| Azioni di Drosophila | | | |
| Onnipresente E-caderina marcata GFP; Ubi-p63E-shg.GFP; (chrII) | Centro Azionario di Kyoto, DGRC | #109007 | Le sequenze del promotore Ubi-p63E guidano l'espressione di Drosophila E-caderina (fucile da caccia) marcata all'estremità C-terminale con GFP. |
| Onnipresente E-caderina con tag GFP; Ubi-p63E-shg.GFP (III) | Centro di stoccaggio di Drosophila di Bloomington (Università dell'Indiana) | #58742 | Le sequenze del promotore Ubi-p63E guidano l'espressione di Drosophila E-caderina (fucile da caccia) marcata all'estremità C-terminale con GFP. |
| Ubiquitario Moesin con tag GFP P{sGMCA}3.1 | Centro di stoccaggio di Drosophila di Bloomington (Università dell'Indiana) | #59023 | Il promotore/potenziatore sqh espresso in modo ubiquitario guida l'espressione di un frammento di Moesin (che include le sequenze di legame dell'actina) marcato con GFPS65T. |
| Driver specifico per l'emocita serpente-Gal4 ; srp-Gal4; | Generato da Katja Bruckner | Generato da Katja Bruckner | L'espressione di Scer\GAL4 fusa con una coda di poliA è controllata da 2 sequenze genomiche provenienti da monte di Drosophila serpent. Rif: Brückner, K., Kockel, L., Duchek, P., Luque, C.M., Rørth, P., Perrimon, N. Il recettore PDGF/VEGF controlla la sopravvivenza delle cellule del sangue in Drosophila. Cellula di sviluppo. 7 (1), 73–84, doi: 10.1016/j.devcel.2004.06.007 (2004). |
| UAS-nucleareRFP w1118;; P{UAS-RedStinger}6 | Centro di stoccaggio di Drosophila di Bloomington (Università dell'Indiana) | #8545 o #8547 | Le sequenze regolatorie UAS guidano l'espressione della forma DsRed.T4 di RFP che è marcata all'estremità C-terminale con un segnale di localizzazione nucleare |
| UAS-GFP citoplasmatica ;; P{UAS-GFP. S65T} | Centro di stoccaggio di Drosophila di Bloomington (Università dell'Indiana) | Più stock disponibili (es. #1522) | Espressione della versione S65T della GFP da parte di sequenze regolatorie UAS; la variante S65T mostra una maggiore luminosità. |
| UAS-fotoconvertibileKaede w1118;; P{UAS-Kaede.A}3 | Centro di stoccaggio di Drosophila di Bloomington (Università dell'Indiana) | #26161 | La proteina Kaede emette una fluorescenza verde brillante dopo la sintesi, ma cambia in modo efficiente in una fluorescenza rossa brillante stabile durante l'irradiazione con i raggi UV. |
| Spaghetti di zucca con tag GFP w1118;; P{sqh-GFP.RLC} | Centro di stoccaggio di Drosophila di Bloomington (Università dell'Indiana) | #57145 | La regione codificante sqh, che è marcata all'estremità C-terminale con un tag T:Avic\GFPS65T, è espressa sotto il controllo del promotore sqh naturale. |
| Ingredienti per terreni di alimentazione per mosche | | | I terreni di alimentazione per mosche sono realizzati secondo le procedure standard (vedi Greenspan, R. 1997. Spingere le mosche: la teoria e la pratica della genetica della Drosophila. Cold Spring Harbor Press. 1-191 pp.) |
| mais | Wild Oats, Bristol, Regno Unito (o fornitore equivalente) | Contatta il fornitore direttamente | organico |
| Farina di soia | Wild Oats, Bristol, Regno Unito (o fornitore equivalente) | Contatta il fornitore direttamente | organico |
| Estratto di malto | Wild Oats, Bristol, Regno Unito (o fornitore equivalente) | Contatta il fornitore direttamente | organico |
| melassa | Wild Oats, Bristol, Regno Unito (o fornitore equivalente) | Contatta il fornitore direttamente | organico |
| Difco agar | BD Bioscienze, Fisher Scientific | DF0142-15-2 | Per la preparazione di cibo per mosche |
