Tecniche di coltura neuronale

Il video mostra un metodo per coltivare neuroni da ippocampi murini. Inizialmente, l'ippocampo subisce una digestione enzimatica per scomporre la matrice tissutale extracellulare. Successivamente, il tessuto digerito viene distrutto meccanicamente per isolare i singoli neuroni. Infine, questi neuroni vengono coltivati su cellule alimentatrici gliali.

Questo video mostra il metodo di coltura di neuroni embrionali crioconservati, che prevede lo scongelamento controllato, la diluizione con un mezzo neurobasale e la semina su una piastra rivestita di poli-L-lisina. La successiva incubazione supporta la crescita e il mantenimento delle connessioni neuronali.

Il video illustra una tecnica per la coltura di neuroni GABAergici e glutammatergici fluorescenti dalla corteccia e dai tessuti ippocampali di cuccioli di topo transgenici. Il processo include l'ottenimento di sospensioni di neuroni purificati su singole cellule, lo smistamento dei neuroni GABAergici in base alla loro espressione proteica di fluorescenza e la loro semina su piastre rivestite di poli-L-lisina per facilitare l'adesione e la proliferazione cellulare.

Il video dimostra una tecnica per la coltura di astrociti primari dalla corteccia del ratto. La corteccia viene dissociata meccanicamente per ottenere una sospensione omogenea di cellule gliali, che viene poi placcata su piastre rivestite di polipeptidi per promuovere la proliferazione selettiva degli astrociti. Successivamente, gli astrociti vengono dissociati enzimaticamente dalle piastre e trasferiti in terreni freschi, consentendo la coltura di astrociti puri.

Il video dimostra una tecnica per isolare la microglia dalla corteccia del cervello di un topo adulto. In primo luogo, la corteccia subisce la segmentazione e l'omogeneizzazione per rimuovere i neuroni e altre cellule gliali, preservando la microglia. Successivamente, la sospensione cellulare viene esposta a microsfere magnetiche anti-mielina e a un campo magnetico, separando efficacemente le microglia e le cellule mieloidi dai detriti di mielina e dalle cellule contenenti mielina.

Il video dimostra un metodo semplice per coltivare astrociti murini isolandoli da altre cellule cerebrali. Durante la coltura, utilizzando terreni specifici per gli astrociti e inibendo l'adesione di cellule non astrocitiche, il metodo coltiva selettivamente gli astrociti. Questi astrociti coltivati mostrano una morfologia stellata con processi fini.

Il video dimostra un metodo per generare neuroni corticali eccitatori da cellule staminali pluripotenti indotte dall'uomo (hiPSC). Dopo l'induzione della doxiciclina, le hiPSC sovraesprimono la neurogenina-2, un fattore di trascrizione neurale-specifico. Utilizzando terreni specifici e co-coltura con gli astrociti, questo processo facilita la differenziazione delle hiPSC in neuroni con connessioni sinaptiche.

Questo video dimostra una tecnica per generare una coltura primaria di neuroni e glia dalla vescica urinaria di un ratto. Delinea le fasi coinvolte nella preparazione dei tessuti, nella digestione enzimatica per ottenere singole cellule e nella coltura delle cellule in un mezzo neurone-specifico per stabilire una coltura neuronale e gliale primaria.

Questo video dimostra l'utilizzo di un chip microfluidico in plastica preassemblato per la coltura compartimentata di neuroni primari dell'ippocampo di ratto. I neuroni vengono inseriti in uno dei compartimenti microfluidici, dove si attaccano e crescono, estendendo i loro assoni attraverso le microscanalature del chip nel compartimento adiacente. Gli stretti microsolchi impediscono l'ingresso dei corpi cellulari neuronali, consentendo così la separazione fisica tra i compartimenti somatico e...

Questo video dimostra la tecnica per isolare e coltivare i neuroni dei granuli cerebellari primari del topo. Le cellule vengono trattate con un antimetabolita per eliminare le cellule gliali proliferanti e produrre una coltura pura di neuroni granulari cerebellari.

Questo video mostra il processo per isolare gli espianti di ganglio spirale dall'orecchio interno e co-coltivarli con l'organo di Corti su un array multielettrodo. I gangli spirale vengono accuratamente estratti e sezionati in sezioni di tessuto più piccole o espianti. Questi espianti vengono coltivati sull'area attiva dell'array multielettrodo per promuovere la crescita del processo neuronale.

Il video dimostra un metodo per coltivare cellule gangliari retiniche primarie da embrioni di pesce zebra. Gli embrioni in fase iniziale vengono sottoposti a dissezione per isolare gli occhi, che vengono successivamente dissociati meccanicamente in una sospensione di cellule gangliari retiniche. Questa sospensione cellulare viene coltivata su vetrini coprioggetti rivestiti con proteine adesive per facilitare lo sviluppo degli assoni.

Questo video dimostra una tecnica per generare cellule neuronali da cellule staminali pluripotenti derivate dal sangue (BD-PSC). Le BD-PSC sono ottenute attraverso la riprogrammazione delle cellule progenitrici del sangue. Le BD-PSC indifferenziate vengono coltivate su vetrini coprioggetti rivestiti di substrato di coltura cellulare utilizzando un mezzo di induzione neurale e un mezzo di differenziazione neurale, innescando la differenziazione in cellule con un fenotipo neuronale.

Questo video mostra un metodo per isolare e coltivare microglia da cervelli di ratto. Comporta la separazione della microglia da altre cellule neuronali e non neuronali utilizzando piastre rivestite con un anticorpo monoclonale specifico per la microglia.

Il video mostra il processo di isolamento e coltura delle cellule staminali neurali dalla zona sottocallosa del cervello del topo. Comporta la dissezione dei tessuti, la dissociazione enzimatica e la loro coltura con fattori di differenziazione per svilupparsi in cellule neurali mature.

Il video dimostra la differenziazione delle cellule staminali embrionali di topo (mESC) in corpi embrioidi (EB) con il metodo della goccia sospesa. Dopo aver sospeso le mESC in gocce sospese e incubate, le cellule si aggregano per formare EB, che vengono ulteriormente differenziate in cellule progenitrici neuronali (NPC) utilizzando un mezzo di differenziazione integrato con acido retinoico (RA).

Questo video mostra un protocollo dettagliato per isolare le pareti del ventricolo laterale dal cervello del topo adulto ed eseguire la dissociazione enzimatica del tessuto per ottenere singole cellule. Queste cellule sono poi sottoposte a specifiche condizioni di coltura che aumentano selettivamente la proliferazione delle cellule staminali neurali e ne promuovono la differenziazione in co-colture di oligodendrociti e astrociti.

Questo video mostra una tecnica per isolare le cellule progenitrici neurali indotte (iNPC) derivate da fibroblasti umani adulti. Delinea le fasi dell'isolamento delle colonie di iNPC e della loro coltura in pozzetti a piastre multipozzetto rivestiti di laminina in presenza di terreni di coltura adeguati che facilitano la continua proliferazione ed espansione della popolazione di iNPC.

Questo video dimostra il metodo per coltivare neuroni a bassissima densità in presenza di uno strato di alimentazione neuronale ad alta densità. Stabilisce una co-coltura di neuroni a densità variabile, garantendo una stretta vicinanza fisica. I fattori di crescita secreti dai neuroni ad alta densità aiutano la sopravvivenza e la crescita neuronale, mantenendo i neuroni a bassissima densità per un periodo di tempo più lungo.

Questo video mostra una tecnica per trasformare le cellule di neuroblastoma SH-SY5Y indifferenziate in neuroni maturi completamente differenziati utilizzando una tecnica di passaggio sistematico. Ciò comporta la coltura delle cellule in una serie di terreni con livelli sierici gradualmente decrescenti per inibire la proliferazione di cellule simili epiteliali, promuovendo al contempo la differenziazione e la proliferazione di cellule simili ai neuroni. Inoltre, il terreno è integrato con acido...

Questo video dimostra l'isolamento delle cellule dai gangli sensoriali dei topi. I gangli sono sottoposti a digestione enzimatica per sciogliere la matrice extracellulare. Le singole cellule vengono quindi raccolte mediante filtraggio attraverso un filtro a celle seguito da una centrifugazione in gradiente di densità per la rimozione dei detriti. Infine, vengono eseguiti il lavaggio e la centrifugazione per raccogliere le cellule isolate per analisi future.

