Ottenere fette di cervelletto da un cervello di pulcino embrionale

Abstract

Fonte: Hanzel, M., et al. Ex Vivo Coltura di fette cerebellari di pollo ed elettroporazione spazialmente mirata di precursori di cellule granulari. J. Vis. Exp. (2015).

Il video mostra la preparazione delle fette del cervelletto. Mostra una procedura dettagliata per isolare il cervelletto da un embrione di pollo. Le fette vengono quindi preparate dal cervelletto sezionato utilizzando un tritatessuti per ulteriori analisi sperimentali.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Dissezione dell'embrione di pollo Giorno 14 (e14) Cervelletto

1. Incubare le uova di gallina brune fecondate a 38 °C fino al giorno 14 embrionale.
2. Usando le forbici per le uova, decapitare l'embrione di pollo in ovulo e rimuovere la testa in una capsula di Petri contenente soluzione salina tampone fosfato ghiacciata (PBS) (Figura 1A).
3. Usando una pinza standard, praticare incisioni dietro cias....

Risultati

Figura 1. Dissezione del cervelletto da embrioni di pollo E14. (A) Decapitare il pulcino nell'uovo e rimuovere la testa in una capsula di Petri con PBS ghiacciato. Rimuovere la mascella inferiore e gli occhi praticando un'incisione dietro gli occhi e la faringe (linea tratteggiata). (B) Rimuovere la pelle dalla superficie del cranio. (C) Rimuovere le ossa frontali e parietali e (D) rimuovere il ce.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Tritatutto McIlwain	Ingegneria di laboratorio Mickle Ltd		Tagliare a 300μm per ottenere i migliori risultati.