Fonte: Wallrafen, R., et al. Quantificazione della distribuzione eterogenea di una proteina sinaptica nel cervello di topo utilizzando l'immunofluorescenza. J. Vis. Exp. (2019).
Questo video dimostra la colorazione in immunofluorescenza di una fetta di cervello di topo per quantificare la distribuzione di una specifica proteina presinaptica. Il processo prevede il blocco di siti aspecifici, l'applicazione di anticorpi primari per la proteina bersaglio e un marcatore di riferimento, seguiti dalla marcatura degli anticorpi secondari e dalla controcolorazione nucleare. Il marcatore di riferimento garantisce una quantificazione accurata fornendo una linea di base coerente e la distribuzione della proteina presinaptica viene analizzata tra le regioni del cervello utilizzando la microscopia confocale.