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Valutazione basata su array di microelettrodi delle reti neuronali in fette di midollo spinale di topo

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Iredale, J. A., et al. Registrazione dell'attività di rete nei circuiti nocicettivi spinali utilizzando array di microelettrodi. J. Vis. Exp. (2022).

Questo video mostra un test basato su array di microelettrodi per studiare l'attività della rete neuronale in sezioni di midollo spinale di topo. In primo luogo, viene registrata l'attività elettrofisiologica del corno dorsale superficiale (SDH) della fetta. Quindi, viene introdotto un inibitore del canale del potassio per prolungare la depolarizzazione, con conseguente attività ritmica sincrona attraverso la rete neuronale.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutte le procedure che prevedono la raccolta dei campioni sono state eseguite in conformità con le linee guida IRB dell'istituto.

1. Elettrofisiologia in vitro

  1. Preparazione di soluzioni per la preparazione e la registrazione di fette di midollo spinale
    1. Liquido cerebrospinale artificiale
      nota: Il liquido cerebrospinale artificiale (aCSF) viene utilizzato in una camera di incubazione di interfaccia, dove le fette vengono conservate fino all'inizio della registrazione e durante gli esperimenti sia come perfusato che come diluente per i farmaci. Vedere la Tabella....

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Figura 1: Orientamenti della fetta del midollo spinale, metodi di montaggio e taglio. (A) Le fette trasversali richiedono un blocco di taglio in polistirolo con una scanalatura di supporto tagliata. Il midollo spinale è appoggiato contro il blocco nella scanalatura di supporto, il lato dorsale del midollo è rivolto lontano dal blocco. Il blocco e il cavo sono incollati su una fase di.......

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nessun conflitto di interessi dichiarato.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4-amminopiridinaSigma-AldrichCodice 275875-5G
100% etanoloThermo FisherAJA214-2.5LPL
CaCl2 1MBanksia Scientifica0430/1L
Carbonox (Carbogen - 95% O2, 5% CO2)Nucleo219122
Forbici a molla a manico lungo curvoStrumenti per la scienzaCodice: 15015-11
Camera di incubazione dell'interfaccia dell'aria su misura
Siero fetale bovinoThermo Fisher10091130
Pinze Dumont #5Strumenti per la scienzaCodice 11251-30
glucosioThermo FisherAJA783-500G
Siero per cavalliThermo Fisher16050130
Microscopio invertitoZeissAssiovert10
KclThermo FisherAJA383-500G
KetaminaCevaKETALAB04
Forbici chirurgiche grandiStrumenti per la scienzaCodice: 14007-14
Loctite 454 Adesivo istantaneoBulloneria e forniture industrialiL4543G
MATLABMathWorksR2018b
MEA tridimensionaliSistemi multicanale60-3DMEA100/12/40iR-Ti, 60-3DMEA200/12/50iR-Ti60 elettrodi in nitruro di titanio (TiN) con 1 elettrodo di riferimento interno, organizzati in una griglia quadrata 8x8. Gli elettrodi hanno un diametro di 12 μm, un'altezza di 40 μm (100/12/40) o 50 μm (200/12/50) e una distanza equidistante di 100 μm (100/12/40) o 200 μm (200/12/50) l'uno dall'altro.
Stadio di testa MEASistemi multicanaleMEA2100-HS60
Scheda di interfaccia MEASistemi multicanaleAvvio multiplo MCS-IFB 3.0
Rete MEASistemi multicanaleALA HSG-MEA-5BD
Sistema di perfusione MEASistemi multicanalePPS2
MEA, planareSistemi multicanale60MEA200/30iR-Ti, 60MEA500/30iR-Ti60 elettrodi in nitruro di titanio (TiN) con 1 elettrodo di riferimento interno, organizzati in una griglia quadrata 8x8 (200/30) o in una griglia rettangolare 6x10 (500/30). Gli elettrodi hanno un diametro di 30 μm e sono equidistanti tra loro di 200 μm (200/30) o 500 μm (500/30).
MgCl2Thermo FisherAJA296-500G
Fotocamera per microscopioMoticoMoticam X Wi-Fi
Software di analisi multicanaleSistemi multicanaleV 2.17.4
Software per sperimentatori multicanaleSistemi multicanaleV 2.17.4
NaClThermo FisherAJA465-500G
NaHCO3Thermo FisherAJA475-500G
NaH2PO4Thermo FisherACR207805000
RongeursStrumenti per la scienzaCodice: 16021-14
Piccole forbici a mollaStrumenti per la scienzaCodice 91500-09
Piccole forbici chirurgicheStrumenti per la scienzaCodice 14060-09
saccarosioThermo FisherAJA530-500G
Supercollaadesivo cianoacrilato
TetrodotossinaAbcamAB120055
Tabella di isolamento dalle vibrazioniNewportVH3048W-OPT
Microtomo vibranteLeicaVT1200 S
di

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Microelectrode ArrayNeuronal NetworkMouse Spinal CordSuperficial Dorsal HornPotassium Channel Inhibitor4 AminopyridineAction Potential RecordingElectrophysiological ActivitySynchronous Rhythmic ActivityArtificial CSF Perfusion

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