Analisi ultrastrutturale di una sezione cerebrale di topo mediante microscopia elettronica a trasmissione

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Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Lutz, D., et.al. Valutazione dei parametri di neuroplasticità ultrastrutturale dopo la trasduzione in utero del cervello di topo in via di sviluppo e del midollo spinale. J. Vis. Exp. (2019).

Questo video mostra la preparazione e l'analisi al microscopio elettronico a trasmissione (TEM) di una sezione cerebrale di un cucciolo di topo. Il protocollo inizia con il tessuto fissato con tetrossido di osmio incorporato nella resina, seguito da un taglio preciso per isolare la regione di interesse e dall'ultramicrotomia per produrre sezioni semisottili e ultrasottili, che vengono visualizzate utilizzando rispettivamente la microscopia ottica e la TEM.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutte le procedure che coinvolgono campioni di animali sono state esaminate e approvate dal comitato di revisione etica degli animali appropriato.

1. Selezione dei parametri di neuroplasticità ultrastrutturale per l'analisi quantitativa

Mappatura dell'area di interesse
1. Scegli un'area di interesse (ad esempio, ippocampo o cervelletto) e localizza l'ar....

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Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
Microscopio ottico Basic DM E	Leica	-	4x (N.A. 0,1 ∞/-), 10x (N.A. 0.A. 22 ∞/0.17), 40x (N.A. 0.65 ∞/0.17), 100x (N.A. 1.25 ∞/0.17) obiettivi
Pinze emostatiche per zanzare (12.5cm, curve)	FST	13010-12	<
Ted Pella	1GC200
Lame di rasoio	Schick	87-10489
Technovit 4004 due componenti colla<		Dispositivo a lama di rasoio vibrante sottile	Krup	-	con lame
Toluidine blue	Sigma-Aldrich	89640
Microscopio elettronico a trasmissione C20	Phillips	-	fino a 200 kV
Ultracut E	Reichert-Jung	-	ultramicrotome
Araldite	CIBA-GEIGY	23857.9	resina per l'inclusione di tessuti
Osmio (VIII)-ossidato	Degussa	73219

td style='height:15.75pt;width:189pt;'>Griglie di nichel, 200 meshtd style='width:179pt;'>Kulzer sottili Szabo

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