Questo video dimostra la dissociazione e la coltura dei neuroni dell'ippocampo da campioni di tessuto dell'ippocampo utilizzando dissociazioni enzimatiche e meccaniche. Il trattamento con Ara-C inibisce la crescita delle cellule non neuronali, facilitando la crescita selettiva dei neuroni dell'ippocampo.

Questo video delinea un metodo per coltivare neuroni dopaminergici da tessuto cerebrale embrionale di topo. Il processo include il trattamento del mesencefalo con un enzima proteolitico, il distacco delle cellule e la loro coltura su vetrini coprioggetti rivestiti di polimero in un mezzo ricco di sostanze nutritive con antibiotici per la loro crescita e vitalità a lungo termine.

Questo video dimostra l'isolamento e la coltivazione di cellule progenitrici neurali cerebellari dal cervelletto di un cucciolo di topo. I progenitori dei neuroni dei granuli cerebellari vengono isolati e purificati attraverso l'adesione differenziale, rimuovendo efficacemente gli astrociti. Questi progenitori in coltura si differenziano successivamente in neuroni granulari cerebellari.

Questo video dimostra un metodo per isolare neuroni marcati in fluorescenza dal cervello di un topo.

Questo video dimostra la costruzione di un sistema di coltura cellulare a tre compartimenti utilizzando collagene e grasso non reattivo. Questo sistema viene utilizzato per osservare le interazioni tra le cellule di glioma e gli assoni in tempo reale.

Questo video mostra un metodo per isolare i neuroni vestibolari dall'orecchio interno di un cucciolo di topo. Delinea meticolosamente i passaggi necessari per sezionare l'orecchio interno, raccogliere il ganglio vestibolare e successivamente dissociare il ganglio in singole cellule. Queste cellule vengono quindi coltivate su piastre con fondo di vetro per stabilire una coltura di neuroni vestibolari.

Questo video mostra una tecnica per isolare e coltivare cellule precursori degli oligodendrociti (OPC) dalla corteccia cerebrale del cucciolo di topo.

Questo video mostra un metodo per sviluppare una coltura di gangli della radice dorsale o di espianti DRG e modelli cellulari dissociati da DRG utilizzando tessuti DRG di topo isolati. Questi modelli aiutano a studiare vari meccanismi con interazioni neurone-glia in un ambiente controllato.

Il video dimostra la preparazione di fette di cervello collicolo-talamocorticale da cervelli di cuccioli di topo. Un cervello isolato viene allineato su un vetrino marcato e tagliato ad angolo per allineare il mesencefalo uditivo e il proencefalo sullo stesso piano. Il cervello viene quindi tagliato utilizzando un vibratomo e le fette contenenti le principali strutture uditive del mesencefalo e del proencefalo vengono trasferite in una camera di contenimento per la conservazione.

Questo video mostra un metodo per raccogliere neuroni dai gangli della radice dorsale (DRG). Il DRG della colonna vertebrale di un ratto viene isolato, trattato con enzimi e quindi dissociato meccanicamente per ottenere una sospensione unicellulare. I neuroni vengono separati dalle cellule gliali mediante centrifugazione a gradiente di densità e coltivati in un mezzo di crescita.

Questo video presenta un metodo per isolare le cellule staminali/progenitrici neurali dal tessuto periventricolare del midollo spinale nei ratti adulti. La tecnica prevede l'incubazione dei frammenti di tessuto in una soluzione contenente enzimi proteolitici per interrompere la matrice extracellulare e rilasciare le cellule. Successivamente, le cellule rilasciate vengono piastrate in un mezzo contenente specifici fattori di crescita che migliorano la proliferazione staminale/progenitrice...

Questo video mostra un protocollo per ottenere una sospensione unicellulare altamente vitale dall'ippocampo cerebrale del topo utilizzando una combinazione di dissociazione meccanica automatizzata e una miscela di enzimi per aiutare la digestione enzimatica.

Il video dimostra la preparazione di una sospensione unicellulare di cellule immunitarie da un tessuto cerebrale murino. Prevede la digestione enzimatica per rilasciare le cellule dal tessuto cerebrale, seguita dalla centrifugazione in gradiente di densità per isolare le cellule immunitarie in base alla loro densità per ottenere la sospensione di una singola cellula.

Questo video mostra un metodo per isolare le cellule primarie degli oligodendrociti da una sospensione di cellule neurali ottenuta da un cucciolo di topo utilizzando la separazione magnetica. La tecnica impiega biglie magnetiche rivestite con anticorpi specifici per gli antigeni degli oligodendrociti, consentendo l'isolamento selettivo di queste cellule.

Questo video descrive l'isolamento e la coltura delle cellule di Schwann dalle radici spinali dei topi. Le cellule isolate vengono quindi coltivate in terreni specifici. Le cellule di Schwann vengono isolate tramite digestione differenziale e aderenza. Successivamente vengono trasferiti su vetrini coprioggetti rivestiti di matrice extracellulare per l'attaccamento e la proliferazione.

Questo video mostra un protocollo dettagliato per la preparazione di fette orizzontali di cervello ippocampale dai topi, concentrandosi sulla conservazione dell'integrità dei percorsi delle fibre ippocampali. Il processo prevede l'attenta bisezione e fissaggio del cervello, l'utilizzo di un vibratomo per affettare e il mantenimento delle condizioni tissutali ottimali con un fluido carbogenato, ottenendo fette di cervello ippocampale pronte per ulteriori sperimentazioni.

Il video mostra la generazione di fette di amigdala inclinate dal cervello di un topo. Il cervello è posizionato ad angolo sullo stadio del campione di vibratomo per ottenere fette contenenti l'amigdala e gli assoni dalla corteccia prefrontale mediale che formano connessioni sinaptiche con l'amigdala. Le fette di cervello vengono mantenute alla temperatura fisiologica per preservare il tessuto per ulteriori esperimenti.

Questo video dimostra la preparazione di sottili fette di cervello coronale da un cervello murino, esponendo le regioni dell'amigdala ricche di connessioni sinaptiche dalla corteccia prefrontale mediale. Le fette vengono quindi recuperate nel liquido cerebrospinale artificiale ossigenato per mantenere la vitalità neuronale.

Questo video mostra un protocollo per estrarre cellule microgliali da lesioni demielinizzanti nel cervello di topo utilizzando la selezione magnetica delle cellule. Il protocollo prevede la sezionazione del tessuto cerebrale lesionato contenente cellule microgliali, il trattamento del tessuto con enzimi specifici per ottenere una sospensione di una singola cellula e l'utilizzo di microsfere magnetiche specifiche del recettore microgliale per isolare le cellule microgliali.

Questo video dimostra l'isolamento di più tipi di cellule dal tessuto cerebrale del topo. Il tessuto viene prima tranciato meccanicamente utilizzando un trituratore di tessuti in una soluzione salina per mantenere un equilibrio osmotico. L'omogeneizzato tissutale viene quindi sottoposto a centrifugazione in gradiente di densità per rimuovere i detriti cellulari. Le cellule vengono quindi risospese in una soluzione per ulteriori analisi.

Questo video mostra la procedura di isolamento delle cellule immunitarie dai plessi coroidi di topo. Questa procedura viene utilizzata nella ricerca neuroimmunologica per capire come le cellule immunitarie nei plessi coroidei influiscono sulla salute del cervello e su varie malattie neurologiche.

Il video ha dimostrato il metodo di isolamento e coltura delle cellule dal cervello di un topo neonatale. Ha comportato la dissociazione enzimatica e meccanica del cervello, seguita dalla coltura in terreni di crescita privi di fattore di crescita neuronale per ottenere una popolazione gliale mista.

Questo video mostra la procedura per isolare e smistare i nuclei da tessuto cerebrale umano appena congelato utilizzando la selezione dei nuclei attivati dalla fluorescenza (FANS), che consente lo studio di diverse popolazioni cellulari per varie applicazioni neurologiche.

Questo video mostra un protocollo per isolare cellule da ippocampi di ratto, inclusi neuroni, astrociti e microglia.

Questo video dimostra l'isolamento di neuroni marcati in fluorescenza da Caenorhabditis elegans. Una sospensione cellulare è ottenuta da vermi transgenici ingegnerizzati per esprimere trasportatori transmembrana vescicolari fusi con proteine fluorescenti nei neuroni colinergici. I neuroni marcati in fluorescenza vengono quindi isolati utilizzando la selezione cellulare attivata dalla fluorescenza (FACS) e mantenuti in coltura.

