.
Video Duration: 3 minutes and 10 seconds
Questo video dimostra l'isolamento e la concentrazione delle proteine filtrate della coltura batterica, che includono vescicole extracellulari batteriche, utilizzando l'ultrafiltrazione. Le vescicole extracellulari concentrate fungono da marcatori diagnostici per il rilevamento della malattia.
Video Duration: 2 minutes and 49 seconds
Questo video mostra la tecnica di cromatografia ad esclusione dimensionale (SEC) per purificare le vescicole extracellulari batteriche (EV) dal filtrato di coltura di Mycobacterium tuberculosis (Mtb). La tecnica utilizza una colonna porosa impaccata di resina per ottenere frazioni purificate di EV. Le particelle porose consentono selettivamente alle proteine più piccole di entrare nei pori, con conseguente eluizione più lenta. Allo stesso tempo, le vescicole extracellulari sono escluse...
Video Duration: 4 minutes and 38 seconds
Questo video mostra il saggio di inibizione della crescita delle piantine nella pianta di Arabidopsis thaliana. Viene determinato l'impatto dell'aumento della concentrazione dell'elicitore del peptide immunitario sulla crescita delle piantine.
Video Duration: 2 minutes and 29 seconds
Questo video dimostra un test per valutare l'efficacia dei farmaci contro l'infezione da Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Viene generato un modello di infezione in vitro contenente aggregati di Mtb/macrofagi che imita l'infezione in vivo. Dopo l'introduzione di antibiotici adeguati, la loro efficacia viene testata tramite il dosaggio della resuzarina per monitorare la sopravvivenza dei batteri con l'aumentare delle concentrazioni di farmaci.
Video Duration: 5 minutes and 14 seconds
Il video mostra una procedura per quantificare il virus Zika in più organi di topo tramite un test di formazione del fuoco. Il processo prevede l'infezione di monostrati di cellule di mammifero con omogeneizzati di tessuto infettati da virus, seguito dall'uso di metilcellulosa per prevenire la diffusione virale. Successivamente, viene impiegata l'immunocolorazione per consentire una quantificazione e una misurazione precise dell'infettività organo-specifica.
Video Duration: 6 minutes and 23 seconds
Questo video dimostra il rilevamento di batteri lattici produttori di batteriocina derivati dalla materia fecale di topo. Il test determina l'attività antimicrobica della batteriocina su specifici ceppi batterici.
Video Duration: 2 minutes and 49 seconds
Questo video dimostra il processo di riduzione dei patogeni basato sulla riboflavina e sulla luce UV contro la contaminazione batterica ad alto titolo nei prodotti piastrinici umani. Questo processo potrebbe aiutare a ridurre il rischio di gravi eventi trasfusionali avversi associati alla contaminazione batterica.
Video Duration: 5 minutes and 9 seconds
Questo video dimostra la misurazione in vitro dell'attività enzimatica per la α-galattosidasi A e l'acido α-glucosidasi in campioni utilizzando substrati sintetici di 4-metilumbelliferile.
Video Duration: 3 minutes and 20 seconds
Questo video mostra un test in vitro per lo screening di composti antifungini utilizzando un test di microdiluizione del brodo. I composti in esame vengono diluiti in serie in una piastra per microtitolazione e incubati con un inoculo fungino. Dopo l'incubazione, la piastra viene esaminata alla ricerca di pozzetti senza crescita fungina visibile per valutare il potenziale antimicotico dei composti in esame e la loro concentrazione minima inibitoria (MIC).
Video Duration: 3 minutes and 48 seconds
Questo video mostra un test in vitro per esplorare l'influenza immunomodulatoria delle cellule staminali mesenchimali (MSC) sulla proliferazione delle cellule T effettrici. Il test include la co-coltura di MSC con PBMC per indurre la popolazione di monociti ad acquisire un fenotipo immunomodulatore, portando alla secrezione di interleuchina-10 (IL-10). Dopo l'incubazione con cellule T CD4+ attivate, i monociti indotti sopprimono efficacemente la proliferazione delle cellule T.
