Registrazioni elettrofisiologiche in vivo di attività cerebrali da più siti nei ratti

Abstract

Fonte: Haumesser, J. K., et al. Registrazioni elettrofisiologiche acute in vivo di potenziali di campo locali e attività multi-unità dal percorso iperdiretto nei ratti anestetizzati. (2017).

Questo video mostra la procedura dettagliata per preparare un ratto anestetizzato per registrazioni elettrofisiologiche dell'attività cerebrale da più siti. Il cuoio capelluto viene sezionato per accedere al cranio e vengono praticati dei fori in punti precisi per installare e fissare gli elettrodi. Gli elettrodi a microfilo di tungsteno vengono quindi inseriti nella posizione mirata per registrare i dati.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Chirurgia

1. Per le registrazioni elettrofisiologiche, utilizzare l'uretano (ATTENZIONE) per l'anestesia.
   cautela: L'uretano è tossico e cancerogeno, quindi attenersi sempre alle norme di sicurezza e alla scheda tecnica fornita dal produttore della sostanza.
2. Preparare una soluzione di uretano 200 mg/mL in soluzione salina medica di cloruro di sodio (NaCl) allo 0,9%.
3. Somministrare un totale di 1....

Risultati

Figura 1: Attività multi-unità caratteristica da una traiettoria dell'elettrodo dorso-ventrale che prende di mira l'STN. (A) Registrazioni multi-unità del nucleo talamico posteromediale ventrale (VPM), della zona incerta (ZI), del nucleo subtalamico (STN) e della substantia nigra pars reticularis (SNr). Il VPM presenta picchi di ampiezza elevati radi e irregolarmente distanziati. Questo schema di pic.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Elettrodi epidurali personalizzati Ag/AgCl	Goodfellow GmbH D-61213 Bad Nauheim, Germania info@goodfellow.com	ID prodotto AG005127 per filo d'argento al 99,99%	Gli elettrodi Ag/AgCl consentono una migliore qualità del segnale, ma possono essere utilizzati solo in esperimenti acuti. Possibile sostituzione: Elettrodi in acciaio inox
Supporto stereotassico con blocco acrilico	David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, Stati Uniti	ID prodotto Modello 1770 Portaelettrodo standard	Assicurarsi che il blocco acrilico abbia incavi che si adattino alla configurazione dell'elettrodo per il target desiderato. I blocchi acrilici possono essere facilmente modificati con un file per ottenere la configurazione desiderata. Possibile sostituzione: portaelettrodi autocostruiti
Elettrodi microfili di tungsteno impedenza 1,5 MΩ	Microprobes.com 18247-D Flower Hill Way Gaithersburg, Maryland, 20879 Stati Uniti	ID prodotto WE3ST31.5A5-250um	L'1,5 MΩ è necessario per registrare contemporaneamente MUA e LFP. Possibile sostituzione: è possibile utilizzare microelettrodi di diversi materiali. Gli elettrodi devono essere dritti, robusti e il più sottili possibile.
Strumento di allineamento dei ratti	David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, Stati Uniti	ID prodotto Modello 944 Strumento di allineamento dei ratti	Consente l'esatto orientamento del cervello in modo che corrisponda agli atlanti stereotassici. Possibile sostituzione: supporto stereotassico con cannula
Acrilico dentale bicomponente	Prodotti dentali associati Ltd. Kemdent Works, Purton, Swindon Wiltshire, SN5 4HT, Regno Unito	Simplex Rapid Powder Clear 225g, Codice prodotto: ACR803; Simplex Rapid Liquid 150ml, Codice prodotto: ACR920	A seconda degli elettrodi utilizzati, la supercolla potrebbe essere un'alternativa facile, se gli elettrodi sono piccoli e leggeri. Possibile sostituzione: Supercolla (a base di cianoacrilato)
gabbia di Faraday	Autocostruzione		Una gabbia di Faraday adeguata sarà la migliore protezione dagli artefatti elettromagnetici, ma tutto ciò che può essere modellato a forma di scatola o applicato a un telaio ed è realizzato in materiale conduttivo può aiutare. Possibile sostituzione: foglio di alluminio o rete di rame
Configurazione elettrofisiologica con software di registrazione e funzionalità di ordinamento dei picchi online	Sistema di acquisizione dati neurale OmniPlex® Plexon Inc 6500 Greenville Avenue, Suite 700 Dallas, Texas 75206 USA		Il software di ordinamento offline è una potenziale alternativa, più script e software possono essere trovati gratuitamente nella comunità open source.