Il video mostra la preparazione delle fette del cervelletto. Mostra una procedura dettagliata per isolare il cervelletto da un embrione di pollo. Le fette vengono quindi preparate dal cervelletto sezionato utilizzando un tritatessuti per ulteriori analisi sperimentali.

Questo video mostra la procedura per isolare le cellule gangliari retiniche primarie murine (RGC) utilizzando la citometria a flusso. Questo metodo consente lo studio futuro delle RGC, con l'obiettivo di comprendere meglio il principale declino dell'acuità visiva che deriva dalla perdita di RGC funzionali nelle malattie neurodegenerative.

Questo video descrive l'isolamento di un organo vomeronasale di topo (VNO) e la preparazione del tessuto per il sezionamento del vibratomo. Le sezioni vengono utilizzate per caratterizzare gli attributi biofisici e fisiologici di uno specifico gruppo di neuroni sensoriali.

Questo video dimostra un protocollo per isolare e coltivare cellule primarie della corteccia cerebrale dal telencefalo dorsolaterale di embrioni di topo.

Questo video mostra una tecnica per isolare e coltivare le cellule dei gangli della radice dorsale (DRG) dalla colonna vertebrale del ratto. I DRG asportati dalla colonna vertebrale vengono trattati con enzimi e dissociati meccanicamente per ottenere una sospensione unicellulare. Le cellule vengono coltivate in un terreno contenente inibitori e fattori di crescita che limitano la proliferazione delle cellule gliali e promuovono la crescita neuronale, rispettivamente.

Il video dimostra il processo di isolamento e coltura dei neuroni dopaminergici dal mesencefalo di embrioni di topo. I pavimenti ventrali isolati del mesencefalo vengono dissociati utilizzando enzimi. I neuroni dopaminergici risultanti vengono raccolti e trasferiti in micro-isole all'interno di piastre multi-pozzetto. Le cellule vengono incubate con un mezzo neuronale dopaminergico per mantenere le cellule ad alta densità all'interno delle micro-isole.

Questo video dimostra un metodo per differenziare le cellule progenitrici neurali umane (NPC) in neuroni. Le NPC vengono introdotte in una co-coltura di neuroni corticali di topo e ratto, promuovendo la differenziazione delle NPC nei neuroni. La differenziazione è confermata dalla visualizzazione delle cellule al microscopio confocale.

Questo video mostra una tecnica per la co-coltura di neuroni glutammatergici e cellule di glioma pediatrico di alto grado (pHGG) all'interno di un dispositivo microfluidico. Le cellule staminali pluripotenti indotte umane vengono introdotte nel sistema microfluidico e incubate per promuovere la loro differenziazione in neuroni glutammatergici corticali maturi. Successivamente, le cellule pHGG vengono introdotte sui neuroni maturi, stabilendo una co-coltura e consentendo interazioni tra neuroni...

Questo video illustra un metodo per stabilire una co-coltura indiretta neurone-astrocita utilizzando un approccio compartimentato. In questa configurazione, i neuroni e gli astrociti sono spazialmente separati ma condividono un mezzo condizionato. I fattori neurotrofici rilasciati dagli astrociti promuovono la differenziazione dei neuroni e la formazione di connessioni sinaptiche, suggerendo interazioni neurone-glia.

Questo video mostra la co-coltura di neuroni gangliari e macrofagi murini della radice dorsale. I neuroni vengono seminati su una piastra rivestita, mentre i macrofagi vengono raccolti da un topo soppresso, trattati e aggiunti all'inserto di coltura. Il trattamento con db-cAMP attiva i neuroni e spinge i macrofagi ad adottare un fenotipo pro-rigenerativo per supportare la crescita neuronale.

Questo video mostra un test per promuovere la crescita delle proiezioni neuronali note come crescita neurite utilizzando il mezzo condizionato dai macrofagi. Co-coltura di neuroni e macrofagi con cAMP e raccolta del terreno condizionato derivato dai macrofagi. La crescita dei neuroni con il mezzo condizionato favorisce l'escrescenza di neuriti. Queste escrescenze vengono marcate in fluorescenza e visualizzate utilizzando un microscopio a fluorescenza.

Questo video dimostra il processo di preparazione dei tessuti ventrali dell'ippocampo e del nucleo accumbens da cervelli di topo per la co-coltura. I neuroni estendono le proiezioni per formare connessioni sinaptiche tra i tessuti ventrali, ippocampali e nucleus accumbens. Questo metodo consente di studiare le interazioni neuronali tra queste due regioni del cervello, offrendo approfondimenti sulla cognizione, sul comportamento e sui disturbi neurologici.

Questo video mostra una tecnica per stabilire una co-coltura di neuroni trigemino e cellule primarie della polpa dentale utilizzando un filtro transwell. In questa condizione fisicamente separata, le cellule mesenchimali ottenute dal tessuto pulpare dentale secernono molecole di segnalazione paracrina che attraversano i pori, promuovendo la differenziazione e la migrazione dei neuroni verso le cellule mesenchimali stabilendo un sistema di co-coltura.

Questo video dimostra una tecnica per stabilire una co-coltura di interneuroni con cellule endoteliali perivascolari. Le cellule vengono aggiunte a un inserto a un pozzetto posto all'interno di una piastra di coltura. Dopo che le cellule aderiscono al piatto, l'inserto viene rimosso, consentendo alle cellule di proliferare e interagire e formare una co-coltura.

Questo video dimostra lo sviluppo di un sistema di co-cultura 3D. Fette di cervello di topo vengono posizionate su una membrana e le cellule tumorali cerebrali umane marcate in fluorescenza possono crescere su di essa. Una volta che il sistema è pronto, viene colorato per l'imaging.

Il video dimostra la rigenerazione funzionale delle connessioni propriospinali utilizzando un test basato su array multi-elettrodo (MEA). Le fette del midollo spinale vengono posizionate sul MEA e possono fondersi. Le fette fuse vengono separate meccanicamente creando una lesione, inducendo i neuroni propriospinali a crescere sopra la lesione e collegare le fette. L'attività elettrica delle fette viene valutata per identificare la rigenerazione delle connessioni funzionali.

Il video dimostra l'isolamento di cellule mononucleate del sangue periferico infiltranti il tumore dal cervello di un topo utilizzando la dissociazione meccanica e la digestione enzimatica. Segue la centrifugazione in gradiente di densità per raccogliere le cellule immunitarie per ulteriori analisi.

Questo video dimostra una tecnica per la rimozione selettiva della microglia da una coltura neuronale primaria di ratto. I neuroni dei granuli cerebellari vengono trattati con un antimetabolita per eliminare le cellule gliali proliferanti. Inoltre, vengono trattati con agenti mirati ai lisosomi per esaurire la microglia dalla coltura.

Questo video mostra una procedura per co-coltivare gli astrociti e i neuroni per formare sfere 3D. Queste sfere 3D forniscono una piattaforma distinta per esaminare la formazione delle sinapsi e l'integrazione delle reti neurali, fungendo così da potenziale modello per la ricerca nelle neuroscienze dello sviluppo, nelle malattie neurodegenerative e negli interventi neurofarmacologici.

Questo video mostra una procedura per isolare i neuroni del ganglio della radice dorsale (DRG) da embrioni di ratto e co-coltivarli con i precursori delle cellule di Schwann per generare cellule di Schwann mature. I DRG isolati vengono elaborati per isolare i neuroni e le cellule gliali. Le cellule isolate vengono coltivate per purificare i neuroni, che vengono poi co-coltivati con cellule simili a cellule di Schwann (SCLC) in un terreno di co-coltura. L'interazione con i neuroni DRG porta alla...

Questo video dimostra la co-coltura di cellule cerebrali umane di periciti, astrociti ed endoteli. Ogni strato cellulare viene formato separatamente e poi coltivato insieme, creando un sistema a tre strati che imita la disposizione cellulare della barriera...

Questo video dimostra la creazione di una co-coltura di neuroni indotti umani (iNs) e cellule precursori di oligodendrociti indotti (iOPC). Gli iN vengono mescolati con iOPC in una co-coltura e poi incubati per supportare la maturazione di entrambi gli iN in neuroni e degli iOPC in oligodendrociti. I neuroni formano connessioni sinaptiche con altri neuroni e oligodendrociti, mentre gli oligodendrociti sviluppano guaine mieliniche attorno agli assoni dei neuroni.

