Modulazione sinaptica in Drosophila dopo esposizione a luce prolungata

Abstract

Fonte: Sugie, A., et al. Analisi della modulazione sinaptica dei fotorecettori di Drosophila melanogaster dopo l'esposizione alla luce prolungata. J. Vis. Exp. E 120

Questo video dimostra l'allevamento di Drosophila melanogaster in specifiche condizioni di luce per studiare il ruolo delle proteine Bruchpilot nel rilascio di neurotrasmettitori e la conseguente modulazione dell'attività sinaptica.

Protocollo

1. Condizioni di esposizione alla luce

1. Dallo stadio larvale fino all'eclosione, mantenere le mosche in un ciclo di 12 ore luce/12 ore buio (LD) a 25 °C (Figura 1A).
2. Raccogliere le mosche da 0 a 6 ore dopo l'eclosione e metterle in una nuova fiala contenente cibo per mosche.
3. Posizionare le fiale in un rack in resina acrilica trasparente con tre gradini (un'altezza di 41 cm, una base di 21 cm, uno spessore di 4 cm e un'altezza di 13 cm per ogni passaggio) (Figura 1B).
4. Regolare la distanza tra il rack e un pannello LED per fornire un'illuminazione con un'intensità media di 1.000 lux utilizzando un esposimetro digitale (Figura 1C).
5. Tenere le mosche per 1 - 3 giorni in una delle seguenti condizioni: buio costante (DD), 12 ore di luce/12 ore di ciclo buio (LD) o luce costante (LL) a 25 °C in una piccola incubatrice (Figure 1A e 1C).

Risultati

Figura 1: Preparazione delle condizioni per l'esposizione a un'intensità luminosa definita. (A) Protocolli di esposizione alla luce dopo l'eclosione. DD, buio continuo; LD, 12 h di luce/12 h di buio; LL, esposizione costante alla luce. I cervelli di mosca sono stati sezionati nei tempi indicati tra parentesi (adattato da una precedente pubblicazione9). (B) Le fiale sono allineate in un rack acrilico ...

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
fiala	Hightech, Giappone	MKC-20
spina	Thermo Fisher Sciehtific, Stati Uniti	AS-275
Rack trasparente personalizzato in resina acrilica	Shin-Shin Corporation, Giappone		un'altezza di 41 cm, una base di 21 cm, uno spessore di 4 cm e un'altezza di 13 cm per ogni gradino
Incubatrice fredda	MITSUBISHI ELECTRIC, Giappone	CN-40A
Pannello LED	MISUMI, Giappone	LEDXC170-W
Esposimetro digitale	Cassetta delle spese di trasmissione	DT-1301
Cuscinetto antimosche	Tokken, Giappone	TK-HA03-S