Modellazione della rigenerazione sensoriale degli assoni in un ratto utilizzando l'iniezione del ganglio della radice dorsale e la lesione da schiacciamento della radice dorsale

Abstract

Fonte: Cheah, M., et al. Iniezione del ganglio della radice dorsale e lesione da schiacciamento della radice dorsale come modello per la rigenerazione sensoriale degli assoni. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video mostra una procedura passo-passo per iniettare una sospensione virale nei gangli della radice dorsale (DRG) e indurre una lesione assonale controllata attraverso uno schiacciamento della radice dorsale in un ratto anestetizzato. Il protocollo prevede l'esposizione dei DRG, la somministrazione di un vettore virale che promuove la crescita per facilitare la rigenerazione assonale e la recisione delle connessioni assonali al midollo spinale per modellare la lesione e la rigenerazione dei nervi sensoriali.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Iniezione di DRG ed esecuzione di una lesione da schiacciamento della radice dorsale

NOTA: Questo è un intervento chirurgico estremamente delicato. Si consiglia di esercitarsi prima su alcuni animali morti per familiarizzare ....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Fast Green FCF dye	Sigma-Aldrich	F7258	Per visualizzare una soluzione incolore. Concentrazione consigliata: 1%
Olsen-Hegar Needle Holder	Fine Science Tools	FST 12502-12
Friedman Pearson Rongeur Curved 0.7mm Cup	Fine Science Tools	FST 16121-14
Bonn Micro Forceps	Fine Science Tools	FST 11083-07	Per eseguire lesioni
Forbici per separare i tessuti	Fine Science Tools	FST 14072-10	<
Strumenti di Fine Science	FST 14058-11	<
Fine Science Tools	FST 11018-12
Goldstein Retractor	Fine Science Tools	FST 17003-03
Vannas Spring Scissors (dritto)	Fine Science Tools	FST 15018-10
SURGIFOAM Absorbable Gelatin Sponge	Ethicon	1972	Per il controllo
Microliter Syringe RN701 (10 μl)	Hamilton	80330
Ago rimovibile su misura (per iniezione DRG)	Hamilton	7803-05	33 gauge, 38 mm, point style 3
UltraMicroPump con controller SYS-Micro4	World Precision Instruments	UMP3-1

da schiacciamento della radice dorsaletd style='border-top-style:none;height:15.5pt;width:208pt;'>Fine Scissorstd style='border-top-style:none;height:15.5pt;width:208pt;'>Micro-Adson Forceps dell'emorragia