Questo video dimostra l'utilizzo di un dispositivo microfluidico per studiare le interazioni tra la polpa germinale dei denti e i gangli del trigemino. Mostra il posizionamento dei tessuti all'interno del dispositivo microfluidico e fornisce una visualizzazione dettagliata della crescita dei neuriti trigeminali verso il germe del dente attraverso le microscanalature del dispositivo. Inoltre, evidenzia il ruolo dei fattori molecolari derivati dai denti nel promuovere o inibire l'estensione dei...

Questo video mostra la procedura per isolare i neuroni gangliari retinici (RGN) dalla retina di un ratto e cocoltivarli con cellule gliali che inguainano l'olfatto. Questo metodo consente di studiare il potenziale neuro-rigenerativo degli OEG dopo una lesione neurale.

Questo video dimostra il metodo per differenziare le cellule staminali neurali umane dalle neurosfere in progenitori neurali e astrocitari utilizzando il trattamento enzimatico e la coltura in un mezzo ricco di fattori di crescita, che alla fine porta alla maturazione in cellule progenitrici specializzate.

Questo video illustra la creazione di organoidi di tipo proencefalico a partire da cellule staminali pluripotenti indotte umane (iPSC), dimostrando la progressione dagli aggregati di cellule staminali a strutture complesse che imitano la corteccia cerebrale e si differenziano in vari tipi di neuroni.

Il video dimostra la co-coltura dei neuroni del ganglio della radice dorsale (DRG) con le cellule di Schwann. I neuroni DRG vengono prima cresciuti su una membrana pre-stirata per la crescita degli assoni allineati. Vengono quindi introdotte le cellule di Schwann, che si attaccano agli assoni, isolandoli e promuovendo la sopravvivenza e la funzione delle cellule neurali.

Questo video dimostra un protocollo per arricchire le colture neuronali dai gangli delle radici dorsali mediante immunopanning, migliorando così la loro purezza e utilità per la ricerca neurologica.

Questo video dimostra un protocollo per identificare i fattori esogeni che avviano la riattivazione delle cellule staminali neurali cerebrali di Drosophila dal loro stato quiescente. Le larve appena nate vengono sezionate per isolare il loro cervello, che viene poi coltivato in terreni con o senza un ormone di prova per valutare il potenziale dell'ormone di indurre la riattivazione e la proliferazione delle cellule staminali neurali.

Questo video dimostra un protocollo per la co-coltura di cellule endoteliali cerebrali di topo e cellule staminali corticali primarie e per l'etichettatura delle glicoproteine della superficie cellulare utilizzando Ac4ManNAz (azidosugar per-O-acetilato N-azidoacetilmannosamina). Questo metodo consente l'arricchimento selettivo e l'identificazione delle proteine della superficie cellulare nelle cellule primarie.

Questo video mostra il modello di cocoltura di un espiante di ganglio della radice dorsale e cellule di Schwann. In condizioni di cocoltura, l'acido ascorbico promuove la differenziazione delle cellule di Schwann in forme mielinizzanti. Le cellule mielinizzanti di Schwann avvolgono gli assoni più volte per creare una guaina mielinica, essenziale per la funzione nervosa.

Questo video descrive l'isolamento dei neuroni DRG attraverso la digestione enzimatica, la dissociazione meccanica e la centrifugazione a gradiente. Le cellule DRG sono co-coltivate con cellule natural killer su una matrice extracellulare per studiare l'interazione tra cellule immunitarie e neuroni sensoriali.

Questo video mostra una tecnica per valutare l'attività dell'acido retinoico negli embrioni di topo. Dopo aver isolato le cellule dagli embrioni di topo, le cellule vengono co-coltivate con cellule reporter di acido retinoico (RA). Le cellule embrionali producono RA, che induce l'espressione della beta-galattosidasi nelle cellule reporter, indicando l'attività dell'AR nelle cellule embrionali.

Questo video dimostra una tecnica per generare un sistema modello di co-coltura tridimensionale di fibroblasti corneali umani primari e cellule neuronali differenziate. Questo sistema di co-coltura può essere utilizzato per studiare le interazioni stromale-nervo.

Il video dimostra un protocollo che utilizza terreni privi di siero per generare progenitori neurali da cellule staminali embrionali di topo. La concentrazione desiderata di cellule staminali embrionali, sospese in terreni privi di siero, viene placcata su vetrini coprioggetti rivestiti di gelatina. A una densità cellulare ottimale, le cellule producono fattori di segnalazione autocrini che, insieme ai fattori che inducono la differenziazione neurale nei terreni privi di siero, innescano la...

Questo video mostra lo sviluppo e la differenziazione delle cellule staminali neurali umane all'interno di un'impalcatura tridimensionale. Un rivestimento di laminina sull'impalcatura favorisce l'adesione cellulare, mentre un mezzo neurale privo di fattore di crescita induce la differenziazione cellulare in cellule progenitrici neurali, che estendono i loro processi all'interno di un'architettura porosa in più direzioni, formando una coltura...

Questo video mostra un metodo in vitro per generare neuroni simpatici postgangliari da cellule staminali pluripotenti umane (hPSC). Le hPSC sono differenziate in cellule della cresta neurale (NCC) su un supporto della matrice della membrana basale utilizzando un mezzo di differenziazione. Gli NCC vengono quindi dissociati e formati in sferoidi utilizzando un altro mezzo di differenziazione. Infine, gli sferoidi vengono trasformati in neuroni simpatici postgangliari utilizzando un mezzo...

Questo video dimostra la generazione e la differenziazione delle neurosfere primarie. Le cellule staminali neurali del pesce zebra, in presenza di fattori di crescita, proliferano in neurosfere fluttuanti con capacità di auto-rinnovamento, che successivamente si differenziano in cellule gliali e neuroni.

Il video dimostra un metodo per generare organoidi cerebrali umani da cellule staminali pluripotenti indotte. Mostra come la neurosfera formi uno strato neuroectodermico, che sopprime la formazione di altri strati germinali. Le neurosfere sono incorporate in una matrice di gel 3D e formano gemme neuroepiteliali. Quando vengono incubate con terreni organoidali, queste gemme neuroepiteliali si differenziano in specifiche regioni cerebrali, con conseguente formazione di organoidi cerebrali maturi.

Questo video dimostra l'uso di un chip microfluidico rivestito di matrice extracellulare per differenziare le cellule staminali neurali e progenitrici o NPC attraverso la stimolazione elettrica. Dopo la semina e l'adesione alla regione rivestita, le NPC crescono e l'applicazione di una corrente continua innesca la loro differenziazione in neuroni, astrociti e oligodendrociti.

Questo video mostra un test per generare organoidi cerebrali da cellule staminali pluripotenti indotte (iPSC). Le iPSC umane sono indotte a formare corpi embrioidi (EB). Gli EB vengono coltivati su un'impalcatura polimerica utilizzando un mezzo di induzione, promuovendo la differenziazione in cellule staminali neurali, cellule progenitrici e neuroni immaturi. Infine, gli EB vengono incorporati in una matrice e trasferiti in un mezzo di mantenimento per la formazione di organoidi cerebrali.

Il video mostra la formazione di giunzioni neuromuscolari utilizzando un dispositivo microfluidico. Le cellule precursori neurali e le cellule progenitrici muscolari vengono seminate in diversi pozzetti all'interno del dispositivo e lasciate maturare rispettivamente in motoneuroni e miotubi. La creazione di un gradiente volumetrico e chimico porta allo sviluppo di giunzioni neuromuscolari attive.

Questo video dimostra lo sviluppo di una coltura neuronale 3D accoppiata a un array di microelettrodi planari con neuroni ippocampali. I neuroni isolati formano una rete 2D sull'area attiva dell'array di microelettrodi e aderiscono alle microsfere di vetro in una piastra multipozzetto con un inserto a membrana. Dopo aver trasferito queste microsfere rivestite di neuroni all'elettrodo, si organizzano in una rete neurale 3D interconnessa.

Questo video mostra il processo di generazione di sfere neuronali utilizzando una tecnica di coltura a goccia sospesa. All'interno delle gocce sospese, le cellule si muovono verso il basso, autoassemblate in strutture tridimensionali che formano sfere di neuroni, che possono essere utilizzate per studi neurobiologici.

