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Articolo metodologico

Somministrazione mediata da acufezione di geni immuno-correlati nei tessuti cutanei di topo

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8 luglio 2025

In questo articolo

Abstract

Fonte: Lin, Y., et al., Sviluppo di un sistema di consegna del DNA economico mediante "Acufection" e la sua applicazione alla ricerca sulla pelle. J. Vis. Exp. (2017)

Il video dimostra un metodo per trasferire direttamente il DNA plasmidico codificante l'interleuchina-15 nel tessuto cutaneo di un modello murino carente di interleuchina-15 attraverso l'agopuntura utilizzando microaghi. Questi microaghi generano micropunture nello strato più esterno della pelle, facilitando l'assorbimento e la trasfezione del DNA plasmidico nelle cellule epidermiche, compresi i cheratinociti, all'interno del tessuto cutaneo.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Procedura per l'Acufection

NOTA: La quantità ottimale di DNA e l'area della superficie della pelle bersaglio possono variare per i diversi geni e devono essere ulteriormente ottimizzate. Anche la forza di puntura e il numero di volte in cui allentare lo strato corneo della pelle possono variare a seconda dello spessore della pelle. Queste condizioni devono essere attentamente determinate dopo aver valuta....

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Risultati

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Figura 1. Illustrazione degli aghi per agopuntura. (A) L'ago per agopuntura (36 G x 0,5") è composto da un manico e da un'estremità dell'ago. (B) Dieci aghi per agopuntura sono legati in un fascio utilizzando nastri adesivi. La lunghezza del fascio è di circa 4 cm misurata dal righello (pannello inferiore).

....

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Dichiarazioni

Nessun conflitto di interessi dichiarato.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Ago Accu HandyAccu36Gx0.5Dispositivo medico
Lozione NairTMChiesa e DwightN/AUtilizzare per rimuovere i peli
Sostituto Shandon XylineThermo Fisher Scientifico6764506Deparaffinazione
Avertina (2,2,2-tribrometanolo)Sigma-AldrichT4,840-2anestesia
2-metil-2-butanoloSigma-Aldrich152463Solvente per la dissoluzione dell'avertin
Kit Midi Plasmidico QIAGEN®QIAGENCodice: 12143Purificazione del DNA plasmidico da E. coli
Kit ELISA Ready-SET-Go complesso IL-15/IL-15R per topieBioscienceCodice 88-7215Misurare la proteina IL-15

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