Video Duration: 2 minutes and 46 seconds
Il video dimostra un metodo per studiare l'impatto delle cellule stromali sul reclutamento dei leucociti. In un modello di camera a flusso a piastre parallele, le citochine pro-infiammatorie inducono l'espressione di recettori di adesione da parte delle cellule endoteliali, facilitando il reclutamento e la migrazione dei neutrofili. Il cross-talk tra le cellule stromali e le cellule endoteliali diminuisce il reclutamento dei neutrofili nelle cellule endoteliali.
Video Duration: 5 minutes and 52 seconds
Questo video descrive un metodo per far crescere e analizzare qualitativamente i biofilm batterici su ife fungine utilizzando la microscopia. I biofilm batterici si formano frequentemente sulle superfici fungine e coinvolgono numerosi processi di interazione batterico-fungina, come la cooperazione metabolica, la competizione o la predazione.
Video Duration: 4 minutes and 37 seconds
Questo video mostra un test per monitorare gli eventi di fagocitosi dei globuli rossi (RBC) mediati da macrofagi indipendenti. I globuli rossi umani opsonizzati con immunoglobuline G (IgG) di topo vengono incubati con macrofagi di topo e osservati al microscopio confocale. I globuli rossi sono inghiottiti dai macrofagi attraverso la formazione di una coppa fagocitaria e mirati alla degradazione lisosomiale.
Video Duration: 4 minutes and 33 seconds
Questo video dimostra un metodo per studiare la migrazione delle cellule natural killer (NK) attraverso un sistema di inserti a membrana porosa in risposta ai chemioattrattivi. Questo metodo consente l'analisi quantitativa della migrazione delle cellule NK mediante citometria a flusso.
Video Duration: 2 minutes and 29 seconds
Questo video dimostra una tecnica per valutare l'attività battericida mediata dal complemento degli anticorpi presenti nel siero. Questo approccio combina siero isolato con batteri patogeni e proteine esogene del complemento. Dopo l'incubazione, i batteri vengono coltivati su una piastra di agar e le colonie prodotte vengono quantificate per misurare il titolo battericida sierico.
Video Duration: 5 minutes and 40 seconds
Il video mostra un test di inibizione dell'emoagglutinazione per rilevare anticorpi sierici contro antigeni specifici. La conferma dell'inibizione dell'emoagglutinazione nel pozzetto del test e dell'emoagglutinazione nel pozzetto di controllo si ottiene attraverso modelli visivi distinti. Questo test svolge un ruolo cruciale nella valutazione della risposta immunitaria, dell'efficacia del vaccino e nello studio delle infezioni virali in virologia e immunologia.
Video Duration: 3 minutes and 59 seconds
Questo video mostra un test per studiare la citotossicità delle proteine prodotte da Staphylococcus aureus, un batterio patogeno, su leucociti polimorfonucleati umani isolati (PMN). Le proteine citotossiche secrete formano pori sulla membrana cellulare PMN, avviando la morte cellulare. Dopo aver colorato le cellule morte con ioduro di propidio, viene eseguita la citometria a flusso per quantificare le cellule morte e valutare la citotossicità dei batteri.
Video Duration: 3 minutes and 14 seconds
In questo video, dimostriamo un test per rilevare la citotossicità di ceppi virulenti e meno virulentidi S taphylococcus aureus contro neutrofili umani dopo fagocitosi utilizzando la citometria a flusso.
Video Duration: 3 minutes and 35 seconds
Questo video dimostra una tecnica per valutare la capacità di Porphyromonas gingivalis, un batterio patogeno anaerobico, di aderire e invadere le cellule endoteliali della vena ombelicale umana (HUVECs). Dopo aver infettato le cellule ospiti con i batteri, le cellule ospiti vengono lisate per rilasciare sia i batteri aderiti che quelli internalizzati. Quando il lisato viene placcato in un mezzo appropriato, la presenza di colonie indica interazioni batteriche-cellule ospiti riuscite.
Video Duration: 5 minutes and 28 seconds
Il video mostra un test di uccisione opsonofagocitaria in vitro utilizzando una co-coltura di neutrofili umani con Streptococcus pneumoniae. Gli anticorpi e le proteine del complemento facilitano l'opsonizzazione dei batteri, consentendo ai neutrofili di riconoscere e uccidere i batteri, mostrando un'attività opsonofagocitaria di successo.