Questo video dimostra un metodo per tracciare il trasporto assonale nei motoneuroni utilizzando un sistema di camere microfluidiche. Consiste nel coltivare tessuti embrionali del midollo spinale di topo in pozzetti rivestiti di polimero con mezzo nutritivo per indurre la crescita assonale. Il movimento degli organelli colorati con colorante fluorescente nell'imaging dal vivo, conferma il trasporto assonale bidirezionale.

Questo video mostra la riprogrammazione diretta degli astrociti che esprimono fattori di trasformazione in neuroni. I fattori di trasformazione innescano una cascata di eventi molecolari che facilitano la conversione da astrociti a neuroni. Il processo è ulteriormente supportato dalla fornitura di agenti specifici e integratori attraverso un mezzo di differenziazione neuronale.

Questo video mostra il processo di preparazione di fette di cervello a forma di cuneo in un ambiente di laboratorio. Utilizzando un vibratomo, viene realizzata una fetta a forma di cuneo del cervello di un topo con spessore variabile. Questa fetta contiene la radice nervosa uditiva posizionata all'estremità più spessa, mentre i neuroni relativi all'udito si trovano all'estremità più sottile.

Questo video dimostra una tecnica per promuovere la differenziazione neuronale esponendo le cellule nervose a nanobarre d'oro e luce laser, che forma proiezioni cellulari supportate dalla βIII-tubulina. La colorazione e l'osservazione della tubulina e del nucleo cellulare con la microscopia a epifluorescenza rivela le escrescenze cellulari, indicando l'efficacia dei nanorod nella differenziazione neuronale.

Questo video dimostra l'assorbimento di nanoparticelle magnetiche fluorescenti (MNP) da parte delle cellule neuronali tramite endocitosi. La crescita di questi neuroni caricati con MNP sul substrato modellato magneticamente consente l'adesione delle cellule. L'aggiunta di un fattore di crescita contenente mezzo aiuta nella crescita delle estensioni dei neuroni, mentre il campo magnetico del substrato dirige l'orientamento dell'estensione.

Questo video dimostra la differenziazione delle cellule staminali embrionali umane, o hESC, direttamente in cellule progenitrici neurali senza l'utilizzo di cellule feeder o passaggi intermedi. L'inibizione selettiva della proteina morfogenetica ossea o BMP e le vie di segnalazione del fattore di crescita trasformante-beta, o TGF-β, portano alla differenziazione delle hESC in cellule progenitrici neurali, o NPC.

Questo video dimostra una tecnica per preparare colture di fette fluttuanti dal cervello umano adulto. Fette sottili vengono generate da una sezione del cervello utilizzando un vibratomo. Queste fette vengono quindi sospese in un terreno di coltura integrato con fattori di crescita per mantenere la vitalità dei tessuti.

Questo video mostra un metodo per preparare colture organotipiche di fette di ippocampo dal cervello di un cucciolo di ratto. Delinea le fasi coinvolte nella dissezione dell'ippocampo, nel taglio e nelle condizioni di coltura necessarie per promuovere la vitalità cellulare e la crescita nelle fette dell'ippocampo, generando infine colture di fette organotipiche.

Questo video descrive un protocollo per ottenere fette di cervello utilizzando un metodo di recupero protettivo basato su N-metil-D-glucamina (NMDG). Un cervello sezionato viene incubato in un aCSF con NMDG e HEPES per ridurre al minimo la morte e il danno delle cellule neuronali durante il sezionamento. La sezione può essere recuperata nell'aCSF per ripristinare le attività...

Questo video dimostra un metodo per l'incubazione prolungata del tessuto neuronale della retina. Le conchiglie oculari contenenti retina sono ottenute da un occhio di topo; la membrana limitante interna (ILM) viene digerita enzimaticamente per esporre le cellule neuronali della retina e l'oculare trattato o la retina isolata vengono trasferiti in un incubatore specializzato per un'incubazione prolungata a bassa temperatura.

Questo video mostra una tecnica per generare organoidi cerebellari maturi da cellule staminali pluripotenti indotte (iPSC) utilizzando un bioreattore 3D monouso. Il bioreattore facilita la formazione di aggregati iPSC, che vengono poi sottoposti a trattamento con una serie di terreni di coltura arricchiti in fattori di crescita e chemochine che inducono la differenziazione degli aggregati iPSC in organoidi cerebellari maturi. Successivamente, gli organoidi vengono raccolti e crioconservati per...

Questo video dimostra una tecnica per stabilire una coltura tridimensionale di cellule gliali. Le cellule gliali derivate dal cervello di ratto sono incapsulate all'interno di una matrice polimerica fotocrosslinkabile contenente componenti della matrice extracellulare. Dopo l'incubazione in un mezzo di crescita, le cellule gliali proliferano all'interno della matrice di supporto per creare una coltura tridimensionale.

Il video dimostra un metodo per generare astrosfere da progenitori da cellule staminali pluripotenti umane. Coinvolge la crescita e la proliferazione di cellule staminali con mezzi nutritivi contenenti fattori di crescita e inibitori delle chinasi. Queste cellule poi si aggregano e si differenziano in astrociti, formando astrosfere.

Questo video dimostra la generazione di cellule progenitrici neurali da cellule staminali pluripotenti umane (hPSC) non transgeniche e transgeniche. Le hPSC sono differenziate in cellule progenitrici neurali utilizzando un mezzo di differenziazione neuronale. Mentre la differenziazione è indotta nelle cellule non transgeniche utilizzando piccole molecole, le hPSC transgeniche vengono differenziate aggiungendo un antibiotico che induce il promotore di un fattore di trascrizione specifico per la...

Questo video mostra un metodo per ottenere cellule simili a cellule di Schwann da cellule stromali multipotenti del midollo osseo (BMSC). Inizialmente, le BMSC vengono sottoposte a trattamento di ipossia, seguito da una differenziazione diretta in cellule progenitrici neuronali. Successivamente, vengono impiegati terreni e condizioni di coltura specifici per indurre la trasformazione di queste cellule progenitrici in cellule simili alle cellule di Schwann.

Questo video mostra un metodo per generare scaffold di astrociti tridimensionali all'interno di micro-colonne di idrogel. L'interno delle microcolonne è rivestito di collagene. Vengono introdotti gli astrociti, che aderiscono al collagene e, con un'ulteriore incubazione, si autoassemblano in un'impalcatura tridimensionale.

Questo video mostra la creazione di un modello di tessuto neurale polarizzato in 3D utilizzando scaffold di seta-collagene. Descrive in dettaglio il processo di semina delle cellule neuronali su scaffold di seta porosa, l'incubazione per l'attaccamento cellulare, l'incorporazione dell'impalcatura con il collagene e sottolinea l'importanza della matrice di collagene di supporto nella formazione di un modello di tessuto neurale polarizzato 3D.

Il video mostra un metodo per staccare e reimpiantare neuroni derivati da cellule staminali pluripotenti umane utilizzando un enzima proteolitico delicato. Dopo la filtrazione e la centrifugazione, i neuroni vengono riposizionati su una piastra multipozzetto rivestita per l'incubazione, favorendo l'adesione e la maturazione.

Questo video dimostra il metodo di creazione di organoidi nervosi motori coltivando prima cellule staminali pluripotenti indotte umane in un mezzo speciale per formare sferoidi, poi differenziandole in motoneuroni utilizzando inibitori specifici e infine coltivandole in un chip microfluidico per estendere gli assoni e formare organoidi nervosi motori.

Questo video presenta un metodo per innescare la differenziazione nelle cellule staminali neurali utilizzando il plasma atmosferico freddo. Questo genera radiazioni UV e molecole reattive per stimolare le cellule nervose a produrre proiezioni, indicando la differenziazione delle cellule neuronali.

Questo video presenta un metodo per generare precursori di interneuroni corticali da cellule staminali embrionali di topo. Il protocollo prevede la coltura delle cellule staminali in terreni contenenti specifici inibitori di piccole molecole, che facilitano la proliferazione e l'aggregazione delle cellule staminali in corpi embrioidi (EB). Successivamente, gli EB vengono dissociati con enzimi e piastrati su pozzetti su piastre di coltura rivestite con proteine di adesione per promuovere la loro...

Questo video dimostra la riprogrammazione diretta di cellule progenitrici ematopoietiche geneticamente modificate in cellule staminali neuronali. I fattori di trascrizione espressi dalle cellule progenitrici ematopoietiche innescano una cascata di eventi molecolari che facilitano la loro trasformazione. Ulteriori terreni specifici vengono utilizzati per selezionare e far crescere le cellule staminali neuronali indotte.

