Analisi delle strutture amiloidi in una sezione di tessuto mediante microscopia a fluorescenza con imaging a vita

Abstract

Fonte: Nyström, S., et al., Imaging di tessuti amiloidi colorati con oligotiofeni coniugati luminescenti mediante microscopia confocale iperspettrale e imaging del tempo di vita della fluorescenza. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video mostra l'analisi delle strutture amiloidi con la microscopia a fluorescenza o FLIM, utilizzando il colorante hFTAA per rivelare nuclei compatti come blu/verde e periferie instabili come rosso/giallo in immagini codificate a colori, riflettendo l'organizzazione dell'amiloide.

Protocol

1. Preparazione di campioni di tessuto

NOTA: Molti tipi di tessuto possono essere visualizzati utilizzando l'acido acetico eptamero-formil tiofene (hFTAA) come marcatore amiloide. L'hFTAA è sensibile alla conformazione aggregata. La colorazione dovrebbe, quindi, essere preferibilmente eseguita su aggregati non interrotti senza esposizione all'epitopo. La qualità spettrale ottimale si ottiene se la fissazione tissutale è ridotta al minimo. Pertanto, è preferibile il materiale fresco congelato, fissato ....

Materials