Video Duration: 4 minutes and 29 seconds
In questo video, dimostriamo un test per valutare la sopravvivenza di Porphyromonas gingivalis all'interno delle cellule endoteliali umane. La misura della sopravvivenza e della crescita di Porphyromonas gingivalis internalizzato è valutata dal numero di colonie sulla piastra di agar sanguigno.
Video Duration: 2 minutes and 37 seconds
Questo video dimostra una tecnica in vitro per misurare la capacità citotossica delle cellule killer indotte da citochine (CIK) contro le cellule tumorali. Dopo la co-coltura di cellule tumorali bersaglio con cellule CIK, le cellule tumorali morte vengono identificate utilizzando un colorante fluorescente di vitalità e vengono quantificate utilizzando la citometria a flusso, stimando l'effetto citotossico delle cellule CIK.
Video Duration: 5 minutes and 27 seconds
In questo video, dimostriamo un test che utilizza la microscopia a fluorescenza per rilevare l'adesione delle cellule tumorali alle trappole extracellulari dei neutrofili (NET). Nei pozzetti di prova, c'è un notevole aumento del numero di cellule tumorali marcate in fluorescenza che aderiscono ai NET, mentre i pozzetti trattati con DNasi mostrano una ridotta adesione delle cellule tumorali ai NET.
Video Duration: 4 minutes and 25 seconds
Questo video mostra il test della lattato deidrogenasi, LDH per misurare l'effetto citotossico di una sostanza in esame e il suo effetto sull'integrità della membrana in fette di polmone umano tagliate con precisione. Il test fornisce una misura quantitativa della morte o del danno cellulare nel campione.
Video Duration: 2 minutes and 58 seconds
Questo video dimostra lo screening di composti immunomodulatori tramite test basati sulla fluorescenza. I linfociti T transgenici derivati da topi con cassette di espressione proteica fluorescente verde sono trattati con questi composti. I segnali GFP potenziati e ridotti consentono l'identificazione degli effetti stimolatori e inibitori dei composti, rispettivamente.
Video Duration: 2 minutes and 57 seconds
Questo video mostra la valutazione dell'attivazione delle cellule B attraverso l'utilizzo di liposomi antigenici. Le cellule B trattate con colorante Indo-1 sensibile al calcio vengono distinte utilizzando la citometria a flusso e viene analizzato il loro rapporto di fluorescenza viola-blu. Quando le cellule incontrano liposomi antigenici, innesca l'attivazione delle cellule B attraverso l'afflusso di calcio, migliorando progressivamente il rapporto del segnale di fluorescenza viola-blu nel...
Video Duration: 3 minutes and 54 seconds
Questo video mostra un metodo per quantificare l'infezione fungina nelle larve di zebrafish. Le spore fungine vengono microiniettate nel ventricolo larvale del rombencefalo e le larve vengono incubate per consentire lo sviluppo dell'infezione. Le larve infette vengono raccolte a intervalli definiti e l'andamento dell'infezione viene valutato enumerando le unità formanti colonie.
Video Duration: 2 minutes and 24 seconds
Questo video dimostra un test di aderenza all'opsono per esaminare l'interazione tra batteri opsonizzati e cellule immunitarie. I batteri marcati in fluorescenza, trattati con siero di prova contenente anticorpi anti-capsula, vengono incubati con macrofagi. Dopo aver colorato i macrofagi con la fluorescenza, i batteri attaccati sulla superficie dei macrofagi vengono osservati al microscopio per la visualizzazione.
Video Duration: 6 minutes and 34 seconds
Questo video mostra una tecnica di immunodosaggio multiplex basata su perline per rilevare simultaneamente gli anticorpi per più agenti patogeni ambientali nella saliva umana. Le perle fluorescenti sono state accoppiate ad antigeni di diversi agenti patogeni, che sono stati catturati utilizzando anticorpi nel campione di saliva umana. Dopo aver marcato gli anticorpi utilizzando un reporter fluorescente, le perle sono state analizzate utilizzando la citometria a flusso per valutare la presenza...
Video Duration: 3 minutes and 45 seconds
Questo video dimostra un metodo per quantificare la fagocitosi delle spore fungine patogene marcate con FITC da parte dei leucociti umani. Le spore fagocitate vengono distinte dalle spore aderenti alle cellule attraverso la controcolorazione, seguita dall'analisi citofluorimetrica.
