Induzione e valutazione della depressione nei topi attraverso l'esposizione cronica allo stress

Abstract

Fonte: Yan, Z., et al. Valutazione dell'effetto anti-depressione di Xiaoyaosan su topi cronicamente stressati. J. Vis. Exp. (2019).

Il video mostra il processo di creazione di un modello murino di depressione cronica indotta da stress e la valutazione dei comportamenti depressivi. L'applicazione cronica di vari fattori di stress innesca il rilascio di corticosterone, portando alla sovraeccitazione neuronale e alla morte neuronale, che si traduce in sintomi simili alla depressione nei topi.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Preparazione dei topi per la procedura sperimentale

NOTA: Per la procedura sperimentale, sono stati selezionati topi maschi sani C57BL/6J di età compresa tra 12 settimane, con ciascun topo di peso compreso tra 18 e 22 g.

1. Tenere i topi individualmente in gabbie in una tipica stanza per animali da laboratorio priva di patogeni specifici (SPF) (22 ± 1 °C, 12 h/12 h ciclo buio/luce, umidità relativa: 30–40%) per una settimana prima della procedura CUMS.
2. Dividi casualmente tutti i topi in un gruppo di controllo e un gruppo modello in base al loro peso corporeo. Ogni gruppo ha 15 topi.
3. Prima dell'inizio dell'esperimento, numerare i topi di ciascun gruppo sulla coda utilizzando un pennarello.

2. Induzione della depressione nei topi

NOTA: Per indurre la depressione, i topi nel gruppo modello e due gruppi di trattamento sono stati sottoposti a stress lieve cronico imprevedibile (CUMS) per 21 giorni. Il piano può essere modificato in base alla situazione pratica, ma dovrebbe essere seguito il principio secondo cui lo stesso fattore di stress non può essere utilizzato continuamente.

1. Esponi i topi ogni giorno a due dei seguenti sette fattori di stress per 21 giorni consecutivi. Il nostro piano di modellazione è progettato come segue:
   1. Lunedì, esporre i topi alla privazione del cibo (svuotare il mangime di ogni gabbia per 24 ore, dalle 8:00 alle 8:00) e alla privazione dell'acqua (rimuovere la borraccia di ogni gabbia per 24 ore, dalle 8:00 alle 8:00).
   2. Martedì, esponi i topi a stress di contenzione (trattieni i topi in una piccola vasca di plastica per 3 ore, dalle 8:00 alle 11:00) e svuota le gabbie (rimuovi l'imbottitura in ogni gabbia per 11 ore, dalle 8:00 alle 19:00).
   3. Mercoledì, esporre i topi a gabbie bagnate e sporche (versare acqua in ogni gabbia e mantenerla bagnata per 24 ore, dalle 8:00 alle 8:00) e gabbie affollate (mettere cinque topi in una gabbia per 24 ore, dalle 8:00 alle 8:00).
   4. Giovedì, esponi i topi allo stress da contenimento e al nuoto ghiacciato (costringi ogni topo a nuotare in un acquario di vetro trasparente con acqua ghiacciata per 5 minuti).
   5. Venerdì, esponi i topi a gabbie bagnate e sporche e privazione di cibo.
   6. Sabato, esponi i topi allo stress da contenimento e alle gabbie affollate.
   7. Domenica, esponi i topi a gabbie vuote e nuota ghiacciato.
2. Registra lo stato del mantello e il peso corporeo settimanalmente fino alla fine della modellazione (giorno 21). Calcola il punteggio totale dello stato del mantello come la somma dei punteggi di sette diverse parti del corpo: testa, collo, mantello dorsale, mantello ventrale, zampe anteriori, coda e zampe posteriori. Un punteggio di uno indica un cappotto ben curato e un punteggio di zero indica un cappotto trasandato.

Materiali