Neuroimaging

Fonte: Provenzano, G., et al. Visualizzazione immunoistochimica dell'attività dei neuroni ippocampali dopo l'apprendimento spaziale in un modello murino di disturbi dello sviluppo neurologico. J. Vis. Exp. (2015)Questo video dimostra l'imaging immunoistochimico per visualizzare l'attivazione neuronale dell'ippocampo. Le sezioni cerebrali colorate rivelano regioni più scure al microscopio a campo chiaro, indicando neuroni attivati.

Fonte: Galenchik-Chan, A., {et al. Risonanza magnetica funzionale (fMRI) della corteccia visiva con stimolazione retinotopica ad ampia visuale. J. Vis. Exp. (2023). Il video mostra la risonanza magnetica funzionale (fMRI) della corteccia visiva per mappare l'attività in base ai livelli di ossigenazione del sangue. Le immagini MRI strutturali vengono acquisite come riferimenti anatomici, seguite da scansioni fMRI. Gli stimoli visivi vengono visualizzati per attivare i neuroni retinotopici nella...

Fonte: Wang, J., et al. Visualizzazione dell'innervazione immunoreattiva del peptide correlato al gene della calcitonina della dura madre cranica di ratto con immunofluorescenza e tracciamento neurale. J. Vis. Exp. (2021). Questo video mostra un metodo per tracciare le origini dei neuroni sensoriali nella dura madre utilizzando la microscopia a fluorescenza. Un tracciante retrogrado viene introdotto nella dura madre esposta di un ratto anestetizzato. Il tracciante viene assorbito dagli assoni...

Fonte: Sabado, V., et al., Nagoshi, E. Imaging in tempo reale a fluorescenza con risoluzione a cellula singola di �Orologi circadiani nel cervello larvale Cultura. J. Vis. Exp. (2018). Questo video mostra la procedura per incorporare il cervello Drosophila in una matrice di fibrina, seguita da imaging a fluorescenza time-lapse di neuroni dell'orologio circadiano per analizzare l'attività ritmica sincronizzata con i cicli luce/buio.

Fonte: Bancroft, E. A., et al. Quantificare spontaneamente Ca2+ flussi e i loro effetti a valle nei neuroni primari del mesencefalo del topo. J. Vis. Exp. (2020) Questo video dimostra la visualizzazione in tempo reale dell'afflusso di calcio nei neuroni mesencefalici ventrali derivati da embrioni di topo. Utilizzando un vettore virale per esprimere un indicatore di calcio, i neuroni vengono ripresi al microscopio confocale per tracciare i cambiamenti nell'intensità della fluorescenza durante...

Fonte: Calvo-Rodríguez, et al. Imaging a fluorescenza e bioluminescenza di Ca2+ in neuroni ippocampali invecchiati. J. Vis. Exp. (2015). Questo video dimostra l'uso dell'imaging a fluorescenza per misurare i livelli di calcio citosolico in colture ippocampali di ratto a breve e lungo termine. Confrontando i neuroni giovani e quelli invecchiati, evidenzia come l'aumento della densità dei canali del calcio voltaggio-dipendente di tipo L e l'attivazione prolungata nei neuroni anziani provochino...

Fonte: Reindl, V., et al. Conduzione di esperimenti di iperscansione con spettroscopia funzionale nel vicino infrarosso. J. Vis. Exp. (2019) Questo video dimostra l'uso della spettroscopia funzionale nel vicino infrarosso (fNIRS) per misurare l'attività cerebrale durante le interazioni sociali. I partecipanti si impegnano in un compito coordinato che aumenta l'attività nella corteccia prefrontale, una regione critica per il comportamento sociale, mentre il sistema rileva i cambiamenti...

Inizia con un paziente con diagnosi di aneurismi cerebrali, una condizione in cui i vasi sanguigni nel cervello si gonfiano e si riempiono di sangue. Fissare la testa del paziente all'interno della bobina di testa di una macchina per la risonanza magnetica. Avviare l'imaging. Il sistema genera un forte campo magnetico, allineando i protoni nel tessuto cerebrale lungo la sua direzione. Avviare l'eco a gradiente rapido preparato per la magnetizzazione o la sequenza MPRAGE applicando un impulso a...

Una lesione cerebrale traumatica, o TBI, compromette il flusso sanguigno nelle regioni colpite e interrompe l'attività dei neuroni dopaminergici.Per studiare le interruzioni associate al trauma cranico, iniziare iniettando per via endovenosa un tracciante radioattivo lipofilo in un paziente.Il tracciante viaggia attraverso i vasi cerebrali e si diffonde nelle cellule del tessuto cerebrale corticale e sottocorticale.Eseguire la tomografia computerizzata a emissione di fotoni singoli, o SPECT,...

Source: Wiegreffe, C., et. al., Time-lapse Imaging confocale di neuroni in migrazione in una coltura di fette organotipiche del cervello embrionale di topo utilizzando In Utero Elettroporazione. J. Vis. Exp. (2017) Questo video mostra la microscopia confocale time-lapse per osservare la migrazione radiale del neurone corticale dalla zona subventricolare alla placca corticale tramite scaffold gliali radiali in fette di cervello embrionale di topo trasdotte.

Posizionare la testa di un partecipante umano all'interno della bobina della testa di un sistema di risonanza magnetica funzionale, o fMRI. Utilizzare l'occupazione dello spazio vascolare o VASO, una tecnica per misurare i cambiamenti nel volume del sangue cerebrale, o CBV, il volume del sangue all'interno del cervello. Inizia applicando un impulso di recupero dall'inversione per sopprimere i segnali dal sangue, consentendo di rilevare solo i segnali dal tessuto circostante all'interno della...

Fonte: Schott, J. T., {et al. Preparazione di colture progenitrici di oligodendrociti di ratto e quantificazione dell'oligodendrogenesi mediante scansione a fluorescenza a doppio infrarosso. J. Vis. Exp. (2016). Questo video dimostra l'uso dell'imaging a doppia fluorescenza per valutare la differenziazione degli oligodendrociti da cellule precursori (OPC) isolate dal cervello di un cucciolo di ratto. Il processo include il fissaggio delle cellule, l'etichettatura di marcatori specifici con...

Fonte: Upputuri, P. K., et al. Un sistema di tomografia fotoacustica compatto ad alte prestazioni per l'imaging cerebrale di piccoli animali In vivo. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra un protocollo per l'imaging non invasivo in vivo del cervello di ratto utilizzando la tomografia fotoacustica, mostrando la preparazione, la configurazione del sistema di imaging e l'acquisizione dei dati per ricostruire immagini cerebrali 2D per la visualizzazione delle strutture vascolari e della salute...

Fonte: Shimojo, H., et al. Imaging in bioluminescenza in tempo reale delle dinamiche di segnalazione Notch durante la neurogenesi murina. J. Vis. Exp. (2019)In questo video, le colture di fette corticali di embrioni di topo transgenico vengono utilizzate per monitorare l'espressione genica attraverso l'imaging tridimensionale. Le immagini a bioluminescenza, fluorescenza e campo chiaro vengono utilizzate per visualizzare l'espressione genica in tempo reale durante la differenziazione neuronale...

Fonte: Jamadar, S. et. al. Somministrazione di radiotraccianti per la tomografia a emissione di positroni ad alta risoluzione temporale del cervello umano: applicazione alla FDG-fPET. J. Vis. Exp. (2019)Questo video mostra la quantificazione del metabolismo del glucosio cerebrale utilizzando la tomografia a emissione di positroni (PET). Durante la scansione, il partecipante viene infuso con il tracciante F-18 fluorodesossiglucosio (FDG). L'FDG si accumula nei neuroni attivi ed emette positroni...

Fonte: Delalande, J., et.al. Doppia marcatura delle cellule della cresta neurale e dei vasi sanguigni all'interno di embrioni di pollo mediante innesto di tubo neuraleGFP di pollo e iniezione di colorante diI di carbocianina. J. Vis. Exp. (2015)Questo video mostra il trapianto di un tubo neurale di un donatore marcato con GFP da un embrione di pollo transgenico compatibile allo stadio corrispondente in un embrione ricevente a livello di somiti da uno a sette, seguito da una marcatura vascolare...

Fonte: Zheng, W. et. al., Risonanza magnetica del tensore di diffusione nella compressione cronica del midollo spinale. J. Vis. Exp. (2019)Questo video mostra l'imaging del tensore di diffusione nella valutazione della compressione cronica del midollo spinale. Analizzando i modelli di diffusione dell'acqua, l'anisotropia frazionaria e i valori del coefficiente di diffusione apparente, i risultati rivelano il danno assonale nelle regioni compresse. I risultati forniscono informazioni critiche...