Video Duration: 5 minutes and 28 seconds
Questo video mostra un test per caratterizzare e quantificare i granuli di stress dei mammiferi, che consistono in mRNA, proteine leganti l'RNA (RBP) e varie altre proteine.
Video Duration: 4 minutes and 34 seconds
Questo video mostra il test per confermare l'attività fagocitaria da parte delle cellule nel sangue umano tramite citometria a flusso. I granulociti e i monociti confermano la loro attività fagocitaria mostrando una fluorescenza verde e rossa che confermano rispettivamente la presenza di batteri inghiottiti e l'attività ossidativa burst.
Video Duration: 4 minutes and 59 seconds
Questo video dimostra la quantificazione dei livelli di mediatore immunitario nell'estratto di liquido per rivestimento della mucosa nasale umana neonatale. Un sistema di saggi multiplex basato sull'elettrochemiluminescenza misura questi mediatori valutando l'intensità della luce emessa quando sono eccitati.
Video Duration: 2 minutes and 55 seconds
Questo video mostra un test per lo screening dell'attività proteolitica delle proteasi utilizzando peptidi fluorogenici. La proteasi riconosce il suo sito di scissione sul peptide, scorporandolo e separando il quencher dal fluoroforo, consentendone l'emissione di fluorescenza. Il segnale di fluorescenza viene rilevato e analizzato per verificare l'efficienza di scissione di diverse varianti peptidiche.
Video Duration: 2 minutes and 42 seconds
Questo video mostra un test di fagocitosi basato sulla citometria a flusso che coinvolge eritrociti infettati da Plasmodium falciparum marcati e opsonizzati da monociti. La citometria a flusso identifica la fluorescenza nei monociti, confermando il successo dell'identificazione degli eritrociti opsonizzati attraverso la fagocitosi.
Video Duration: 6 minutes and 56 seconds
Questo video mostra un test in vitro per quantificare l'attività della proteasi della serina neutrofila in campioni di espettorato. Il campione contenente proteasi secreta viene incubato con un reporter fluorescente recante un motivo di riconoscimento. La scissione del motivo da parte della proteasi consente l'emissione di fluorescenza individuale da parte del fluoroforo donatore e accettore del reporter, indicando l'attività della proteasi nel campione.
Video Duration: 2 minutes and 59 seconds
Questo video mostra un test di apoptosi in cellule tumorali indotta da cellule T effettrici pre-attivate. Co-coltivando queste cellule con cellule tumorali marcate con nuclei fluorescenti, viene aggiunto un substrato fluorogenico scissibile della caspasi. Le cellule tumorali apoptotiche mostreranno un colore diverso nei loro nuclei, portando alla doppia fluorescenza. Questa doppia fluorescenza è indicativa di cellule tumorali in fase di apoptosi.
Video Duration: 5 minutes and 4 seconds
Questo video mostra saggi di microneutralizzazione per misurare gli anticorpi neutralizzanti utilizzando cellule renali canine Madin-Darby che sovraesprimono l'acido sialico legato all'α2,6 in sieri umani. Questo test è spesso utilizzato per la sierologia umana...
Video Duration: 5 minutes and 33 seconds
Questo video mostra un test per misurare l'esplosione ossidativa nelle foglie di Arabidopsis dopo l'elicitazione immunitaria. I dischi fogliari, tagliati dalle foglie delle piante, sono incubati con peptidi batterici che funzionano come modelli molecolari associati ai microbi o MAMP. Dopo il rilevamento dei MAMP, le cellule vegetali inducono la produzione di ROS extracellulari, che viene rilevato utilizzando un saggio di chemiluminescenza.
Video Duration: 2 minutes and 58 seconds
Questo video mostra un test per il rilevamento in tempo reale della produzione di specie reattive dell'ossigeno (ROS) nei tessuti di riso dopo l'elicitazione di pattern molecolari associati a patogeni (PAMP). I segmenti della guaina tagliata e i dischi fogliari sono esposti a un peptide derivato da flagelli batterici che funziona come un PAMP. Dopo il riconoscimento del peptide tramite recettori di riconoscimento del pattern (PRR) sulle cellule vegetali, si verifica una produzione rapida e...