Questo video dimostra l'uso di piccoli RNA interferenti (siRNA) per silenziare specifici geni di interesse nelle cellule staminali neurali e differenziarli nei tipi di cellule desiderati utilizzando un mezzo di differenziazione appropriato. Questa procedura consente lo studio del ruolo critico di specifici geni nel processo di differenziazione delle cellule staminali neurali.

Questo video mostra il processo di differenziazione delle cellule progenitrici neurali indotte (iNPC) in neuroni e astrociti utilizzando mezzi specializzati.

Questo video dimostra un metodo per la generazione in vitro di cellule progenitrici neurali (NPC) da cellule staminali embrionali di topo (mESC). Le mESC vengono coltivate in sospensione per formare corpi embrioidi (EB), che vengono poi guidati a differenziarsi in NPC tramite trattamento con acido retinoico in una coltura aderente.

Il video ha mostrato un metodo di coltura cellulare per differenziare le cellule progenitrici neurali in neuroni. Incubando le cellule in un terreno ricco di sostanze nutritive integrato con fattori di crescita, le cellule progenitrici sono maturate in neuroni con assoni e dendriti sviluppati. Un agente stabilizzante ha assicurato la vitalità cellulare e protetto dal danno ossidativo durante tutto il processo di differenziazione.

Questo video mostra un metodo modificato del tubo di rotella per la coltura a lungo termine di fette di cervello da un modello di roditore. In primo luogo, le fette di cervello vengono attaccate ai vetrini. Quindi, vengono prelevati i tubi a rullo a lato piatto con un foro sul lato piatto e i vetrini coprioggetti vengono posizionati sul foro utilizzando dischi adesivi. Infine, un mezzo nutritivo e una miscela di anidride carbonica e aria vengono aggiunti alla provetta e le provette vengono...

Questo video dimostra una tecnica per l'avvio e l'estensione rapida di un neurone e la creazione di nuove connessioni con un neurone bersaglio utilizzando un dispositivo microfluidico e la micromanipolazione. Questo potrebbe essere utilizzato per terapie che mirano a ricollegare i circuiti neuronali dopo traumi o nelle malattie neurodegenerative.

Il video dimostra la generazione di neuroni da fibroblasti dermici umani adulti (aHDF). Gli aHDF vengono riprogrammati utilizzando un vettore lentivirale che trasporta geni per fattori di trascrizione neuronale e RNA a forcina corta (shRNA). Gli shRNA inibiscono l'espressione di un repressore trascrizionale neuronale e i fattori di trascrizione neuronale attivano i geni per differenziare gli aHDF in neuroni. Questi aHDF riprogrammati vengono coltivati in un mezzo di conversione neuronale...

Il video dimostra la generazione e il mantenimento di colture organotipiche di fette da tessuto di glioblastoma. Il tessuto isolato è incorporato in una matrice di agarosio e sezioni sottili sono ottenute utilizzando un vibratomo. Queste sezioni vengono quindi posizionate su inserti di membrana permeabili all'interno di una micropiastra e coltivate in un terreno di mantenimento della coltura a fette per un mantenimento a lungo termine.

Questo video dimostra un protocollo per isolare e coltivare cellule di Schwann da tessuti dermici umani. Il derma umano contiene vari tipi di cellule, tra cui fibroblasti e cellule di Schwann. Dopo l'isolamento, le cellule vengono trattate con un agente antimitotico per eliminare i fibroblasti proliferanti, ottenendo una coltura pura di cellule di Schwann.

Il video mostra il processo di creazione di un costrutto biostampato in 3D utilizzando astrociti sospesi in una soluzione bioink. Il costrutto biostampato, dopo la reticolazione, facilita l'adesione degli astrociti e la loro diffusione, formando un tessuto simile a quello neurale.

Questo video dimostra come le gliomasfere, derivate da tumori cerebrali, vengono separate in singole cellule e incapsulate in un idrogel a base di acido ialuronico. Questo processo promuove le interazioni cellula-cellula, formando un modello di glioblastoma strutturato e tridimensionale.

Questo video illustra una tecnica per ottenere fette organotipiche cerebellari dal cervello di un cucciolo di topo e coltivare le fette in terreni integrati con nutrienti e fattori di crescita per imitare lo sviluppo cerebellare in vitro. Inoltre, specifiche fette cerebellari vengono trattate con un composto di prova e la capacità neuroprotettiva del composto viene analizzata utilizzando una tecnica di colorazione in immunofluorescenza.

Questo video descrive la preparazione e la coltivazione di organoidi tumorali cerebrali da sospensioni unicellulari. Utilizzando una matrice extracellulare ricca di laminina come impalcatura e terreno di coltura per i nutrienti, le cellule sono facilitate a moltiplicarsi e auto-organizzarsi all'interno dell'organoide. Di conseguenza, vengono generati organoidi ex vivo, che imitano la diversità cellulare e il microambiente dei tumori cerebrali.

Questo video dimostra il processo di generazione di cellule precursori degli oligodendrociti (OPC) da cellule staminali embrionali umane, seguito dalla maturazione delle OPC in oligodendrociti. Questo processo di generazione di oligodendrociti apre numerose strade per migliorare la ricerca e il trattamento delle malattie neurodegenerative, tra cui l'Alzheimer.

Questo video dimostra un protocollo per differenziare le cellule staminali pluripotenti indotte umane in progenitori cerebellari. Comporta il trasferimento di colonie di cellule staminali su una piastra di attacco ultra-bassa per formare corpi embrioidi, promuovendo la differenziazione con i fattori di crescita e quindi trasferendo i corpi embrioidi su una piastra rivestita di matrice per l'adesione. Le fasi successive prevedono l'induzione della migrazione cellulare e l'aggiunta di un mezzo di...

Questo video dimostra il processo di differenziazione dei corpi embrioidi (EB) in aggregati neuroepiteliali e la loro successiva divisione in cellule neuronali e gliali. Questo metodo consente la generazione efficiente di cellule neuronali e gliali in vitro, che fungono da sistemi di test per i test di tossicità e per la valutazione delle diverse vie coinvolte nella neurotossicità.

Questo video dimostra il processo di isolamento e coltura delle cellule progenitrici gliali dal glioma pontino intrinseco diffuso o dal tessuto del tronco encefalico affetto da DIPG. Le cellule gliali isolate dal tessuto tumorale tramite una digestione enzimatica vengono coltivate in un mezzo neurobasale, che ne promuove la crescita e lo sviluppo di neurosfere fluttuanti.

Questo video mostra un metodo per differenziare le cellule progenitrici neurali del midollo spinale (NPC) in motoneuroni. Descrive in dettaglio il processo di coltura delle NPC su una piastra di coltura rivestita utilizzando terreni specializzati arricchiti con inibitori specifici volti a facilitare la differenziazione delle NPC in motoneuroni maturi.

Questo video dimostra la trasformazione di cellule staminali pluripotenti umane (hPSC) in organoidi cerebrali sferici. Utilizzando inibitori specifici, le hPSC sono guidate a differenziarsi verso una linea neuronale, formando colonie neuroectodermiche. Vengono quindi introdotti speciali fattori di crescita, che incoraggiano l'auto-organizzazione e la proliferazione delle colonie, portando infine alla formazione di organoidi cerebrali sferici.

Il video dimostra la differenziazione delle cellule staminali neurali (NSC) utilizzando un dispositivo microfluidico che comprende un compartimento somatico e uno assonale separati da una barriera di microsolchi. Le NSC vengono introdotte nel compartimento somatico e possono aderire. Le NSC si differenziano in neuroni all'interno del compartimento somatico ed estendono gli assoni attraverso la barriera del microsolco fino al compartimento assonale.

Questo video mostra un metodo per isolare le cellule staminali dal cervelletto del topo postnatale e differenziarle in cellule neurali. Le cellule staminali della sospensione cellulare isolata vengono purificate utilizzando perle magnetiche rivestite di anticorpi e vengono coltivate per formare neurosfere. Le neurosfere vengono quindi mantenute in un mezzo di differenziazione per generare cellule neurali.

Questo video dimostra l'isolamento di cellule satelliti dai tessuti muscolari branchiomerici della testa di ratto attraverso la dissezione dei tessuti, la digestione enzimatica e la successiva purificazione meccanica e centrifuga. Le cellule vengono quindi seminate su pozzetti rivestiti di matrice extracellulare per la differenziazione in mioblasti e, infine, in miotubi e fibre muscolari mature.