Fonte: Fowler, B. E., et al. Imaging in vivo del calcio delle risposte dei neuroni del ganglio genicolato di topo agli stimoli gustativi. J. Vis. Exp. (2021) Questo video mostra un protocollo per la somministrazione di astanti al ganglio genicolato esposto chirurgicamente in un topo anestetizzato e l'utilizzo della fluorescenza GCaMP con microscopia epifluorescente per visualizzare le risposte neuronali in tempo reale, aiutando gli studi sull'elaborazione periferica del segnale del gusto.

Fonte: Blanc, J., et al. Spettroscopia di risonanza magnetica funzionale a 7 t nella corteccia del barile di ratto durante l'attivazione dei baffi. J. Vis. Exp. (2019)Questo video mostra il metodo di analisi dei cambiamenti metabolici nella corteccia del barile di ratto utilizzando la spettroscopia di risonanza magnetica funzionale durante la stimolazione dei baffi. Gli spettri dei metaboliti al basale vengono confrontati con gli spettri stimolati per rilevare l'aumento del lattato nella...

Fonte: Villarreal, S., et. al., Misurazione dell'endocitosi delle vescicole sinaptiche nei neuroni ippocampali in coltura. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra l'analisi dell'endocitosi delle vescicole sinaptiche nei neuroni ippocampali in coltura attraverso la marcatura della perossidasi di rafano e la microscopia elettronica.

Fonte: Becker-Kojić, Z. A., et. al., Generazione libera da OGM di cellule neuronali derivate dal sangue. J. Vis. Exp. (2021)Il video mostra un protocollo per la preparazione di cellule neurali derivate da cellule del sangue periferico riprogrammate per la microscopia a fluorescenza, mostrando tipi cellulari distinti e fasi di sviluppo attraverso l'imaging a immunofluorescenza.

Fonte: McLeod, F., et al. Valutazione della densità delle sinapsi nelle fette di cervello di roditori ippocampali. J. Vis. Exp. (2017). Questo video mostra un metodo per visualizzare i marcatori sinaptici in fette di cervello ippocampale utilizzando l'analisi di immunofluorescenza confocale. Le fette sono immunocolorate con anticorpi primari mirati a marcatori presinaptici e postsinaptici, seguiti da anticorpi secondari coniugati con fluorofori. I marcatori marcati vengono quindi visualizzati...

Fonte: Lerchundi, R., et. al. Imaging dell'ATP intracellulare in fette di tessuto organotipico del cervello di topo utilizzando il sensore basato su FRET ATeam1.03YEMK. J. Vis. Exp. (2019)Questo video dimostra l'uso di sensori basati su FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) per misurare i livelli intracellulari di ATP in fette organotipiche di ippocampo di topo, consentendo la visualizzazione in tempo reale delle dinamiche dell'ATP nei neuroni e negli astrociti in condizioni...

Fonte: Espinoza, R., et al. Imaging di scattering Raman stimolato a due colori in tempo reale del cervello di topo per la diagnosi dei tessuti. J. Vis. Exp. (2022). Il video mostra l'imaging a due colori di scattering Raman stimolato (SRS) di sezioni di tessuto cerebrale di topo. Due raggi laser sincronizzati sono diretti sulla sezione di tessuto per eccitare le vibrazioni molecolari, determinando un cambiamento di intensità relativa nei raggi. I lipidi e le proteine nel tessuto vengono...

Fonte: Olesen, M. V., et al. La tecnica del frazionamento ottico per stimare il numero di cellule in un modello di ratto di terapia elettroconvulsivante. J. Vis. Exp. (2017). Il video mostra la tecnica per quantificare i neuroni appena generati nel tessuto cerebrale. Fette di tessuto ippocampale contenenti neuroni marcati con Bromodeossiuridina (BrdU) sono state colorate utilizzando l'immunoistochimica e successivamente quantificate attraverso lo spessore del tessuto utilizzando la tecnica del...

Fonte: Guan, W., et. al. Visualizza Drosophila assoni del motoneurone della gamba attraverso la cuticola adulta. J. Vis. Exp. (2018) Questo video mostra l'imaging di Drosophila con motoneuroni fluorescenti verdi che esprimono proteine utilizzando la microscopia confocale. Un laser e due rivelatori catturano la GFP e l'autofluorescenza delle cuticole. Le immagini vengono elaborate dividendo i canali, sottraendo l'autofluorescenza e fondendole in un'immagine composita colorata per visualizzare...

<p style='altezza-linea:1.2;margine-fondo:0pt;margine-superiore:0pt;' dir='ltr'>Fonte: Lauer, S. M., et al. Visualizzazione dei moduli corticali in cortecce di mammiferi appiattite. J. Vis. Exp. <span style='-webkit-text-decoration-skip:none;font-family:Arial,sans-serif;font-size:12pt;font-style:normal;font-variant:normal;font-weight:400;text-decoration-skip-ink:none;vertical-align:baseline;white-space:pre-wrap;'>(2018) Questo video mostra un metodo per visualizzare i moduli...

Fonte: Hidmark, A. S., et al. Analisi delle cellule immunitarie in singoli nervi sciatici e ganglio della radice dorsale da un singolo topo utilizzando la citometria a flusso. J. Vis. Exp.{{TAG_ 27}} (2017). Questo video dimostra l'uso della citometria a flusso per analizzare le cellule immunitarie nei nervi sciatici di topo e nei gangli delle radici dorsali (DRG). Il processo prevede la marcatura delle cellule immunitarie con anticorpi marcati con fluorofori e biotina, la stabilizzazione e la...

Source: Morsch, M., et. al., Triggering Cell Stress and Death utilizzando la microscopia confocale laser UV convenzionale. J. Vis. Exp. (2017) In questo video, esploriamo la tecnica dell'ablazione laser UV ad alta intensità per indirizzare e studiare con precisione i singoli neuroni nel pesce zebra transgenico. Dimostriamo come preparare, immobilizzare e visualizzare le risposte neuronali, evidenziando le dinamiche cellulari della lesione e del recupero.

Fonte: Lunelli, L., et. al. Scrutare i polisomi cerebrali con la microscopia a forza atomica. J. Vis. Exp.(2016). Questo video mostra l'imaging dei polisomi utilizzando la microscopia a forza atomica. Un foglio di mica rivestito di ioni nichel ancora l'RNA con i ribosomi attaccati. Il campione viene lavato, asciugato e montato sul tavolino del microscopio. La punta a sbalzo scansiona la superficie del campione, registrando le deflessioni laser per mappare la topologia. Il software viene...

Source: Kimmelmann-Shultz, B., et. Utilizzo della fluorescenza nel vicino infrarosso e della scansione ad alta risoluzione per misurare l'espressione delle proteine nel cervello dei roditori. J. Vis. Exp. (2019) Questo video mostra una fluorescenza nel vicino infrarosso e un metodo di scansione ad alta risoluzione per misurare l'espressione proteica nel cervello del roditore.

Fonte: Hamid, H. S., et al. Imaging tridimensionale e analisi dei mitocondri all'interno delle fibre nervose intraepidermiche umane. J. Vis. Exp. (2017) Questo video mostra il metodo per visualizzare i mitocondri nervo-specifici utilizzando l'imaging tridimensionale. Delinea il processo di acquisizione di scansioni sequenziali di fibre nervose intraepidermiche pre-marcate e la generazione di immagini di superficie 3D per isolare e visualizzare i mitocondri in relazione alle strutture nervose.

Fonte: Mukherjee, K., et. al. Analisi dei mitocondri cerebrali utilizzando la microscopia elettronica a scansione seriale a scansione a blocchi. J. Vis. Exp. (2016)Questo video dimostra la preparazione, imaging e analisi del tessuto cerebrale di topo utilizzando un microscopio elettronico a scansione seriale a blocchi (SBFSEM) per visualizzare l'ultrastruttura mitocondriale, consentendo una mappatura precisa della loro morfologia e distribuzione spaziale nei compartimenti neuronali assonali e...

Fonte: Laboissonniere, et. al. RNA-seq a singola cellula di sottoinsiemi definiti di cellule gangliari retiniche. J. Vis. Exp. (2017). Questo video mostra una tecnica di tracciamento fluorescente per identificare i sottotipi di cellule gangliari retiniche (RGC) in una retina di topo transgenico. Il processo prevede il fissaggio della retina isolata in una camera di registrazione, il mantenimento della vitalità cellulare con perfusione ossigenata e il targeting di RGC marcate in fluorescenza...

Prendi una sezione fissa di tessuto cerebrale corticale di topo che mostra assoni e dendriti neuronali. I dendriti possiedono sporgenze, note come spine dendritiche, che formano sinapsi con gli assoni. Incubare il tessuto con osmio-ferrocianuro, che si lega ai lipidi, seguito da un'altra applicazione di osmio, che migliora il contrasto strutturale per l'imaging. Colorare con un composto di metalli pesanti che si lega alle macromolecole e migliora il contrasto. Disidratare utilizzando...