Video Duration: 3 minutes and 42 seconds
Questo video mostra un test monostrato di monociti che utilizza monociti primari provenienti da sangue periferico per valutare la fagocitosi mediata dal recettore Fcγ con globuli rossi R2R2 opsonizzati con anticorpi poli D.
Video Duration: 3 minutes and 30 seconds
Questo video mostra il Charcoal Agar Resazurin Assay (CARA) per valutare l'attività dei composti antimicrobici contro il Mycobacterium tuberculosis. CARA aiuta a valutare l'efficacia di questi composti misurando il loro impatto sulla crescita batterica e distinguendo tra effetti battericidi e batteriostatici.
Video Duration: 6 minutes and 8 seconds
Questo video mostra un test per esaminare l'attività dipendente dal recettore toll-like (TLR) dei fattori di trascrizione fattore nucleare-kappa-B (NF-κB) e proteina attivatrice-1 (AP-1) nei macrofagi. I TLR innescano una cascata di segnalazione pro-infiammatoria dopo aver riconosciuto i pattern molecolari associati al danno (DAMP), attivando NF-κB e AP-1. I macrofagi reporter ingegnerizzati producono l'enzima fosfatasi alcalina embrionale (SEAP) secreto dopo l'attivazione di NF-κB e AP-1, che...
Video Duration: 4 minutes and 8 seconds
Questo video dimostra un metodo per monitorare l'attività delle cellule T CAR contro le cellule tumorali attraverso misurazioni dell'impedenza elettrica in tempo reale. Il monitoraggio dei cambiamenti nell'impedenza valuta l'efficacia delle cellule CAR T nell'indurre la citolisi delle cellule tumorali, fornendo informazioni sulle loro capacità citotossiche.
Video Duration: 3 minutes and 11 seconds
Questo video dimostra una tecnica per valutare l'efficacia degli anticorpi contro il fattore di necrosi tumorale-alfa (TNFα), una citochina infiammatoria, attraverso un approccio bioanalitico in vitro. Il TNFα, quando introdotto nelle cellule stressate, innesca l'apoptosi. Tuttavia, il legame con gli anticorpi confina il TNFα, evitando l'apoptosi. Il grado di apoptosi viene quantificato utilizzando un saggio di bioluminescenza.
Video Duration: 5 minutes and 54 seconds
Questo video mostra un test basato su MoDC su cellule dendritiche derivate da monociti per misurare l'immunogenicità dei vaccini disponibili in commercio. I saggi MoDC studiano le risposte delle cellule dendritiche ad antigeni, agenti patogeni o trattamenti e possono fornire informazioni sulle risposte immunitarie, sullo sviluppo di vaccini e sulla ricerca sull'immunoterapia.
Video Duration: 5 minutes and 16 seconds
Questo video dimostra il test di disturbo dell'emocita, valutando la riadesione degli emociti nelle tasche ematopoietiche delle larve di Drosophila. Il disturbo meccanico rilascia gli emociti residenti, aumentando la conta degli emociti circolanti. Dopo il recupero, la riaderenza degli emociti residenti è confermata, illustrando la reversibilità.
Video Duration: 2 minutes and 19 seconds
Questo video mostra un test per misurare l'aumento anticorpo-dipendente (ADE) dell'infezione da virus Dengue utilizzando il siero convalescente del virus Zika. Il test utilizza particelle virali reporter di Dengue (RVP) che codificano per una proteina fluorescente verde. Gli anticorpi sierici contro il virus Zika reagiscono in modo incrociato con gli RVP per formare un complesso. Gli anticorpi legati aumentano l'assorbimento di RVP da parte delle cellule che esprimono il recettore Fc, che viene...
Video Duration: 5 minutes and 35 seconds
Questo video mostra un test per quantificare la crescita intracellulare dei parassiti nei macrofagi derivati dal midollo osseo (BMM). Le cellule macrofagiche sono infettate dagli stadi invasivi mobili e non mobili della Leishmania, rispettivamente i promastigoti metaciclici e gli amastigoti. I parassiti invadono i macrofagi, interiorizzandosi in un vacuolo parassitoforo e moltiplicandosi all'interno. La crescita intracellulare del parassita viene quantificata utilizzando un microscopio dopo...