Questo video dimostra una semplice tecnica per la neurogenesi indotta dall'acido retinoico in cellule di carcinoma embrionale di topo P19. L'acido retinoico attiva i fattori di trascrizione e innesca l'espressione genica per la differenziazione neuronale.

Il video dimostra il metodo per indurre la differenziazione delle cellule staminali in progenitori neurali utilizzando l'acido retinoico e il metodo della coltura a goccia sospesa.

Il video dimostra un protocollo per differenziare le cellule precursori degli oligodendrociti (OPC) in oligodendrociti e indurre la mielinizzazione in una co-coltura con neuroni del ganglio della radice dorsale (DRG). Gli OPC sono trasdotti con vettori lentivirali che codificano per una proteina di segnalazione che regola la mielinizzazione. Le OPC trasdotte vengono co-coltivate con neuroni DRG per valutare la differenziazione in oligodendrociti e la mielinizzazione indotta dalla proteina di...

Questo video dimostra la produzione di terreno condizionato con oligodendrociti (OCM) da cellule di lignaggio di oligodendrociti stressandole per migliorare il loro rilascio molecolare nel terreno. Questo terreno, ricco di fattori di crescita, citochine e altre molecole bioattive, può essere aggiunto alle colture di neuroni per ottenere informazioni sull'impatto dei fattori secreti dagli oligodendrociti sulla fisiologia e sulla connettività neuronale.

Questo video illustra una tecnica per isolare le pieghe neurali craniche dalla regione del mesencefalo degli embrioni di pollo. Presenta un dettagliato processo di dissezione delle pieghe neurali, il loro posizionamento e l'attaccamento su vetrini coprioggetti rivestiti di fibronectina, seguito dall'osservazione della migrazione delle cellule della cresta neurale dalle pieghe neurali.

Questo video mostra una tecnica per generare organoidi cerebrali da cellule staminali embrionali umane (hESC). La coltura aderente delle colonie di hESC viene trattata con enzimi per staccarle e romperle in grappoli. Questi cluster formano sfere tridimensionali in sospensione, che vengono poi indotte a differenziarsi in organoidi che imitano la corteccia cerebrale con strati di neuroni e cellule gliali.

Il video dimostra l'isolamento di motoneuroni oculomotori, trocleari e spinali da un embrione di topo transgenico. L'embrione esprime motoneuroni marcati con una proteina fluorescente verde (GFP) per una facile visualizzazione e identificazione. I motoneuroni vengono isolati chirurgicamente al microscopio a fluorescenza e mantenuti in un terreno di coltura.

Il video delinea la procedura per mantenere un ambiente controllato in una workstation di coltura cellulare per la crescita e il mantenimento delle cellule staminali neuronali. Queste procedure comportano l'impostazione delle condizioni della camera, i protocolli di pulizia e la preparazione dei terreni, mantenendo così la massima sterilità e riproducibilità e sostituendo i metodi tradizionali.

Questo video mostra una tecnica per purificare le cellule progenitrici endoteliali CD31+ (EPC) da una coltura utilizzando la selezione cellulare attivata magneticamente (MACS). La sospensione cellulare è trattata con un anticorpo coniugato con fluoroforo che si lega al CD31 sulle EPC. Il completamento della marcatura delle EPC CD31+ comporta l'aggiunta di un complesso di anticorpi, che si lega ai fluorofori, e di una nanoparticella magnetica rivestita di polimero, che si lega al complesso di...

Questo video dimostra il processo di formazione delle neurosfere e la loro espansione dal tessuto ippocampale. Le cellule staminali neurali e le cellule progenitrici del tessuto del giro dentato postnatale del topo proliferano e formano neurosfere primarie, che vengono poi riseminate per formare neurosfere secondarie.

Questo video dimostra un protocollo per indurre la differenziazione delle cellule staminali pluripotenti indotte in cellule endoteliali cerebrali.

Questo video mostra una tecnica per isolare e coltivare cellule staminali derivate dalla cresta neurale (ADSC) derivate da creste neurali marcate in modo fluorescente da tessuto adiposo dell'arco periaortico murino. Dopo l'isolamento, le NCADSC vengono rilevate, selezionate utilizzando la smistamento cellulare attivata dalla fluorescenza e successivamente coltivate su una piastra, promuovendo la proliferazione cellulare.

Questo video mostra un metodo per isolare le cellule gliali enteriche dalla sottomucosa e dalla lamina propria dell'intestino del topo. Delinea le fasi coinvolte nell'estrazione della sottomucosa e del tessuto della lamina propria, isolando le cellule gliali enteriche da esse e coltivando le cellule su una piastra a pozzetti rivestita per stabilire una coltura di cellule gliali enteriche.

Questo video dimostra l'isolamento dei capillari dai cervelli suini freschi. Il processo prevede la rimozione delle meningi, l'isolamento della materia grigia dal tessuto cerebrale, l'omogeneizzazione e il filtraggio della materia grigia per isolare i capillari e, infine, l'utilizzo della digestione enzimatica per purificare ulteriormente i capillari.

Questo video mostra il processo di isolamento dei microvasi cerebrali dai ratti soppressi. Comprende la dissezione del cervello, la pulizia del tessuto e la digestione meccanica, seguita da centrifugazione ripetuta per isolare la frazione pura dei microvasi.

Questo video descrive un metodo per preparare vetrini coprioggetti rivestiti con poliornitina e laminina per migliorare l'adesione e la crescita delle cellule staminali neurali. La tecnica prevede incubazioni e lavaggi sequenziali, facilitando la formazione di una matrice di supporto che promuove la crescita e la differenziazione delle cellule neuronali, imitando le strutture presenti nei neuroni.

Questo esperimento descrive in dettaglio un metodo per generare giunzioni neuromuscolari da cellule staminali pluripotenti indotte dall'uomo. Utilizza un processo di differenziazione a stadi per promuovere lo sviluppo del miotubo e dei motoneuroni e la formazione di sinapsi, producendo giunzioni neuromuscolari funzionali.

Questo video dimostra il metodo per migliorare la differenziazione delle cellule staminali con il trattamento transitorio DMSO, che arresta le cellule nella fase G1. Dopo il trattamento, viene aggiunto un mezzo di differenziazione ectodermica con inibitori di BMP e TGF-β per promuovere la formazione di precursori neurali.

Questo video dimostra un metodo per isolare i periciti cerebrali dal cervello di un topo. Le cellule isolate vengono coltivate in terreni specifici per i periciti per promuovere la proliferazione dei periciti.

Questo video mostra l'utilizzo di una tecnica di illuminazione laterale a luce soffusa per migliorare la visualizzazione ad occhio nudo dei corpi embrioidi, facilitando così la loro manipolazione e il loro trasferimento durante la coltura di organoidi cerebrali. Chiarisce l'impostazione dell'illuminazione a luce soffusa, i metodi per i cambiamenti dei media e il trasferimento del corpo embrioide, nonché la procedura per indurre la differenziazione neurale nei corpi embrioidi per lo sviluppo di...

Il video descrive la preparazione di un substrato microstrutturato per studiare la specifica del fenotipo cellulare. Un timbro PDMS microstrutturato rivestito di proteine viene utilizzato per trasferire il micropattern su un vetrino coprioggetti rivestito di PDMS. Il vetrino coprioggetti viene quindi trattato con un tensioattivo per ostacolare l'adesione delle cellule sulle superfici indesiderate. Le cellule vengono quindi aggiunte per stabilirsi nel modello e incubate per ulteriori analisi.

Questo video mostra un metodo per isolare i tubi endoteliali dal parenchima cerebrale di topo. Attraverso una combinazione di digestione enzimatica e dissociazione meccanica, il processo produce un tubo intatto con cellule endoteliali.

Questo video mostra una tecnica per la coltura di dischi intervertebrali bovini in bioreattori per sviluppare un modello tridimensionale di coltura di organi. Ai dischi vengono applicati specifici terreni privi di nutrienti e condizioni di pressione degenerativa, imitando il microambiente pro-infiammatorio e degenerativo osservato durante la malattia del disco intervertebrale in fase iniziale. Le altezze del disco vengono misurate dopo il trattamento per analizzare gli effetti della privazione...

