Indurre la perdita dell'udito nei topi attraverso l'esposizione prolungata al suono ad alto volume

Abstract

Fonte: Lee, D. et. al., Condizioni sperimentali modificate per la perdita dell'udito indotta dal rumore nei topi e valutazione della funzione uditiva e del danno alle cellule ciliate esterne. J. Vis. Exp. (2023)

Questo video dimostra la procedura di perdita dell'udito indotta dal rumore nei topi. Il suono ad alto volume danneggia le cellule ciliate dell'orecchio interno e interrompe le vie uditive, con conseguente compromissione dell'udito.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Induzione della perdita dell'udito indotta dal rumore (NIHL) nei topi

1. Preparare la gabbia per i topi sperimentali
   1. Per fare ciò, utilizzare una gabbia trappola per topi con dimensioni di 14 cm × 17 cm × 24 cm. Tagliare quattro pezzi di cartone ondulato in dimensioni adeguate, facendoli entrare nella gabbia (13 cm × 23 cm e 13 cm × 16 cm).
   2. Per evitare che i topi si taglino le zampe dalla griglia a rete, posiziona due dei pezzi rispettivamente sul lato inferiore e sul retro. Posiziona gli altri due pezzi perpendicolarmente intrecciati tra loro, per dividere lo spazio all'interno della gabbia in quarti.
2. Esegui questo studio in una scatola insonorizzata. Posiziona un altoparlante a 8,5 cm davanti alla gabbia e posiziona sia l'altoparlante che la gabbia in una scatola insonorizzata.
3. Aprire il software applicativo CLIO.
4. Sposta il cursore sull'icona dell'altoparlante, quindi fai clic su TwoSin. Inserisci e modifica il valore di Freq 1 in 1000 Hz e Freq 2 in 6000 Hz, e fai clic su OK per iniziare a riprodurre il suono.
5. Nella scheda Leq, modificare i decibel Volt (dBV) in decibel del livello di pressione sonora (dBSPL). Dopo aver impostato l'ora sull'interfaccia del software, fare clic sul pulsante triangolo verde per riprodurre il suono.
6. Posizionare un microfono davanti all'altoparlante a una distanza di 8,5 cm per calibrare il livello di rumore (Figura 1). Regolare il livello di rumore a 125 dB SPL-A e monitorare continuamente per non meno di 3 minuti per assicurarsi che il livello di rumore sia sufficientemente stabile. Usa un generatore, un analizzatore e un amplificatore per creare e controllare il rumore. (Figura 2)
   NOTA: Eseguire questo passaggio in una scatola insonorizzata per evitare danni all'udito dell'operatore.
7. Posizionare quattro topi maschi C57BL/6J nella gabbia (uno per ogni quarto) per l'esposizione al rumore. Assegna casualmente i topi in ogni trimestre durante l'esposizione al rumore. Posizionare un microfono sulla parte superiore della gabbia per monitorare il livello di rumore durante l'esposizione al rumore (Figura 3).
   NOTA: Eseguire questo passaggio in una scatola insonorizzata per evitare danni all'udito dell'operatore.
8. Esporre i mouse al rumore a frequenze di 1 kHz e 6 kHz ininterrottamente per 6 ore al giorno, per 5 giorni consecutivi.

Risultati

Figura 1: Calcolo della tensione dalla calibrazione. Per ogni frequenza specifica, il valore della tensione selezionata (asse orizzontale) verrà inserito nella curva di calibrazione per ottenere i...

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
1/4" CCP Free-field Standard Microphone Set	GRAS	428158	Per l'esposizione
Gabbia trappola per topi			14 cm x 17 cm x 24cm
Amplificatore audio, MT-1000	unika		Per l'esposizione al rumore
Generatore di suoni/analizzatore/varie, FW-02	CLIO	620300719	Per l'esposizione
Camera insonorizzata	IEA Electro-Acoustic Technology		Per l'esposizione al rumore e ABR
Speaker	IEA Electro-Acoustic Technology		Per l'esposizione al rumore

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