Video Duration: 3 minutes and 29 seconds
Questo video mostra il test di rilascio del colorante per quantificare l'attività enzimatica delle proteine antimicrobiche. La proteina antimicrobica degrada la parete cellulare marcata con il colorante dei batteri e rilascia le molecole di colorante trasformando la soluzione in blu. L'assorbanza della soluzione è correlata all'attività enzimatica della proteina antimicrobica.
Video Duration: 6 minutes and 1 second
Questo video mostra un test su piastra spot su misura per valutare le risposte allo stress ossidativo dei ceppi batterici. Alcuni ceppi producono piomelanina, un pigmento antiossidante. Al contrario, i ceppi trattati con un agente di prova, che portano a una ridotta produzione di piomelanina, mostrano una maggiore suscettibilità allo stress ossidativo, con conseguente diminuzione della vitalità cellulare rispetto ai ceppi produttori di piomelanina.
Video Duration: 5 minutes and 10 seconds
Questo video dimostra un test in brodo per determinare l'efficacia degli antibiotici contro il Mycobacterium tuberculosis. La coltura batterica viene incubata con diverse concentrazioni di un antibiotico battericida. L'efficacia battericida viene misurata valutando la presenza di batteri vitali utilizzando un test della resazurina.
Video Duration: 2 minutes and 20 seconds
Questo video mostra un test per lo screening di composti antimicrobici che eliminano efficacemente i biofilm utilizzando una piastra a pioli. La metodologia monitora lo stato metabolico del biofilm dopo il trattamento con composti antimicrobici, facilitando la determinazione della concentrazione minima di eradicazione del biofilm.
Video Duration: 6 minutes and 41 seconds
Questo video mette in evidenza un metodo proteomico a singola cellula che impiega anticorpi coniugati con metalli pesanti per la codifica a barre di cellule distinte. Successivamente, l'immunocolorazione e la citometria di massa vengono applicate per valutare le alterazioni fenotipiche e funzionali immunitarie nelle cellule immunitarie derivate da sangue intero umano.
Video Duration: 5 minutes and 42 seconds
Questo video mostra un test per il monitoraggio della migrazione delle cellule dendritiche a seguito di infezione del piede con Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Guérin BCG nei topi. In caso di infezione batterica, le cellule DC cutanee attivate vengono marcate con un colorante a base di carbossifluoresceina diacetato succinimidil estere (CFSE) permeabile alle cellule. Dopo un intervallo adeguato per la migrazione delle DC al linfonodo popliteo drenante, le cellule linfonodali vengono...
Video Duration: 4 minutes and 34 seconds
Questo video illustra la ricostituzione di cellule sintetiche presentanti l'antigene attraverso i doppi strati lipidici supportati da perline e la loro applicazione nella valutazione dell'output sinaptico generato dalle cellule T attivate.
Video Duration: 3 minutes and 49 seconds
Questo video mostra il test di inibizione della crescita differita, utilizzato per studiare come i composti antimicrobici prodotti da un tipo di batteri influenzano un altro ceppo batterico concorrente.
Video Duration: 3 minutes and 37 seconds
Questo video dimostra l'analisi turbidimetrica per valutare l'aggregazione piastrinica indotta dal collagene in piastrine umane pretrattate e lavate. I pozzetti di controllo mostrano un'aggregazione indotta dal collagene, mentre un'alta concentrazione di inibitori blocca i canali della Pannexina-1, inibendo così l'aggregazione piastrinica indotta dal collagene, evidente dalla torbidità invariata.
Video Duration: 5 minutes and 42 seconds
Questo video mostra il test di inattivazione virale, mostrando la valutazione dell'impatto degli agenti antivirali sulle particelle virali.
Video Duration: 3 minutes and 41 seconds
Questo video mostra un test di attaccamento virale per lo screening di composti antivirali. Utilizzando il virus dell'epatite C geneticamente modificato e la luciferasi, valuta gli effetti inibitori sull'attaccamento virale, come indicato dalla minore intensità della luce nei pozzetti co-trattati rispetto ai pozzetti trattati con il solo virus.
