Generazione di un modello murino BLT (midollo osseo, fegato, timo) doppiamente umanizzato

Abstract

Fonte: Daharsh, L. et al., Un modello di topi BLT doppiamente umanizzati con un microbioma intestinale stabile simile a quello umano e un sistema immunitario umano.J. Vis. Exp. (2019)

Questo video dimostra il metodo per generare un topo BLT (midollo, fegato e timo) osseo umanizzato doppio con un sistema immunitario umano funzionale e un microbioma intestinale stabile simile a quello umano innestato.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Alloggio e manutenzione dei topi

1. Acquista topi NSG di 6-8 settimane (NOD.Cg-Prkdc^scidIl2rg^tm1Wjl/SzJ).
2. Alloggiare i topi in condizioni SPF con ricambio d'aria, prefiltri e filtri HEPA (High Efficiency Particulate Air) (0,22 μm) in una stanza con temperatura, umidità e pressione controllate.
   1. Alloggiare e mantenere i topi in gabbie di microisolatori individuali autoclavati in un siste....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Aghi per l'alimentazione degli animali 18G	Scienza della cadenza	Codice 9928B
Attivatore Clidox-s	Laboratori di Ricerca Farmaceutica	95120F
Base Clidox-s	Laboratori di Ricerca Farmaceutica	96125F
Cremagliera a gabbia DGM 108	Techniplast
Sacchetto della spesa marrone piatto 3-5 / 8 "D x 6" W x 11-1 / 16 "L	Grainger	Codice 12R063
Preparati per microbiota FMT Upper Delivery	OpenBiome	FMP30
Uva Kool-Aid	Kraft Alimenti Inc.
hCD19-PE/Cy5	Bioleggenda	302209
hCD3-PE	Bioleggenda	300408
hCD4-Alexa 700	Bioleggenda	300526
hCD45-FITC	Bioleggenda	304006
hCD8-APC/Cy7	Bioleggenda	301016
Soluzione di Ringer tamponato con lattato	Boston BioProducts Inc	PY-906-500
mCD45-APC	Bioleggenda	103111
Microvette 100 K3E	Microvette	20.1278.100
Neosporin First Aid Antibiotico/Unguento antidolorifico	Neosporina
I topi NSG (NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ)	Il laboratorio Jackson	Codice: 5557
Ago PrecisionGlide 25 G	Bd	305127
Irradiatore a raggi X RS200	Tecnologie RAD Source
Gabbie per microisolatori Sealsafe Plus GM500	Techniplast
Garza sterile in tessuto non tessuto	Fisherbrand	22-028-558
Teklad global 16% protein irradiato cibo per topo	Teklad	Codice: 2916