Crescita e differenziazione di neuroni magnetici caricati con nanoparticelle su piattaforme magnetiche

Abstract

Fonte: Indech, G., et al. Fabbricazione di piattaforme magnetiche per l'organizzazione su scala micron di neuroni interconnessi. J. Vis. Exp. (2021).

Questo video dimostra l'assorbimento di nanoparticelle magnetiche fluorescenti (MNP) da parte delle cellule neuronali tramite endocitosi. La crescita di questi neuroni caricati con MNP sul substrato modellato magneticamente consente l'adesione delle cellule. L'aggiunta di un fattore di crescita contenente mezzo aiuta nella crescita delle estensioni dei neuroni, mentre il campo magnetico del substrato dirige l'orientamento dell'estensione.

Protocollo

1. Assorbimento di nanoparticelle magnetiche cellulari (MNP)

1. Preparare il terreno di crescita di base per la coltura cellulare PC12 aggiungendo il 10% di siero di cavallo (HS), il 5% di siero fetale bovino (FBS), l'1% di L-glutammina, l'1% di penicillina/streptomicina e lo 0,2% di amfotericina al terreno del Roswell Park Medical Institute (RPMI) e filtrare utilizzando un filtro di nylon da 0,22 μm.
2. Aggiungere l'1% di siero di cavallo (HS), l'1% di L-glutammina, l'1% di penicillina/streptomicina e lo 0,2% di amfotericina al terreno RPMI per preparare il terreno di differenziazione PC12 e filtrare utilizzando un filtro di nylon da ....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
piastra per coltura cellulare a 6 pozzetti	Falcone	353846
piastra per coltura cellulare a 96 pozzetti	SPL scienze della vita	Codice: 30096
Soluzione di amfotericina B	Industrie Biologiche	03-028-1B
Albumina sierica bovina (BSA)	Industrie Biologiche	03-010-1B
Pallone per colture cellulari e tissutali	Biofil	TCF002250	75,0 cm^2 250 mL Tappo di sfiato, non trattato
Piatto per coltura cellulare	Greiner Bio-One	627-160	35 millimetri
Provetta da centrifuga	Biofil	CFT021500	50 ml
Collagene di tipo I	Corning Inc.	354236	Coda di ratto, intervallo di concentrazione 3-4 mg/mL
Ago monouso	KDL		23 g
Siringa monouso	Medispo	1160227640	10 ml
Siero di cavallo donatore	Industrie Biologiche	04-124-1A
Etanolo 70%	ROMICAL LTD	Codice 19-009102-80
Etanolo assoluto (disidratato)	Biolab-prodotti chimici	Codice: 52505
Siero fetale bovino (FBS)	Industrie Biologiche	04-127-1A
Fresco β-NGF murino	Peprotech	450-34
Elettromagnete GMW con telaio a C .	Buckley systems LTD		3470, 45 mm
L-glutammina	Industrie Biologiche	03-020-1B
PBS 10x	Laboratori	BP507/1LD
Linea cellulare PC12	ATCC	CRL-1721
Soluzione di penicillina-streptomicina nistatina	Industrie Biologiche	03-032-1B
RPMI 1640 con l-glutammina	Industrie Biologiche	01-100-1A