Source: Mizuno, H., et al. In Vivo Imaging a due fotoni dei neuroni corticali nei topi neonatali. J. Vis. Exp. (2018)Questo video mostra la microscopia a due fotoni utilizzata per visualizzare i neuroni nel cervello di un cucciolo di topo transgenico anestetizzato. Il laser a due fotoni consente immagini più approfondite con un'elevata risoluzione spaziale e una dispersione della luce minima, consentendo l'acquisizione dettagliata della morfologia neuronale, comprese le proiezioni dendritiche.

<p style='altezza-linea:1.38;margine-fondo:0pt;margine-superiore:0pt;' dir='ltr'>Fonte: Lark, A. R., et. al., approccio di imaging cerebrale funzionale in vivo basato sull'indicatore di calcio bioluminescente GFP-aequorina. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra l'imaging in tempo reale della dinamica del calcio utilizzando la bioluminescenza fluorescente della proteina-equorina verde in Drosophila'sstrutture cerebrali profonde.

Fonte: Muto, A., et al. Ablazione di una popolazione neuronale utilizzando un laser a due fotoni e sua valutazione utilizzando l'imaging del calcio e la registrazione comportamentale nelle larve di zebrafish. J. Vis. Exp. (2018) In questo video, Viene dimostrata una procedura di ablazione laser a due fotoni, che consente la distruzione selettiva dei neuroni fluorescenti in larve di zebrafish immobilizzate con agarosio. L'imaging ad alta risoluzione prima e dopo la procedura conferma...

Fonte: Winkle, C. C., et al. Utilizzo di metodologie combinate per definire il ruolo del rilascio della membrana plasmatica durante la ramificazione degli assoni e la morfogenesi neuronale. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra una tecnica di imaging dal vivo che utilizza la microscopia a contrasto interferenziale differenziale (DIC) per osservare la ramificazione assonale in tempo reale nei neuroni corticali. I video time-lapse catturano gli effetti del trattamento con netrina-1, una molecola...

Fonte: Zhilyakov, N. V. et. al., Registrazione dei transitori di calcio nella giunzione neuromuscolare del topo con alta risoluzione temporale utilizzando la microscopia confocale. J. Vis. Exp. (2021)Questo video mostra la tecnica di imaging per la registrazione di transitori veloci di calcio alle terminazioni nervose utilizzando la microscopia confocale. Stimolando il nervo e catturando i cambiamenti di fluorescenza dai coloranti leganti il calcio, visualizza l'afflusso dinamico di calcio e la...

Fonte: Ting, C., et al., Analisi della morfologia dendritica in colonne e strati. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra la procedura di preparazione di un cervello di Drosophila, l'acquisizione di pile di immagini orizzontali e frontali di dendriti midollari marcati con GFP sotto un microscopio confocale e la creazione di una ricostruzione 3D per analizzare la loro morfologia attraverso strati e colonne.

Fonte: Lacin, E., et al. Costruzione di reporter ingegnerizzati fluorescenti per neurotrasmettitori cellulari (CNiFER) per il rilevamento ottico di neurotrasmettitori in vivo. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra una tecnica per l'imaging del rilascio di neurotrasmettitori in vivo utilizzando reporter ingegnerizzati fluorescenti di neurotrasmettitori basati su cellule (CNiFER), cellule reporter specializzate pre-iniettate nella corteccia del topo. Posizionato sotto un microscopio a due...

Fonte: Doser, R., et al. Imaging subcellulare della manipolazione neuronale del calcio in vivo. J. Vis. Exp. (2023)Questo video mostra l'imaging in vivo del flusso di calcio subcellulare nei neuroni del cordone nervoso ventrale dei ceppi transgenici di Caenorhabditis elegans. Vengono impiegati due indicatori di calcio distinti: un indicatore citoplasmatico in un ceppo e un indicatore mitocondriale in un altro. I neuroni vengono osservati al microscopio a fluorescenza per monitorare in tempo...

Fonte: Gouder, et. al. Quantificazione tridimensionale di spine dendritiche da neuroni piramidali derivati da cellule staminali pluripotenti indotte umane. J. Vis. Exp. (2015).Questo video mostra l'imaging e l'analisi delle spine dendritiche in neuroni piramidali trasdotti e immunomarcati utilizzando la microscopia confocale. Il rumore di fondo è ridotto e i dendriti vengono tracciati stimandone il diametro e la lunghezza. La segmentazione automatizzata della colonna vertebrale comporta...

Fonte: Creighton, B. A., et al. Visualizzazione e analisi del trasporto intracellulare di organelli e altri carichi negli astrociti. J. Vis. Exp. (2019)Questo video mostra la visualizzazione del trasporto intracellulare di merci in astrociti in coltura utilizzando una sonda acidotropica fluorescente che marca selettivamente le vescicole endolisosomiali acide. L'imaging time-lapse e l'acquisizione Z-stack con un microscopio confocale consentono il tracciamento del carico marcato in fluorescenza...

Fonte: Katsalifis, A., et al. Imaging dal vivo dello stato redox del glutatione mitocondriale nei neuroni primari utilizzando un indicatore raziometrico. J. Vis. Exp. (2021)Questo video mostra l'imaging dello stato redox mitocondriale nei neuroni primari utilizzando un indicatore fluorescente raziometrico. Applicando due lunghezze d'onda di eccitazione al microscopio a fluorescenza, viene misurato il rapporto di intensità della fluorescenza per valutare l'ossidazione mitocondriale. Il...

Fonte: Bagheri, M., et. al. Protocollo per l'Analisi Morfometrica Confocale Tridimensionale degli Astrociti. J. Vis. Exp. (2015).Questo video mostra l'imaging di astrociti marcati in fluorescenza in una sezione cerebrale di topo utilizzando un microscopio confocale. La sezione del cervello viene posizionata sotto la lente dell'obiettivo appropriata e vengono selezionati i fluorofori e i filtri adatti. Dopo aver ottimizzato automaticamente l'esposizione, vengono definiti i parametri di scansione...

Fonte: Weber, R. Z., et al., Trapianto intracerebrale e monitoraggio della bioluminescenza in vivo delle cellule progenitrici neurali umane nel cervello del topo. J. Vis. Exp. (2022)Questo video dimostra il metodo per l'imaging in bioluminescenza in vivo di cellule progenitrici neurali umane geneticamente modificate iniettate nel cervello di un topo. Il processo prevede l'iniezione di luciferina, la preparazione dell'imaging e il rilevamento di segnali bioluminescenti dalle cellule trapiantate...

Fonte: Bannai, H., et. al., Dissezione dei segnali locali di Ca2+ in cellule coltivate mediante indicatori di Ca2+ mirati alla membrana. J. Vis. Exp. (2019)Il video mostra l'imaging a fluorescenza per osservare la dinamica spontanea del calcio specifica del compartimento negli astrociti, monitorando in sequenza le proteine sensibili al calcio localizzate sulla membrana plasmatica e sul reticolo endoplasmatico.

Fonte: Marinello, M., et al. Caratterizzazione delle giunzioni neuromuscolari nei topi mediante microscopia combinata confocale e a super-risoluzione. J. Vis. Exp. (2021)Questo video mostra la preparazione, l'immunocolorazione e l'imaging delle giunzioni neuromuscolari nel tessuto muscolare di ratto utilizzando la microscopia confocale e a super-risoluzione per visualizzare e analizzare le strutture presinaptiche e postsinaptiche.

Fonte: Chiu, S., et al. Risonanza magnetica a contrasto di fase nell'arteria carotide comune di ratto. J. Vis. Exp. (2018). Questo video mostra la risonanza magnetica a contrasto di fase (PC-MRI) per misurare il flusso sanguigno nell'arteria carotide comune di un ratto. Dopo aver assicurato un ratto anestetizzato sul letto della risonanza magnetica e aver assicurato parametri fisiologici stabili, l'arteria carotide comune viene scansionata per acquisire immagini a intervalli definiti. Il flusso...

Fonte: Hage, B. D. et. Al., Ecografia Doppler transcranica funzionale per il monitoraggio del flusso sanguigno cerebrale. J. Exp. (2021) Questo video dimostra l'uso dell'ecografia Doppler come strumento di imaging per misurare la velocità del flusso sanguigno cerebrale, o CBFV in tempo reale. Evidenzia come i cambiamenti di frequenza nell'arteria cerebrale media durante attività come trattenere il respiro rivelino cambiamenti nel CBFV, offrendo approfondimenti sull'attività cerebrale e sulle...

Posizionare la testa del paziente all'interno della bobina a radiofrequenza, o RF, di una macchina per risonanza magnetica, o MRI. Avviare l'angiografia a risonanza magnetica a tempo di volo o TOF MRA, una tecnica non invasiva per la visualizzazione dei vasi sanguigni. Selezionare una fetta di tessuto per l'imaging per visualizzare arterie e vene. Applicare un impulso RF per eccitare i protoni all'interno della fetta di imaging selezionata. Questi protoni rilasciano energia, che viene rilevata...