Video Duration: 2 minutes and 47 seconds
Questo video mostra un test per valutare agenti antivirali che mirano a fasi specifiche dell'ingresso virale nelle cellule ospiti e della fusione con l'endosoma. Le cellule vengono incubate a bassa temperatura e quindi infettate con l'HCV. La bassa temperatura consente il legame virale con le cellule ospiti, ma inibisce l'internalizzazione tramite endocitosi. Viene aggiunto il composto antivirale in esame e le cellule vengono incubate a temperatura fisiologica. Questo passaggio a una...
Video Duration: 2 minutes and 38 seconds
Il video mostra un test per quantificare i virus influenzali A e B. Questo test utilizza l'amplificazione dell'endonucleasi con primer specifici per l'influenza e il rilevamento del bersaglio mediante sonde beacon molecolari.
Video Duration: 3 minutes and 49 seconds
Questo video mostra un metodo basato su piastra per microtitolazione per determinare la concentrazione inibitoria minima (MIC) degli antibiotici in prova contro i batteri. Dopo l'aggiunta di una sospensione del patogeno batterico Pseudomonas aeruginosa a una piastra per microtitolazione contenente diluizioni seriali di un antibiotico in esame e di un inibitore della produzione di piomelanina da parte dei batteri, viene misurata la densità ottica dei pozzetti per calcolare la concentrazione...
Video Duration: 5 minutes and 16 seconds
Questo video mostra un test per studiare l'effetto della rigidità della matrice extracellulare (ECM) sull'infezione batterica delle cellule aderenti. Gli idrogel di poliacrilammide di rigidità variabile, ricoperti di collagene, sono stratificati in una piastra a più pozzetti per imitare la rigidità della ECM fisiologica. Dopo aver sovrapposto cellule endoteliali umane sugli idrogel e aver infettato le cellule con batteri Listeria monocytogenes ingegnerizzati per esprimere una proteina...
Video Duration: 4 minutes and 10 seconds
Questo video mostra il metodo per eseguire un test della placca utilizzando un virus ottenuto da cornea suina infetta. La cornea suina viene utilizzata per testare l'efficacia antivirale di farmaci sperimentali.
Video Duration: 2 minutes and 48 seconds
Questo video illustra l'inizio della formazione di biofilm polimicrobici su cellule infettate da virus da parte di batteri e funghi. L'infezione da virus dell'herpes simplex impedisce l'adesione batterica alle cellule, impedendo la co-localizzazione batterico-fungina. Al contrario, le cellule non infette mostrano una co-localizzazione batterico-fungina e l'inizio della formazione di biofilm.
Video Duration: 3 minutes and 57 seconds
Questo video descrive il semplice test di misurazione dell'ATP utilizzando il reagente per la luciferasi glow. Questo test viene utilizzato per quantificare la sopravvivenza di Neisseria gonorrhoeae dopo il trattamento con ceftriaxone.
Video Duration: 2 minutes and 56 seconds
Questo video illustra un test basato sulla citometria a flusso per quantificare le cellule tumorali senescenti indotte dalla terapia con doppi marcatori di senescenza. La rilevazione e la quantificazione delle cellule senescenti comportano l'utilizzo di un substrato β-galattosidasi. Il substrato viene scisso dalla β-galattosidasi lisosomiale attiva all'interno delle cellule senescenti, producendo un prodotto fluorescente che, in combinazione con granuli di lipofuscina autofluorescenti, marcare...
Video Duration: 4 minutes and 19 seconds
Questo video mostra una tecnica per rilevare contaminanti batterici in campioni di cibo e acqua utilizzando nanosensori. I batteri patogeni bersaglio vengono rilevati attraverso una combinazione di modalità di rilassamento magnetico e di emissione di fluorescenza.
Video Duration: 3 minutes and 8 seconds
Il video dimostra un saggio di aderenza in fase solida per valutare la formazione di biofilm. In una piastra a più pozzetti, i batteri nei terreni integrati con sali biliari aderiscono alle superfici solide, formando biofilm, che viene confermato dalla colorimetria attraverso la colorazione con cristallovioletto e il trattamento con etanolo.