Questo video dimostra il processo di induzione delle cellule staminali pluripotenti umane a differenziarsi in neuroni trasfettandoli con lentivirus ingegnerizzati che trasportano un gene del fattore di trascrizione neurogenico sotto il controllo dell'elemento responsivo alla tetraciclina, seguito da un trattamento con un derivato della tetraciclina e un mezzo di maturazione.

Questo video dimostra una tecnica per la differenziazione delle cellule staminali embrionali in una popolazione in rete di neuroni con sinapsi funzionanti. Delinea le fasi coinvolte nella differenziazione delle cellule staminali embrionali in neuroni, nell'induzione della formazione della rete neuronale e nell'arricchimento della coltura con neuroni in rete.

Questo video mostra un metodo per isolare le cellule di Schwann dalle fibre del nervo sciatico di topo.

Il video mostra un metodo per isolare nuclei intatti da cellule gliali e staminali nel giro dentato (DG) dell'ippocampo di topo. Il tessuto DG viene dissociato meccanicamente in un tampone di omogeneizzazione freddo per rilasciare i nuclei. I detriti tissutali e gli altri organelli rilasciati vengono scartati e i nuclei vengono colorati con una colorazione del DNA e un anticorpo coniugato con fluorofori specifico per l'antigene nucleare neuronale (NeuN). Lo smistamento dei nuclei attivati dalla...

Questo video dimostra la riprogrammazione del destino cellulare delle cellule germinali dei nematodi in neuroni. Le larve transgeniche del nematode Caenorhabditis elegans sono soggette a interferenza dell'RNA (RNAi) per abbattere uno specifico fattore di regolazione della cromatina, rendendo le cellule germinali della loro progenie più suscettibili alla riprogrammazione del destino cellulare. Lo shock termico viene applicato alla progenie, inducendo le cellule germinali a esprimere un fattore...

Questo video dimostra la procedura di differenziazione delle cellule pluripotenti umane in cellule simili alla microglia. Il processo prevede la formazione di corpi embrioidi, il loro trasferimento in pozzetti rivestiti e l'utilizzo di fattori di crescita specifici per guidare la differenziazione in precursori primitivi dei macrofagi, che infine si differenziano in cellule simili alla microglia.

Questo video dimostra la coltura di cellule gliali di Müller (MG) isolate da retine di topo. Le retine sono dissociate in una sospensione unicellulare utilizzando enzimi digestivi. Le cellule vengono quindi coltivate in un terreno con un fattore di crescita che promuove la proliferazione delle cellule MG e la mortalità delle cellule neuronali. Le cellule neuronali morte vengono rimosse durante il passaggio e le cellule MG vengono coltivate per ulteriori analisi.

Questo video mostra una tecnica per isolare e coltivare cellule gliali miste primarie da tessuto del midollo spinale di topo adulto. Il protocollo prevede la digestione enzimatica del tessuto, seguita dalla rimozione delle membrane cellulari rotte e dei detriti mielinici per ottenere una popolazione unicellulare. Le cellule vengono quindi coltivate in terreni ottimizzati per la crescita di cellule gliali miste.

Questo video dimostra la differenziazione delle cellule progenitrici otiche multipotenti immortalizzate (iMOP) in cellule epiteliali sensoriali. Delinea le fasi coinvolte nella coltura delle cellule iMOP, nella formazione delle otosfere, nell'induzione della differenziazione e nella visualizzazione dei componenti cellulari e dei marcatori di differenziazione attraverso la microscopia a fluorescenza per confermare il successo della differenziazione cellulare.

Il video dimostra la differenziazione dei progenitori otici multipotenti immortalizzati (iMOP) in neuroni gangliari spirali (SGN) e la conferma della differenziazione basata sull'immunofluorescenza. Gli iMOP vengono placcati su vetrini coprioggetti rivestiti con substrato di coltura in un terreno di differenziazione neuronale per la differenziazione in SGN. Le cellule differenziate vengono marcate con anticorpi specifici per i marcatori di differenziazione neuronale e analizzate al microscopio...

Questo video dimostra la coltura ex vivo e l'imaging di fette oculomotorie da embrioni di topo transgenico. Gli embrioni vengono isolati e immersi nell'agarosio. Utilizzando un vibratomo si ottengono fette contenenti i nuclei oculomotori e gli occhi. Le fette vengono mantenute in coltura e visualizzate utilizzando un microscopio a fluorescenza.

Questo video dimostra un processo a più fasi per differenziare le iPSC umane in cellule endoteliali microvascolari cerebrali. Le cellule differenziate risultanti imitano da vicino le cellule endoteliali microvascolari cerebrali, caratterizzate da giunzioni strette, che le rendono ideali per la ricerca sulle malattie cerebrali.

Questo video dimostra un metodo per isolare i neuroni dal proencefalo di un embrione di pollo in fase iniziale e coltivarli su un array di microelettrodi per formare una rete neuronale.

Questo video mostra la creazione di un chip barriera emato-encefalica utilizzando cellule precursori derivate da iPSC. Comporta la semina di cellule progenitrici neurali e cellule endoteliali microvascolari cerebrali in canali separati con una membrana porosa. Facendo scorrere i mezzi di differenziazione, le cellule endoteliali formano giunzioni strette che assomigliano a vasi sanguigni e le cellule neurali maturano in vari tipi di cellule cerebrali, stabilendo una barriera emato-encefalica...

Il video dimostra la preparazione di fette di corteccia cingolata mediale al talamo anteriore (MT-ACC) da cervelli di topo. Il cervello di un topo viene sezionato, vengono praticati tagli per esporre il percorso MT-ACC e vengono generate fette utilizzando un vibratomo. Le fette di MT-ACC vengono quindi mantenute nel liquido cerebrospinale artificiale ossigenato.

Questo video mostra una tecnica per generare una linea reporter di cellule staminali di glioblastoma per identificare la differenziazione delle cellule staminali di glioblastoma (GSC) in astroglia. Delinea i passaggi coinvolti nella semina delle GSC, nella loro trasduzione con un lentivirus che codifica per GFP e nella determinazione dell'espressione del reporter GFP attraverso la citometria a flusso.

Questo video mostra l'infezione di neuroni primari del mesencefalo di topo con virus adeno-associati che trasportano un indicatore di calcio fluorescente. La fluorescenza dell'indicatore conferma l'esito positivo dell'infezione e consente il monitoraggio in tempo reale dell'infezione neuronale.

Il video dimostra un metodo per ottenere fette di corteccia rinale-ippocampo dal cervello di un cucciolo di ratto e coltivarle in inserti membranosi all'interno di una piastra multi-pozzetto riempita con terreno per ulteriori analisi.

Questo video mostra la dissezione e il montaggio di espianti cerebrali da larve di Drosophila. Il sistema nervoso centrale (SNC), attaccato ai dischi oculari, viene estratto dalle larve e poi montato su un vetrino in una soluzione salina fisiologica.

Il video dimostra una tecnica per differenziare le cellule staminali pluripotenti indotte umane (hiPSC) in cellule progenitrici neurali (NPC). Inizialmente, le hiPSC vengono coltivate su uno strato di alimentazione di fibroblasti embrionali di topo (MEF). Successivamente, le cellule vengono staccate e trasferite su una piastra rivestita di biopolimero per consentire ai MEF di aderire e separarsi dalle hiPSC. Le hiPSC sospese vengono quindi trasferite su una piastra con fondo a V e centrifugate...

Il video descrive la procedura per lo sviluppo di corpi embrioidi privi di siero (SFEB) da cellule progenitrici neuronali utilizzando vari mezzi di differenziazione privi di siero o DM. DM-2 facilita la maturazione e la disposizione dei neuroni per formare SFEB, mentre DM-3 viene utilizzato per un ulteriore mantenimento della crescita.

Questo video mostra il processo di coltura di cellule neuronali su un array multi-elettrodo (MEA) modellato per stabilire reti neuronali modulari. Questo metodo consente lo studio della trasmissione del segnale neurale e delle interazioni cellulari.

Questo video mostra il processo di differenziazione delle iPSC umane in motoneuroni. Il razionale prevede l'utilizzo di iPSC che sono state geneticamente modificate per esprimere specifici fattori di trascrizione. Quando viene coltivato in un terreno contenente doxiciclina, questo antibiotico innesca l'espressione di fattori di trascrizione, promuovendo così la differenziazione delle iPSC nei progenitori dei motoneuroni. In definitiva, i progenitori vengono coltivati in un mezzo neuronale per...