Gli spazi perivascolari (PVS) sono spazi pieni di liquido attorno ai vasi sanguigni cerebrali coinvolti nel drenaggio dei liquidi. Per esaminare le alterazioni della PVS durante un ictus di un piccolo vaso, eseguire la risonanza magnetica (MRI) della regione dei gangli della base nel cervello del paziente. Il protocollo di imaging include le sequenze FLAIR (Fast Spin Echo e FLAIR) pesate in T2. L'imaging pesato in T2 migliora il contrasto tra la PVS piena di liquido cerebrospinale (CSF) e il...

Fonte: Nishimura, C. et al. Quantificazione dell'architettura vascolare cerebrale utilizzando la microscopia a due fotoni in un modello murino di neuroinfiammazione indotta dall'HIV. J. Vis. Exp. (2016). Questo video dimostra la visualizzazione in vivo dei capillari corticali nel cervello del topo utilizzando la microscopia a due fotoni. Delinea i passaggi per l'iniezione di un colorante fluorescente in un topo anestetizzato con una finestra corticale a cranio sottile, la preparazione della...

Posizionare un paziente umano con stenosi carotidea interna, una condizione caratterizzata da restringimento dell'arteria carotide interna, sul tavolo di imaging per l'angiografia a sottrazione digitale (DSA). Inserire un angiocatetere nell'arteria carotide comune a livello della quarta vertebra cervicale. Acquisire un'immagine a raggi X pre-contrasto per registrare strutture di fondo come ossa e tessuti molli utilizzando l'irradiazione a raggi X. Somministrare un mezzo di contrasto a base di...

Inizia con un paziente umano con vasculite cerebrale, che causa infiammazione e aumento della permeabilità dei vasi sanguigni nel cervello. Posizionare la testa del paziente all'interno della bobina a radiofrequenza, o RF, di una macchina per risonanza magnetica, o MRI. Avviare l'angiografia a risonanza magnetica, o MRA, che utilizza impulsi RF per visualizzare il flusso sanguigno. I protoni nel sangue che scorre generano segnali forti, facendo apparire i vasi sanguigni luminosi, mentre i...

Fonte: Tan, Z., et al., Costruzione e applicazione di atlante del flusso sanguigno cerebrale basato sulla regione funzionale cerebrale utilizzando la risonanza magnetica-marcatura di spin arterioso. J. Vis. Exp. (2024). Questo video mostra il metodo per costruire un atlante del flusso sanguigno cerebrale integrando la risonanza magnetica o i dati di marcatura della risonanza magnetica con le regioni segmentate del cervello, visualizzando i modelli di flusso sanguigno e quantificando i livelli...

Fonte: Kim, D., et. al. Imaging fluorescente nel vicino infrarosso combinato e tomografia microcomputerizzata per la visualizzazione diretta dei tromboemboli cerebrali. J. Vis. Exp. (2016)Questo video dimostra la visualizzazione del trombo cerebrale nei topi utilizzando l'imaging con tomografia micro-computerizzata (micro-CT). Un modello murino di trombo cerebrale viene iniettato con nanoparticelle d'oro mirate alla fibrina che fungono da agente di contrasto. Il mouse viene posizionato sul...

Fonte: Giustetto, P., et. al., Ecografia parenchimale non invasiva, vascolare e metabolica ad alta frequenza e imaging cerebrale profondo fotoacustico del ratto. J. Vis. Exp. (2015)In questo video, dimostriamo l'uso degli ultrasuoni ad alta frequenza e dell'imaging fotoacustico per studiare la vascolarizzazione e il contenuto di emoglobina nel cervello di ratto. Questo metodo fornisce informazioni dettagliate sulla perfusione cerebrale e sull'ossigenazione del sangue, consentendo un'analisi non...

Fonte: Kalva, S. K., et al., Tomografia fotoacustica da tavolo basata su diodi laser pulsati per il monitoraggio del wash-in e del wash-out del colorante nella vascolarizzazione corticale di ratto. J. Vis. Exp. (2019)Questo video dimostra la procedura per l'utilizzo dell'imaging fotoacustico per osservare i cambiamenti nei vasi corticali di un ratto anestetizzato. Il processo include l'imaging di base, l'iniezione del colorante e l'analisi dell'assorbimento e della clearance del colorante...

Fonte: Menezes Forti, R. et al. Monitoraggio in tempo reale di pazienti neurocritici con spettroscopie ottiche diffuse. J. Vis. Exp. (2020)Questo video mostra l'uso della spettroscopia di correlazione diffusa (MDD) per misurare il flusso sanguigno cerebrale negli esseri umani. Delinea i passaggi per la preparazione del sistema, la calibrazione della sonda, il posizionamento sulla fronte del partecipante, l'acquisizione di dati di luce diffusa e l'analisi delle fluttuazioni di intensità per...

Fonte: Kim, D. E., et al. Imaging fluorescente nel vicino infrarosso combinato e tomografia microcomputerizzata per la visualizzazione diretta dei tromboemboli cerebrali. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra l'imaging fluorescente nel vicino infrarosso (NIRF) per visualizzare i trombi nel tessuto cerebrale asportato marcato con una sonda specifica per la fibrina. La luce nel vicino infrarosso eccita la sonda, provocando la fluorescenza del trombo, consentendo la visualizzazione dei trombi ad...

Fonte: Villaseñor, R e Collin. L. Imaging confocale ad alta risoluzione della barriera emato-encefalica: imaging, ricostruzione 3D e quantificazione della transcitosi. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra l'imaging 3D ad alta risoluzione della barriera emato-encefalica (BBB) utilizzando la microscopia confocale, mostrando sezioni cerebrali di topo colorate con anticorpi per analizzare i componenti della BBB e le strutture intracellulari, applicabili per lo studio dell'omeostasi cerebrale,...

Fonte: Sweeney, A. M., et al. Imaging in vivo del trasporto del liquido cerebrospinale attraverso il cranio di topo intatto mediante macroscopia a fluorescenza. (2019)Questo video dimostra il processo di visualizzazione del flusso del liquido cerebrospinale (CSF) nel cervello di un topo utilizzando l'imaging a fluorescenza. Un tracciante fluorescente viene iniettato nella cisterna magna (CM), consentendo di tracciare il suo movimento con il liquido cerebrospinale attraverso gli spazi...

Fonte: Breid, S., et. al. Imaging a bioluminescenza della neuroinfiammazione in topi transgenici dopo inoculazione periferica di fibrille di alfa-sinucleina. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra l'imaging a bioluminescenza della neuroinfiammazione nei topi transgenici, mostrando le reazioni luciferasi-luciferina negli astrociti attivati. Il protocollo consente la quantificazione non invasiva dell'attivazione astrocitica, aiutando gli studi sull'infiammazione del SNC e sull'efficacia...

Fonte: Nyström, S., et al., Imaging di tessuti amiloidi colorati con oligotiofeni coniugati luminescenti mediante microscopia confocale iperspettrale e imaging del tempo di vita della fluorescenza. J. Vis. Exp. (2017). Questo video mostra l'analisi delle strutture amiloidi con la microscopia a fluorescenza o FLIM, utilizzando il colorante hFTAA per rivelare nuclei compatti come blu/verde e periferie instabili come rosso/giallo in immagini codificate a colori, riflettendo l'organizzazione...

Source: Bosco, A., et al. Dinamiche in vivo dell'attivazione microgliale retinica durante la neurodegenerazione: imaging oftalmoscopico confocale e morfometria cellulare nel glaucoma di topo. J. Vis. Exp. (2015) Questo video dimostra l'imaging in vivo della microglia retinica in un modello murino di glaucoma. Un topo transgenico con microglia retinica fluorescente che esprime proteine è posizionato sotto un oftalmoscopio. L'illuminazione a infrarossi viene utilizzata per localizzare la testa...

Fonte: Maiti, P. et. al.,. {{}}{{}}J. vis. Exp.{{}}{{}} (2019)Questo video mostra la procedura di imaging delle placche di beta-amiloide in sezioni di tessuto cerebrale utilizzando l'immunomarcatura e la colorazione con curcumina. L'immunomarcatura fornisce la specificità per l'amiloide-beta, mentre la curcumina lega selettivamente le fibrille ricche di fogli β, migliorando la visualizzazione. La co-localizzazione della fluorescenza rossa e verde conferma la presenza di placche.

Posizionare la testa di un paziente con sclerosi multipla all'interno della bobina a radiofrequenza o RF di una macchina per la risonanza magnetica. Iniziare il recupero dell'inversione attenuata dal fluido o l'imaging FLAIR. Selezionare una fetta di cervello contenente lesioni vicino alle aree ricche di liquido cerebrospinale. Il sistema genera un forte campo magnetico, allineando i protoni nel tessuto cerebrale sano e lesionato e nel liquido cerebrospinale lungo la sua direzione, creando una...