Video Duration: 4 minutes and 7 seconds
Questo video dimostra un metodo basato sulla fluorescenza per quantificare la formazione di biofilm indotta da sali biliari. Dopo l'aggiunta di sali biliari nella coltura di un batterio enterico patogeno, la produzione di biofilm viene rilevata utilizzando una lectina fluorescente che si lega ai polisaccaridi nella matrice di sostanza polimerica extracellulare (EPS) del biofilm.
Video Duration: 2 minutes and 50 seconds
Il video mostra un saggio di dispersione di biofilm utilizzando una piastra multi-pozzetto. Il trattamento con tampone e glucosio smonta il biofilm, rilasciando batteri, mentre i sali biliari inducono stress, trattenendo i batteri nella sostanza polimerica extracellulare protettiva. Una maggiore dispersione con tampone e glucosio conferma il successo del disassemblaggio del biofilm, stimato dalla misurazione delle unità formanti colonie.
Video Duration: 2 minutes and 49 seconds
Questo video mostra un test in tempo reale per il monitoraggio del pH extracellulare nei biofilm dentali utilizzando una sonda raziometrica sensibile al pH. Quando un biofilm batterico cresciuto in situ è esposto al glucosio, una riduzione del pH extracellulare vicino alla biomassa batterica protona la sonda, portando al suo aumento della concentrazione all'interno dei batteri. La disparità nella lunghezza d'onda di emissione tra la sonda protonata e quella non protonata viene utilizzata per...
Video Duration: 6 minutes and 52 seconds
Il video mostra un test di citometria a flusso di trasferimento di energia per risonanza di fluorescenza (FRET) per rilevare l'attività di semina di aggregati proteici isolati da campioni biologici. Le cellule di mammifero che esprimono proteine reporter tau sono incubate con complessi di trasduzione dei liposomi contenenti semi di tau. Questi semi mediano l'aggregazione delle proteine reporter, portando alla generazione di un segnale positivo FRET nel citometro a flusso.
Video Duration: 4 minutes and 11 seconds
Questo video mostra la rilevazione quantitativa multiplex di batteri utilizzando microsfere di polistirene magnetico carbossilato colorate in set distinti. La procedura comprende la formazione di complessi perline-batteri, la separazione magnetica e l'analisi basata sul flusso, consentendo una quantificazione precisa e simultanea di più batteri nello stesso pozzetto di reazione.
Video Duration: 3 minutes and 54 seconds
Questo video mostra un test di neutralizzazione che misura l'efficacia del siero nella neutralizzazione dei virus SARS-CoV-2. Coinvolge virus pseudotipizzati, diluizione del siero e quantificazione basata sulla luminescenza, rivelando il titolo di neutralizzazione.
Video Duration: 5 minutes and 30 seconds
Questo video mostra un test per monitorare l'attivazione dei neutrofili e l'esocitosi dei granuli attraverso un test di degranulazione. Dopo l'attivazione da parte di composti proinfiammatori, i granuli citoplasmatici all'interno dei neutrofili contenenti gelatinasi si fondono con la membrana cellulare, scaricando il loro carico. La presenza di gelatinasi nel surnatante viene valutata attraverso l'idrolisi di un substrato di gelatina coniugato con fluorofori, confermando l'attivazione e la...
Video Duration: 3 minutes and 50 seconds
Questo video mostra un saggio di degranulazione di granuli azurofili in neutrofili di topo, che coinvolge la stimolazione dei neutrofili per rilasciare granuli azurofili contenenti mieloperossidasi. La successiva reazione enzimatica viene impiegata per quantificare i livelli di mieloperossidasi, fornendo informazioni sull'attivazione dei neutrofili.
Video Duration: 3 minutes and 5 seconds
Questo video mostra una procedura per raccogliere l'urina del topo e valutarne i livelli di glucosio. Per valutare il livello di glucosio, immergere nel campione una striscia reattiva rivestita con enzimi e un colorante cromogenico, avviando un cambiamento di colore che indica i livelli di glucosio. Per quantificare i livelli di glucosio nelle urine, introdurre un campione di urina in una piastra multipozzetto con concentrazioni di glucosio crescenti, aggiungere la miscela di reazione e...
Video Duration: 4 minutes and 42 secondsRisparmia tempo nell’apprendere nuovi protocolli e forma efficientemente i membri del laboratorio
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