Una tecnica per l'innesto di pelle umana in un modello murino

Abstract

Fonte: Moss, M. I. et al., Modello di pelle xenotrapianto per manipolare le risposte immunitarie umane in vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Questo video mostra un metodo per innestare pelle umana su un topo immunodeficiente con una risposta neutrofila soppressa. Il metodo prevede l'applicazione di pelle umana a spessore diviso sul letto di innesto del topo, sigillandolo e coprendolo per il recupero. Alla fine, la pelle umana aderisce alla pelle del topo, stabilendo la vascolarizzazione e la circolazione, con conseguente xenotrapianto cutaneo di successo.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Elaborazione di un campione di pelle umana di donatore

NOTA: Il campione di pelle umana utilizzato in questo trapianto era un grande campione raccolto dall'addome di un paziente sano. Il campione deve essere di almeno 15 cm x 7,5 cm. Le limitazioni dimensionali possono influenzare il numero di topi per i quali è disponibile la pelle e la scelta della dimensione dell'innesto.

1. Mantenere il ca....

Risultati

Figura 1: Cronologia del protocollo adottato per lo studio sugli xenotrapianti.

Figura 2: Metodo per fasciare il topo dopo l'intervento chirurgico. Il topo è avvolto strettamente in una garza di vaselina e in una medicazione in pellicola trasparente me.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
10% formalina tamponata neutra	pescatore	SF100-20	Fissativo per istologia
Adesivo tissutale 3M Vetbond	3M	Codice: 1469SB	Colla chirurgica
Clone anti-GR1 RB6-8C5	BioXcell	BE0075	Anti-rigetto
Buste per autoclave	VWR	89140-800	Per strumenti di autoclavaggio e asciugamani di carta
Buprenex 0,3 mg/mL	Covetrus	Codice: 59122	analgesia
Carprofene 50 mg/mL	Zoetis	NADA # 141-199	analgesia
D42 Lama dermatomo	Humeca	5.D42BL10	Dermatomero (1 lama per campione)
Dermatomero D42	Humeca	4.D42	Dermatomero
Bisturi usa e getta	Bard-Parker	Codice 371610	Preparazione della pelle
Perni a T da dissezione; 1-1/2 pollici, 1000/CS 1.5	Cole-Parmer	UX-10915-03	Per appuntare il campione di pelle per il dermatomero
Forbici da dissezione	Medicon	02.04.10	Preparazione del campione e dissezione murina
DNAsi	Sigma-Aldrich	DN25-1G	Digestione della pelle
Tosatrici elettriche	Kent	CL8787-KIT	depilazione
forcipe	Medicon	07.60.07	Preparazione del campione e dissezione murina
garza	Fisherbrand	Codice 22-362-178	Preparazione del campione
Lampada riscaldante	Morganville Scientifico	HL0100	Assistenza post-chirurgica
Piastre riscaldanti 4" x 10"	Pristech	Codice 20415	Fornitura di calore chirurgico
Siringhe da insulina 1cc 12,7 mm	Bd	Codice 329410	Somministrazione di farmaci
Isoflurano	Farmacopea degli Stati Uniti (USP)	NDC 66794-013-25	anestesia
Macchina per isoflurano	VetEquip	911103	anestesia
Nair per Uomo	Nair	10022600588556	depilazione
Neomicina e Polimixina Bisolfato e Bacitracin Zinco Unguento oftalmico	Dechra	NDC 17478-235-35	Unguento per gli occhi per prevenire la secchezza
annuire. Topi Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG)	Il laboratorio Jackson	Codice: 5557	topi
Asciugamani di carta	fazzoletto di carta	100848	Può essere sterilizzato in autoclave per superfici sterili
Parafilm	Fisher Scientifico	13-374-12	Pellicola sigillante semitrasparente
Piastra di Petri 150 mm	Corning	430597	Conservazione dei campioni
Involucro di plastica	Fisherbrand	Codice 22-305-654	Preparazione del sito
Stick di tampone di providone-iodio	PDI	S41350	Sterilizzazione del sito
Alimentazione morbida e idratazione orale (nettare di Napa)	Se Lab Group Inc	NC9066511	Per integrare i topi in fase di scarso recupero dopo l'intervento chirurgico
Coppe per la raccolta dei campioni	Fisher Scientifico	22-150-266	Conservazione dei campioni
Tampone sterile per la preparazione dell'alcol	Fisherbrand	Codice 22-363-750	Preparazione della pelle
PBS sterile	Gibco	Codice 14190-144	Terreni per la memorizzazione dei campioni
Soluzione salina sterile	Hospira	NDC 0409-4888-02	Per la diluizione del farmaco
Tegaderm Film 4" x 43/4"	3M	Anno 1626	Medicazione per ferite in film trasparente
Garza di vaselina petrolato 3 "x 8"	Kendall	Numero 414600	Medicazione per ferite