Fonte: Zaeck, L., et al. Imaging 3D ad alta risoluzione dell'infezione da virus della rabbia in tessuto cerebrale eliminato con solvente. J. Vis. Exp. (2019). Questo video mostra il processo di preparazione e imaging del tessuto cerebrale di topo infettato dal virus della rabbia (RABV) per valutare la progressione dell'infezione. Descrive i passaggi chiave, tra cui la colorazione dei tessuti con marcatori fluorescenti, la disidratazione, la pulizia e il montaggio per la microscopia a scansione...

Fonte: Bisht, K., et. al. Microscopia correlativa alla luce e agli elettroni per studiare le interazioni microgliali con placche di β-amiloide. J. Vis. Exp. (2016) Questo video mostra la visualizzazione e la mappatura delle placche amiloidi marcate con Metossi-X04 nel cervello di topo con malattia di Alzheimer sezioni che utilizzano la fluorescenza e la microscopia a campo chiaro, consentendo una correlazione precisa delle placche con le strutture anatomiche per lo studio della patologia di...

Fonte: Ouyang, Y., et al. Imaging simultaneo PET/MRI durante l'ipossia-ischemia cerebrale del topo. J. Vis. Exp. (2015)Questo video dimostra una tecnica per valutare il danno da ipossia cerebrale tramite tomografia a emissione di positroni (PET) e risonanza magnetica (MRI) simultanee. Un topo anestetizzato viene sottoposto a legatura dell'arteria carotide comune (CCA), riducendo il flusso sanguigno a un emisfero cerebrale e predisponendolo a lesioni indotte dall'ipossia. La PET e la risonanza...

Fonte: Krishnamurthy, K. et al. Misurazione fluorescente in tempo reale delle funzioni sinaptiche nei modelli di sclerosi laterale amiotrofica. J. Vis. Exp. (2021)Questo video mostra l'imaging del calcio in tempo reale per monitorare l'attività sinaptica nei neuroni mutanti della SLA che esprimono un biosensore di calcio geneticamente codificato. Delinea i passaggi per preparare i neuroni per l'imaging, stimolare la dinamica del calcio e registrare la fluorescenza per misurare i cambiamenti in...

Fonte: Ciraku, L., et. al. Un modello di fetta cerebrale ex vivo per studiare e mirare alla crescita del tumore metastatico cerebrale del cancro al seno. J. Vis. Exp. (2021). Questo video mostra l'imaging di cellule tumorali che esprimono luciferasi in una fetta di cervello di topo organotipico. La luciferina viene aggiunta al terreno e la piastra viene posizionata all'interno della camera del sistema di imaging in vivo. I parametri per l'acquisizione delle immagini vengono regolati e vengono...

Fonte: Arango-Lievano, M. et. al., Imaging longitudinale in vivo della cerebrovascolarizzazione: rilevanza per le malattie del SNC. J. Vis. Exp. (2016)Questo video dimostra l'imaging in vivo a due fotoni per visualizzare placche amiloidi marcate in fluorescenza e vascolarizzazione cerebrale. La fluorescenza blu segna le placche, mentre la fluorescenza verde evidenzia i vasi sanguigni cerebrali. Una mappa 3D della regione di interesse e l'imaging a mosaico ad alta risoluzione rivelano...

Fonte: Clark, A.J., et al. Imaging a bioluminescenza di un modello animale immunocompetente per il glioblastoma. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra l'imaging a bioluminescenza per monitorare la progressione del glioblastoma in un modello murino immunocompetente, utilizzando cellule tumorali che esprimono luciferasi e luciferina per quantificare la crescita tumorale in modo non invasivo.

Fonte: Parker, J. J., et al. Un modello di coltura a fette organotipiche di glioblastoma umano per lo studio della migrazione delle cellule tumorali e degli effetti specifici del paziente dei farmaci anti-invasivi. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra l'imaging di fette di tessuto di glioblastoma che esprimono la proteina fluorescente verde (GFP) tramite microscopia confocale. Le immagini ad alta risoluzione vengono acquisite a intervalli coerenti per tracciare il movimento e la direzione...

Fonte: Lutz, D., et.al. Valutazione dei parametri di neuroplasticità ultrastrutturale dopo la trasduzione in utero del cervello di topo in via di sviluppo e del midollo spinale. J. Vis. Exp. (2019). Questo video mostra la preparazione e l'analisi al microscopio elettronico a trasmissione (TEM) di una sezione cerebrale di un cucciolo di topo. Il protocollo inizia con il tessuto fissato con tetrossido di osmio incorporato nella resina, seguito da un taglio preciso per isolare la regione di...

Fonte: Inal, M. A. et. al., Tracciamento retrogrado di Drosophila motoneuroni embrionali utilizzando coloranti fluorescenti lipofili. J. Vis. Exp. (2020)Questo video dimostra il metodo di marcatura retrograda dei motoneuroni Drosophila utilizzando coloranti lipofili. Il colorante entra nell'assone, viaggia retrogradamente ed etichetta i neuroni in verde, consentendo una visualizzazione dettagliata della loro morfologia e delle proiezioni al microscopio confocale.

Fonte: Flatz, W. H. {et al. In vivo Analisi morfometrica dei nervi cranici umani utilizzando la risonanza magnetica in Orecchie della malattia di Menière e orecchie con udito normale. J. Vis. Exp. (2018). Questo video dimostra l'uso della risonanza magnetica per analizzare la morfologia dei nervi cranici nelle orecchie di pazienti affetti da un disturbo cronico dell'orecchio interno. Descrive i passaggi per eseguire una risonanza magnetica ad alto campo magnetico sul paziente, ricostruire le...

Fonte: Braeckman, K., et. al. Imaging avanzato di diffusione nell'ippocampo di ratti con lieve lesione cerebrale traumatica. J. Vis. Exp. (2019)Questo video dimostra l'uso dell'imaging ponderato in diffusione per valutare cambiamenti microstrutturali in un ippocampo di ratto a seguito di lieve lesione cerebrale traumatica (mTBI), evidenziando la lesione assonale attraverso una precisa scansione MRI e analisi della diffusione.

Fonte: Papadelis, C.C., et al., Oscillazioni interictali ad alta frequenza rilevate con magnetoencefalografia ed elettroencefalografia simultanee come biomarcatore dell'epilessia pediatrica. J. Vis. Exp.{{TAG_ 27}} (2016). Questo video mostra il metodo di utilizzo delle registrazioni elettroencefalografiche (EEG) e magnetoencefalografiche (MEG) per identificare le scariche epilettiformi interictali (IED) e le oscillazioni ad alta frequenza (HFO) per localizzare le regioni inclini alle...

Fonte: Huang, Y. et. al., Monitoraggio morfologico e fisiologico longitudinale di sferoidi tumorali tridimensionali mediante tomografia a coerenza ottica. J. Vis. Exp. (2019)Questo video dimostra l'uso della coerenza ottica tomografia (OCT) per monitorare gli sferoidi tumorali in una piastra multipozzetto acquisendo immagini in sezione trasversale ad alta risoluzione. Analizzando i riflessi di luce dalle strutture cellulari, OCT costruisce modelli 3D per valutare caratteristiche morfologiche...

Fonte: Lahne, M., et.al. Coltura di espianti retinici di zebrafish transgenico adulto per l'imaging di cellule vive mediante microscopia multifotonica. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra l'imaging su cellule vive della migrazione nucleare gliale di Muller in espianti retinici di pesce zebra inclusi in agarosio a seguito di danni ai fotorecettori indotti dalla luce. Il fattore di necrosi tumorale-alfa (TNF-α) rilasciato dai fotorecettori danneggiati attiva le cellule gliali di Muller,...

Fonte: Bénard, M., et al. Imaging ex vivo della migrazione postnatale delle cellule dei granuli cerebellari mediante macroscopia confocale. J. Vis. Exp. (2015)Questo video mostra un metodo macroscopico confocale per tracciare la migrazione ex vivo di cellule granulari in fette cerebellari da cervelli di ratto postnatale.

Fonte: Daynac, M., et. al. Smistamento cellulare di cellule staminali neurali e progenitrici dalla zona subventricolare del topo adulto e imaging dal vivo delle loro dinamiche del ciclo cellulare. J. Vis. Exp. (2015)Questo video dimostra l'imaging time-lapse di cellule staminali neurali (NSC) da un cervello di topo transgenico utilizzando un microscopio a scansione laser confocale. Le NSC emettono fluorescenza rossa durante la fase G1 e non sono fluorescenti in altre fasi del ciclo cellulare.

Fonte: Williams, A. L., et al. Imaging time-lapse multi-fotone per visualizzare lo sviluppo in tempo reale: visualizzazione delle cellule neurali in cresta in migrazione negli embrioni di zebrafish. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra un protocollo di imaging time-lapse multi-fotone per visualizzare la migrazione delle cellule della cresta neurale in un embrione di zebrafish in tempo reale con alta risoluzione.

