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Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Inserimento dell'array di elettrodi dell'impianto cocleare (CI)
NOTA: L'array di elettrodi intracocleari è costituito da quattro bande di platino (Ø0,2 mm) con filo isolato in platino/iridio parylene schermato in un tubo di silicone (Figura 1).
- Posizionare lo strumento divaricatore nell'incisione per accedere nuovamente alla bulla.
- Inserire l'array di elettrodi nella finestra rotonda (scala timpani) a una profondità in cui si trova il 4° anello di platino appena all'interno della finestra rotonda. Ciò fornisce una profondità di inserimento di ~2 mm, corrispondente a una posizione intracocleare a ~30 kHz.
- Avvolgere il filo conduttore all'interno della bulla e incollare il filo al tessuto sopra la bulla. L'avvolgimento del filo aiuta a mantenere l'array in posizione durante l'esperimento.
- Rimuovere con cautela il divaricatore e chiudere l'inserimento con colla per fazzoletti.
- Praticare una piccola incisione (0,5 mm) nel collo perpendicolare alla linea tra il punto in cui si troveranno gli elettrodi attivi e quelli di riferimento della risposta uditiva del tronco encefalico (ABR) utilizzando una forbice tissutale. Posizionare la pallina macinata di platino nella tasca sottocutanea e chiudere la piccola incisione con colla per tessuti (Figura 2).
- Collegare la scheda dell'array di elettrodi alla piattaforma di stimolazione animale (ASP).
2. Risposta elettrica uditiva del tronco encefalico (eABR)
NOTA: Una piattaforma di stimolazione animale viene utilizzata per stimolare elettricamente l'array di elettrodi. Possono essere utilizzate altre fonti di corrente e sistemi software.
- Pulire gli elettrodi ABR con una soluzione di etanolo al 70%. Posizionare gli elettrodi sotto la pelle: attivo (Ch1) sul vertice, riferimento (-) sotto il padiglione auricolare dell'orecchio omolaterale e macinato nella zampa posteriore (Figura 2).
- Apri il software ASP e definisci il paradigma di stimolazione a impulsi elettrici. Utilizziamo un impulso bifasico bilanciato in carica con 50 μs/fase e 10 μs di gap interfase presentato a 23,3 impulsi al secondo (pps). La stimolazione elettrica viene erogata in una configurazione di elettrodi monopolari con livelli di corrente crescenti. Per ogni livello attuale viene calcolata una media di 400 risposte.
- Presenta i treni di impulsi elettrici e registra la risposta eABR evocata in modo continuo tramite l'headstage, il preamplificatore e il processore uditivo di Tucker Davis Technologies (TDT).
- Tracciare e analizzare i dati eABR tramite uno script Matlab personalizzato (Figura 3). Il copione e un esempio di registrazione sono forniti nel Supplementario.