| Acido propionico | sigma | 402907 | Per la preparazione di cibo per mosche |
| Nipagen | sigma | Codice 79721 | Per la preparazione di cibo per mosche |
| Lievito di birra essiccato | Redstar, Dutscher Scientific, UK LTD | Redstar, Dutscher Scientific, UK LTD | Per la preparazione di cibo per mosche |
| Preparazione e montaggio del campione | | | |
| Parafilm | sigma | P7793-1EA | Per la preparazione della colla eptanica |
| Pennello di zibellino fine | Daler-Rowney (o equivalente) | #0 o 1 | |
| forcipe | Fisher Scientific (o strumenti di scienze fini) | NC9404145 | Dumont #5 |
| Dischi con fondo in vetro per l'imaging | MatTek | P35G-0-10-C | Si consiglia di utilizzare piastre di Petri da 35 mm, con almeno un Microwell da 10 mm, vetro di copertura da 0,085-0,13 mm, non rivestito. Le piastre con micropozzetti più grandi consentiranno di montare e visualizzare un numero crescente di pupe in un singolo esperimento. |
| eptano | sigma | 51730-5ML | Per la preparazione della colla eptanica |
| Nastro biadesivo (es. Scotch) | Agar Scientifico | AGG263 | Per la preparazione della colla eptanica |
| Tubo da 50 ml (per colla eptanica) | Tubi Falcon di Fisher Scientific | 14-432-22 | Per la preparazione della colla eptanica |
| Vetrini per microscopio in vetro | Agar Scientifico | AGL4244 | Per la dissezione di pupe di Drosophila |
| Stereomicroscopio da dissezione con campo chiaro | Leica (o equivalente) | M50 | Per la dissezione di pupe di Drosophila |
| Microforbici | John Weiss International | 103123 | Forbici da ricerca in miniatura (dritte) |
| Ablazione laser e imaging | | | |
| Laser per ablazione con nitogeno | Spectra-Physics (o Andor equivalente) | Modello VSL-337ND-S | Per le ferite, questo dovrebbe essere collegato a un sistema di imaging a campo largo |
| Microscopio confocale a scansione laser multilaser (CLSM) | Leica (o equivalente) | TCS AOBS SP8 o SP5-II collegato a un microscopio a epifluorescenza invertita Leica DMi8 (o equivalente) | Idealmente include uno stadio motorizzato per la scansione multi-sito e "a mosaico", oltre a rivelatori GaAsP "ibridi" (che offrono una sensibilità molto maggiore e l'aumento del segnale basso) |
| Camera climatica | Servizi di imaging Life (o equivalente) | "Sistema di controllo della temperatura del microscopio" | Collegato al microscopio confocale per il controllo della temperatura durante l'imaging |
| Software di analisi delle immagini | | | |
| Modulo software FRAP | Leica (o equivalente) | Modulo software CLSM FRAP | Per l'esecuzione di fotoconversione di fluorofori fotoconvertibili come Kaede |
| ImageJ (software di analisi delle immagini) | Istituti Nazionali di Sanità (NIH) | https://imagej.nih.gov/ij/ | Schneider, C.A., Rasband, W.S., Eliceiri, K.W. "NIH Image to ImageJ: 25 anni di analisi delle immagini". Metodi della natura 9, 671-675, 2012. |
| Plugin ImageJ "Tracciamento manuale" | Istituti Nazionali di Sanità (NIH) | https://imagej.net/Manual_Tracking | |
| Plug-in ImageJ "TrackMate" | ImageJ, NIH | https://imagej.net/TrackMate | Tinevez, JY.; Perry, N. & Schindelin, J. et al. (2016), "TrackMate: una piattaforma aperta ed estensibile per il tracciamento di singole particelle.", Metodi 115: 80-90, PMID 27713081 |
| Volocity (software di imaging 3D ad alte prestazioni) | Perkin Elmer | Volocity 6,3 | Per l'analisi delle immagini |
| IMARIS (software di analisi delle immagini) | Piano bit | IMARIS per Biologi Cellulari | Per l'analisi delle immagini |