Fonte: Jeong, S. Visualizzazione del modello di proiezione assonale dei motoneuroni embrionali in Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra la visualizzazione delle proiezioni assonali negli embrioni Drosophila. L'immunomarcatura dei motoneuroni, la dissezione precisa per esporre le strutture neuronali e la microscopia a contrasto interferenale-differenziale rivelano collettivamente un'architettura neuronale dettagliata, enfatizzando i modelli di proiezione assonale.

Fonte: Canovic, E. P., et. al., Caratterizzazione delle proprietà meccaniche multiscala del tessuto cerebrale utilizzando la microscopia a forza atomica, l'indentazione dell'impatto e la reometria. J. Vis. Exp. (2016)Il video dimostra l'utilizzo dell'indentazione dell'impatto per misurare le proprietà meccaniche di un tessuto cerebrale di topo idratato, tra cui rigidità, dissipazione di energia e smorzamento, attraverso l'analisi dello spostamento e della velocità della sonda.

Fonte: Portela-Lomba, M., et. al. Cocoltura di neuroni gangliari retinici di ratto assotomizzati con glia inguainante olfattiva, come modello in vitro di rigenerazione assonale adulta. J. Vis. Exp. (2020).Questo video dimostra l'imaging e la quantificazione della rigenerazione assonale in neuroni gangliari retinici di ratto axotomizzati (RGN) co-coltivati con cellule gliali di rivestimento olfattivo umano immortalizzate. Gli RGN sono immunomarcati, con soma rossi e assoni verdi. Le immagini...

Fonte: Changou, C. A., et. al. Immagini dal vivo del traffico della proteina GLUT4 nei neuroni ipotalamici primari di topo utilizzando la microscopia a deconvoluzione. J. Vis. Exp. (2017). Questo video mostra l'imaging della traslocazione GLUT4 indotta dall'insulina nei neuroni ipotalamici, utilizzando la microscopia a deconvoluzione per catturare e analizzare le dinamiche di traffico di GFP-GLUT4 ad alta risoluzione.

Fonte: Kennedy, L. H., et. al. Visualizzazione e imaging dal vivo di organelli di oligodendrociti in fette di cervello organotipiche utilizzando virus adeno-associati e microscopia confocale. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra l'imaging dei mitocondri degli oligodendrociti in fette di cervello di topo organotipiche. La fetta viene posta all'interno di una camera a bagno con circolazione continua del fluido e temperatura controllata. Dopo aver impostato vari parametri del microscopio...

Fonte: Etienne, F. et al. Imaging a due fotoni dell'attrazione dei processi microgliali verso ATP o serotonina in fette cerebrali acute. J. Vis. Exp. (2019)Questo video dimostra l'uso della microscopia a due fotoni per studiare l'attrazione dei processi microgliali verso un composto iniettato in fette di cervello. Fornisce una panoramica della preparazione di fette di cervello di topo, dell'iniezione di un composto di prova chemioattrattivo e dell'imaging di microglia marcate in fluorescenza...

Fonte: Wang, Z., et al. Imaging transpupillare in vivo a due fotoni della retina del topo. J. Vis. Exp. (2021).Questo video mostra una tecnica per l'imaging retinico in vivo utilizzando la microscopia a due fotoni. I topi anestetizzati vengono preparati per l'imaging fissando le loro teste, applicando lubrificante per gli occhi e posizionando un vetrino coprioggetti sull'occhio. Le cellule gangliari retiniche (RGC) che esprimono proteine fluorescenti vengono prima visualizzate utilizzando...

Fonte: Bisht, K., et al. Mappatura precisa del cervello per eseguire l'imaging ripetitivo in vivo delle dinamiche neuro-immunitarie nei topi. J. Vis. Exp. (2020)Questo video dimostra l'imaging a fluorescenza delle dinamiche neuroimmunitarie in un topo transgenico con un impianto cranico. La stabilità vascolare e neuronale viene rilevata insieme ai cambiamenti dinamici della microglia, riflettendo le risposte immunitarie all'attività neuronale.

Fonte: Shannonhouse, J., et al. In vivo Imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari in gangli radicali dorsali intatti. J. Vis. Exp. (2023). Il video mostra una tecnica di imaging del calcio in vivo per monitorare l'attività neuronale nei gangli della radice dorsale (DRG) di un topo transgenico. I neuroni DRG esprimono un indicatore di calcio che aumenta l'intensità della fluorescenza dopo il legame con il calcio. Gli stimoli meccanici o termici applicati a una...

Source: Hellerman, M. B., et al. Imaging dal vivo dell'occhio della pupa di Drosophila. J. Vis. Exp. (2015)Il video dimostra una tecnica di imaging dal vivo per studiare il pattern oculare in una pupa di Drosophila melanogaster. I marcatori marcati con proteina fluorescente verde (GFP) consentono la visualizzazione dell'organizzazione e della differenziazione cellulare durante la formazione della struttura dell'occhio in via di sviluppo.

Fonte: Ulivi, A. F., et. al. Imaging longitudinale a due fotoni dell'ippocampo dorsale CA1 in topi vivi. J. Vis. Exp. (2019) Questo video mostra l'imaging longitudinale a due fotoni di neuroni piramidali marcati in fluorescenza in un topo vivo, mostrando la preparazione, l'allineamento della cannula e l'imaging di dendriti e spine dendritiche per studiare la struttura neuronale nella regione CA1 dell'ippocampo.

Fonte: Gómez-Villafuertes, R., et. Al., Imaging in tempo reale seguito da tracciamento di singole cellule per monitorare la biologia cellulare e la progressione del lignaggio di più popolazioni neurali. J. Vis. Exp. (2017) Il Il video mostra il processo di preparazione, imaging e monitoraggio delle cellule staminali neurali adulte in tempo reale per studiare i comportamenti cellulari, tra cui la divisione e la differenziazione.

Fonte: Volpe, B. A.A., et al. }} Saggio di ablazione e rigenerazione laser basato su microscopio confocale in cellule interneuromast di zebrafish. J. Vis. Exp.{{TAG_ 31}} (2020) Questo video mostra il monitoraggio del recupero interneuromastocitario nel pesce zebra utilizzando la microscopia confocale, monitorando la morte e la riparazione cellulare attraverso l'imaging a fluorescenza time-lapse.

Fonte: Fried, D. E., Gulbransen, B. D. In situ ca2+ Imaging del sistema nervoso enterico. J. Vis. Exp.Exp. (2015)Questo video dimostra il calcio imaging per visualizzare e analizzare l'attività dei neuroni enterici e della glia nelle preparazioni del plesso mienterico del colon di topo.

Fonte: Jagodzinska, J., et. al., Tomografia a coerenza ottica: imaging delle cellule gangliari retiniche del topo In Vivo. J. Vis. Exp. (2017) <br /> In questo video, dimostriamo l'uso della tomografia a coerenza ottica del dominio spettrale (SD-OCT) per visualizzare gli strati retinici e valutare i cambiamenti strutturali in un modello murino geneticamente modificato con neuropatia ottica.

Fonte: Chaney, A. M., et.al. Imaging PET della neuroinfiammazione utilizzando [11C]DPA-713 in un modello murino di ictus ischemico. J. Vis. Exp. (2018). Questo video dimostra una tecnica per l'imaging in vivo della neuroinfiammazione in un modello murino di ictus ischemico utilizzando un radiotracciante specifico per TSPO. Dopo l'iniezione, il radiotracciante si lega al TSPO, una proteina situata sulla membrana mitocondriale esterna e sovraespressa nelle cellule immunitarie attivate. Uno...

Fonte: Choi, J. P. et al. Induzione e imaging micro-CT di malformazioni cavernose cerebrali in modello murino. J. Vis. Exp. ( 2017)Questo video dimostra l'uso dell'imaging micro-CT per visualizzare le lesioni della malformazione cavernosa cerebrale (CCM) nel cervello di un topo. Descrive in dettaglio le fasi per la preparazione del campione, l'imaging e la ricostruzione dell'immagine 3D per valutare la densità e la posizione delle lesioni CCM nel tessuto cerebrale.

Source: Schmitz, K., et al., Bioluminescenza e imaging nel vicino infrarosso della neurite ottica e dell'infiammazione cerebrale nel modello EAE della sclerosi multipla nei topi. J. Vis. Exp. (2017).Questo video dimostra il metodo per visualizzare e monitorare l'encefalomielite autoimmune sperimentale o l'infiammazione indotta da EAE nel nervo ottico utilizzando Imaging a bioluminescenza. Include il posizionamento del mouse, l'iniezione del reagente e l'acquisizione di immagini sequenziali per...

Fonte: Ishimoto, H. et. Al., Imaging del calcio ex vivo per la visualizzazione delle risposte cerebrali alla segnalazione endocrina in Drosophila. J. Vis. Exp. (2018) Questo video dimostra l'imaging del calcio da studiareDrosophila risposte cerebrali ai neuropeptidi. I neuroni che esprimono un indicatore fluorescente di calcio rivelano la dinamica intracellulare del calcio e le risposte funzionali alle molecole di segnalazione.

