Una tecnica per ottimizzare la coltura di organoidi cerebrali utilizzando l'illuminazione laterale a luce soffusa

In questo articolo

Abstract

Fonte: Chen, B. et al., Facilitare la coltura di organoidi cerebrali tramite illuminazione laterale a luce soffusa.J. Vis. Exp.(2022).

Questo video mostra l'utilizzo di una tecnica di illuminazione laterale a luce soffusa per migliorare la visualizzazione ad occhio nudo dei corpi embrioidi, facilitando così la loro manipolazione e il loro trasferimento durante la coltura di organoidi cerebrali. Chiarisce l'impostazione dell'illuminazione a luce soffusa, i metodi per i cambiamenti dei media e il trasferimento del corpo embrioide, nonché la procedura per indurre la differenziazione neurale nei corpi embrioidi per lo sviluppo di organoidi cerebrali.

Protocollo

Tutte le procedure che prevedono la raccolta dei campioni sono state eseguite in conformità con le linee guida IRB dell'istituto.

1. Preparazione della lampada a luce soffusa (giorno 1)

Utilizzare una lavagna acrilica trasparente con uno spessore di 0,3-0,5 cm nel formato di un foglio A5. Incolla i tamponi bianchi sulla parte anteriore e posteriore della lastra acrilica.
Installare una fila di luci bianche a LED sul bordo della piastra in modo che le luci possano entrare dal lato della lastra acrilica e quindi sparare in parallelo (Figura 1A-F, Figura 2B).
nota:....

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Risultati

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Figura 1: Preparazione della lampada a luce soffusa. (A) L'alimentatore e le luci a LED sono stati installati su un lato del pannello acrilico (come mostrato nel riquadro tratteggiato rosso). La lunghezza d'onda di diffusione della lampada a luce soffusa a LED è di 450-470 nm, il flusso luminoso è di 1300-1800 lm e l'indice di resa cromatica è di 75-85 Ra. (B) È stat.......