Fonte: Al Omran, A. J., et al. Imaging dal vivo delle ciglia ependimali nei ventricoli laterali del cervello del topo. J. Vis. Exp. (2015). Questo video dimostra una tecnica di imaging dal vivo che utilizza la microscopia a contrasto interferenziale differenziale (DIC) per osservare il battito delle ciglia ependimali nelle sezioni del cervello sagittale del topo. Le ciglia ependimali spingono il liquido cerebrospinale (CSF) e la loro attività viene registrata in sezioni cerebrali mantenute in...

Fonte: Pigazzini, M. L., et. al. Caratterizzazione delle strutture amiloidi nell'invecchiamento C. Elegans utilizzando l'imaging della durata di fluorescenza. J. Vis. Exp. (2020). Questo video dimostra l'uso della microscopia a fluorescenza (FLIM) per valutare l'aggregazione della proteina polyQ nei neuroni C. elegans, confrontando vermi di controllo e carenti di proteine chaperone. L'aumento dell'aggregazione nei vermi carenti di chaperone promuove il trasferimento di energia tra fluorofori...

Fonte: Landeira, B. S.,et al., Imaging dal vivo di cellule primarie della corteccia cerebrale utilizzando un sistema di coltura 2D. J. Vis. Exp. (2017)Il video dimostra l'uso dell'imaging time-lapse per tracciare i progenitori corticali marcati in fluorescenza, monitorare la loro divisione e differenziazione e studiare lo sviluppo del lignaggio nelle cellule primarie della corteccia...

Fonte: Lee, H. et. al., Imaging di calcio in vivo riuscito con un microscopio miniaturizzato montato sulla testa nell'amigdala di un topo che si comporta liberamente. J. Vis. Exp. (2020)Questo video mostra l'imaging del calcio in vivo in un topo utilizzando un indice di rifrazione a gradiente, o lente GRIN, e un microscopio miniaturizzato. La configurazione combina la fissazione della testa all'interno di un sistema di gabbie mobili senza attrito, stimolando i neuroni e innescando l'afflusso di...

Fonte: Thapa, R., et. al., Iniezione virale stereotassica e impianto di lenti con indice di gradiente per l'imaging del calcio In vivo. J. Vis. Exp. (2021)Il video dimostra l'imaging del calcio in tempo reale utilizzando un miniscopio in un topo trasdotto, correlando l'attività neuronale con il comportamento.

Fonte: Moore, J. D., et al. Monitoraggio juxtacellulare e localizzazione di singoli neuroni all'interno di strutture cerebrali subcorticali di ratti allertati e con la testa trattenuta. J. Vis. Exp. (2015)Questo video mostra il metodo di registrazione e colorazione juxtacellulare in un ratto sveglio e trattenuto. La procedura prevede la registrazione dei segnali dai neuroni e l'iniezione di colorante per localizzare con precisione il sito di registrazione. Questa tecnica consente di mappare con...

Fonte: Schramm, P. et al. Imaging in vivo di tessuto cerebrale completamente attivo in larve di zebrafish sveglie e giovani mediante rimozione del cranio e della pelle. J. Vis. Exp. (2021)Questo video dimostra l'imaging in vivo dei neuroni cerebellari nelle larve transgeniche di zebrafish, che esprimono proteine fluorescenti nei neuroni di Purkinje. Il processo prevede l'anestetizzazione delle larve, l'immobilizzazione in agarosio e la rimozione accurata della pelle pigmentata per migliorare la...

Fonte: Ing-Esteves, S. & Lefebvre, J. L. Time-Lapse Imaging of Neuronal Arborization using Sparse Adeno-Associated Virus Labeling of Genetically Targeted Powder Cell Populations. J. Vis. Exp. (2021)Questo video dimostra l'uso della microscopia confocale per visualizzare le dinamiche dendritiche negli espianti retinici di topi vivi. Delinea i passaggi per stabilizzare la retina sotto un microscopio confocale, eseguire l'imaging in epifluorescenza per visualizzare gli interneuroni amacrini...

Fonte: Kamei, R., et. al., Imaging cronico a due fotoni in vivo della microglia nell'ippocampo del topo. J. Vis. Exp. (2022)Il video mostra il processo di configurazione e imaging per la microscopia a due fotoni in vivo della dinamica microgliale nel CA1 dell'ippocampo (Cornu ammonis 1) e nel giro dentato, garantendo un allineamento ottico ottimale e una valutazione dell'integrità strutturale.

Fonte: Lukasz, D., et al. Imaging in vivo del calcio delle cellule ciliate della linea laterale in larve di pesce zebra. J. Vis. Exp. (2018)Questo video mostra l'imaging dal vivo dell'afflusso di calcio nelle cellule ciliate della linea laterale di una larva di pesce zebra transgenico paralizzata utilizzando un microscopio confocale. La stimolazione meccanica dei fasci di capelli tramite impulsi di fluido induce l'ingresso di calcio attraverso i canali di meccanotrasduzione e i canali...

Fonte: Louth, E. L., et al. Imaging di neuroni all'interno di sezioni cerebrali spesse utilizzando il metodo Golgi-Cox. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra l'imaging dei neuroni in una sezione spessa del cervello colorata di Golgi-Cox impostando i limiti di messa a fuoco superiore e inferiore e catturando immagini sovrapposte. Vengono riprodotte più posizioni per garantire proiezioni neuronali dettagliate, che vengono combinate per creare una rappresentazione 3D.

Fonte: Heredia, D. J., et. Al. Imaging ex vivo della segnalazione del calcio cellulo-specifica alla sinapsi tripartita del diaframma del topo. J. Vis. Exp. (2018) Questo video mostra l'imaging a fluorescenza della dinamica del calcio alle giunzioni neuromuscolari (NMJ) in un topo transgenico che esprime indicatori di calcio geneticamente codificati. Un NJM è identificato da recettori dell'acetilcolina marcati in fluorescenza nel diaframma con il nervo frenico. Uno splitter di immagini viene...

Fonte: Pekarek, B. T., et. al., Imaging e quantificazione di dendriti neuronali intatti tramite CLARITY Tissue Clearing. (2021)In questo video, dimostriamo la preparazione, l'imaging e l'analisi di un cervello di topo ripulito per esaminare gli arbori dendritici, la morfologia della colonna vertebrale e la distribuzione neuronale utilizzando la microscopia confocale e le tecniche di ricostruzione 3D.

Fonte: Refaeli, R., et al., Indagine sull'interazione spaziale tra astrociti e neuroni in cervelli chiariti. J. Vis. Exp. (2022) Il video mostra la preparazione di una camera e il neuroimaging del tessuto ippocampale di topo ripulito utilizzando la microscopia a due fotoni per visualizzare le interazioni spaziali tra astrociti marcati in fluorescenza e neuroni eccitatori.

Fonte: Chan, U., et al., Utilizzo dell'elettroporazione postnatale in vivo per studiare la morfologia dei neuroni dei granuli cerebellari e lo sviluppo delle sinapsi. J. Vis. Exp. (2021).Questo video dimostra l'analisi dello sviluppo dei neuroni dei granuli cerebellari mediante l'imaging di fette di tessuto cerebrale prefissate da topi etichettati con una proteina fluorescente, Acquisizione di immagini Z-stack ad alta risoluzione con un microscopio confocale e misurazione di parametri...

Fonte: Maruoka, H., et. al. Imaging simultaneo della dinamica microgliale e dell'attività neuronale in topi svegli. J. Vis. Exp. (2022) Questo video mostra una procedura di microscopia a due fotoni per l'imaging dell'attività neuronale e della dinamica microgliale in un topo sveglio durante la stimolazione visiva, evidenziando i transitori del calcio e le interazioni cellulari.

Fonte: Moye, S. L., et.al. Visualizzazione della morfologia degli astrociti utilizzando la ionoforesi gialla di Lucifero. J. Vis. Exp. (2019). Questo video dimostra l'uso della ionoforesi con colorante fluorescente per studiare la morfologia degli astrociti in fette di cervello fisse. Descrive in dettaglio la perforazione del soma degli astrociti con un elettrodo per rilasciare un colorante anionico e idrofilo nel citoplasma sotto una corrente a bassa tensione, consentendo al colorante di...

Fonte: Jongbloets, B. C., et al. Visualizzazione dell'attività della proteina chinasi A nei topi che si comportano con la testa fissata utilizzando la microscopia di imaging a fluorescenza a fluorescenza a due fotoni in vivo. J. Vis. Exp. (2019) Questo video mostra una procedura di microscopia di imaging a fluorescenza a due fotoni per visualizzare l'attività della proteina chinasi A in topi con testa fissa durante la locomozione forzata.

Fonte: Kwon, J., et al., Microscopia riflettometrica spettrale su assoni mielinizzati in situ. J. Vis. Exp. (2018) Questo video dimostra l'uso della riflettometria spettrale con un microscopio confocale iperspettrale per analizzare i modelli di interferenza e determinare i diametri degli assoni mielinizzati in fette fisse di tessuto cerebrale.

Inizia con un paziente con meningioma, o un tumore cerebrale, posizionato in uno scanner MRI per l'imaging cerebrale non invasivo.Regolare lo scanner per ottenere immagini strutturali di singole fette di cervello.Migliora il contrasto per migliorare la differenziazione dei tessuti.Utilizzare l'imaging del rapporto di trasferimento della magnetizzazione tra le fette su fette cerebrali utilizzando impulsi a radiofrequenza leggermente sfalsati rispetto al segnale MRI.Gli impulsi forniscono energia...

Fonte: <a style='decorazione testo:nessuno;' href='https://app.jove.com/v/57546/visualization-of-motor-axon-navigation-and-quantification-of-axon-arborization-in-mouse-embryos-using-light-sheet-fluorescence-microscopy'>Liau, E. S. et al. Visualizzazione della navigazione degli assoni motori e quantificazione dell'arborizzazione degli assoni negli embrioni di topo utilizzando la microscopia a fluorescenza a foglio leggero. J. Vis. Exp. (2018). Questo video dimostra l'uso della microscopia...

La mappatura quantitativa della suscettibilità, o QSM, quantifica la suscettibilità magnetica del tessuto cerebrale, che riflette la sua composizione cellulare, come il contenuto di mielina. Inizia acquisendo la risonanza magnetica ex-vivo o i dati MRI di un emisfero cerebrale umano fisso. Utilizza i campi magnetici a gradiente 3D per magnetizzare il tessuto e raccogliere segnali in più punti temporali o echi per ridurre il rumore di fondo e gli artefatti e migliorare i segnali. Genera mappe di...

Fonte: Feng, Y., et al. Caratterizzazione viscoelastica di fantocci di gelatina che imitano i tessuti molli utilizzando l'elastografia a indentazione e risonanza magnetica. J. Vis. Exp. (2022) Questo video mostra il metodo dell'elastografia a risonanza magnetica (MRE) per valutare le proprietà viscoelastiche dei tessuti analizzando Propagazione dell'onda di taglio attraverso un fantasma di gelatina, che imita il tessuto cerebrale. Il processo prevede la generazione e la cattura di onde...

Fonte: Boyer, N. P. et. al., Imaging e analisi del trasporto di neurofilamenti nel nervo tibiale di topo asportato. J. Vis. Exp. (2020) Questo video mostra il metodo di fotoattivazione della fluorescenza da analizzare Trasporto di neurofilamenti negli assoni mielinizzati dei nervi periferici. Tracciando i neurofilamenti verdi fotoattivati marcati con fluorofori, la tecnica fornisce informazioni sul trasporto assonale nelle malattie neurodegenerative.

Fonte: Kulkarni, M. et al. Imaging Ca2+ Dinamica nei terminali assonici dei fotorecettori dei coni della retina del topo. J. Vis. Exp. (2015)Questo video dimostra l'uso della microscopia a due fotoni per monitorare la dinamica del calcio nei fotorecettori dei coni di una retina di topo transgenico. Descrive i passaggi per la preparazione delle fette di retina, l'imaging di biosensori di calcio basati su FRET e l'analisi delle variazioni di fluorescenza per quantificare i livelli di calcio in...

Fonte: Nishidate, I., et al. Valutazione simultanea dell'emodinamica cerebrale e delle proprietà di diffusione della luce del cervello di ratto In vivo utilizzando l'imaging multispettrale a riflettanza diffusa. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra l'uso dell'imaging multispettrale a riflettanza diffusa per analizzare il flusso sanguigno cerebrale, i livelli di ossigeno e i cambiamenti della struttura dei tessuti in un ratto anestetizzato, fornendo informazioni sull'emodinamica e la...

Fonte: Van Wonterghem, E., et al. Microdissezione e microscopia elettronica a scansione a montaggio intero Visualizzazione del plesso coroideo di topo. J. Vis. Exp. (2022)Questo video dimostra la preparazione e l'imaging del tessuto del plesso coroideo da un cervello di topo utilizzando la microscopia elettronica a scansione (SEM). Il processo include la fissazione dei tessuti, la disidratazione e il rivestimento con uno strato di platino conduttivo per stabilizzare e preparare il campione per...

Fonte: Kato, D. et. al., Valutazione e manipolazione dell'attività neurale utilizzando la microscopia olografica a due fotoni. J. Vis. Exp. (2022)Questo video dimostra la tecnica di imaging a due fotoni combinata con l'optogenetica utilizzando la microscopia olografica. Utilizzando un modulatore di luce spaziale, questa tecnica consente una stimolazione neuronale precisa che esprime la proteina sensibile alla luce rossa e l'imaging del calcio con un fotodanno minimo. Questo approccio fornisce...

Fonte: Canovic, E. P., et al. Caratterizzazione delle proprietà meccaniche multiscala del tessuto cerebrale mediante microscopia a forza atomica, indentazione dell'impatto e reometria. J. Vis. Exp. (2016)Questo video dimostra l'uso della microscopia a forza atomica (AFM) per misurare le proprietà viscoelastiche del tessuto cerebrale, dove un cantilever con una sonda sferica interagisce con il tessuto e si piega sotto le forze applicate. Un raggio laser deviato su un rivelatore traccia il...

Fonte: Canovic, E. P., et al. Caratterizzazione delle proprietà meccaniche multiscala del tessuto cerebrale mediante microscopia a forza atomica, indentazione dell'impatto e reometria. J. Vis. Exp. (2016)In questo video, un reometro è stato utilizzato per applicare un movimento rotatorio oscillatorio controllato al tessuto cerebrale per generare una deformazione di taglio e valutare le proprietà viscose ed elastiche del tessuto. Il reometro, in quanto strumento funzionale, fornisce...

Fonte: Hare, D. J., et.al. Imaging dei metalli nel tessuto cerebrale mediante ablazione laser - Plasma accoppiato induttivamente - Spettrometria di massa (LA-ICP-MS). J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra l'uso dell'ablazione laser-spettrometria di massa al plasma accoppiato induttivamente (LA-ICP-MS) per visualizzare e quantificare le distribuzioni di metalli nel tessuto cerebrale di topo. Il protocollo prevede l'ablazione laser per generare un aerosol di particelle campione, la...

Fonte: Piazza, V., et al., Ottica non lineare senza etichetta per lo studio dei difetti dipendenti dalla tubulina nella mielina centrale. J. Vis. Exp. (2023)Questo video mostra la procedura per l'imaging delle anomalie dei microtubuli in una fetta di tessuto cerebrale di ratto utilizzando un microscopio a eccitazione a due fotoni. Impiega segnali di seconda armonica (SHG) per rilevare i difetti della tubulina e la ridotta produzione di mielina.

Fonte: Daniele, F., et. al Sonde TIRFM e GFP sensibili al pH per valutare la dinamica delle vescicole dei neurotrasmettitori nelle cellule di neuroblastoma SH-SY5Y: imaging cellulare e analisi dei dati. J. Vis. Exp. (2015). Questo video mostra l'imaging di cellule di neuroblastoma umano utilizzando un microscopio a fluorescenza a riflessione interna totale (TIRF) per visualizzare vescicole sinaptiche marcate con fluorofori. Le cellule vengono prima focalizzate in modalità epifluorescenza.

Fonte: Winkle, C. C., et al. Utilizzo di metodologie combinate per definire il ruolo del rilascio della membrana plasmatica durante la ramificazione degli assoni e la morfogenesi neuronale. J. Vis. Exp. (2016)Questo video mostra la microscopia a fluorescenza a riflessione interna totale (TIRF) per la visualizzazione di eventi esocitici nei neuroni corticali. Un marcatore di proteina fluorescente verde (GFP) sensibile al pH emette fluorescenza dopo la fusione delle vescicole, con eccitazione...

Fonte: McCullagh, E. A., et al. Applicazione coerente della spettroscopia Raman Anti-Stokes (CARS) per l'imaging della mielinizzazione in fette di cervello. J. Vis. Exp. (2022)Il video mostra la fluorescenza e l'imaging della spettroscopia Raman anti-Stokes coerente (CARS) per visualizzare l'architettura neuronale nel tessuto cerebrale dei roditori. La colorazione Nissl marca i corpi cellulari legandosi all'RNA ribosomiale, mentre l'imaging CARS prende di mira la mielina ricca di lipidi...

Fonte: Hontani, Y., et al. Microscopia a fluorescenza a tre fotoni dei tessuti profondi nel cervello intatto di topo e pesce zebra. J. Vis. Exp. (2022)Questo video mostra la configurazione e l'esecuzione dell'imaging a tre fotoni in un cervello di pesce zebra anestetizzato. Il protocollo consente la visualizzazione dei tessuti profondi di neuroni marcati in fluorescenza, rivelando l'attività neuronale e le strutture in tempo reale per le applicazioni di ricerca nelle neuroscienze.