Visualizzazione della sinaptogenesi dei neuroni dei granuli cerebellari in diversi stadi di sviluppo

Abstract

Fonte: Chan, U., et al., Utilizzo dell'elettroporazione postnatale in vivo per studiare la morfologia dei neuroni dei granuli cerebellari e lo sviluppo delle sinapsi. J. Vis. Exp. (2021).

Questo video dimostra l'analisi dello sviluppo dei neuroni dei granuli cerebellari mediante l'imaging di fette di tessuto cerebrale prefissate da topi etichettati con una proteina fluorescente, Acquisizione di immagini Z-stack ad alta risoluzione con un microscopio confocale e misurazione di parametri strutturali tra cui la lunghezza dei neuriti, la formazione di unghie dendritiche, l'area superficiale e il volume per studiare la sinaptogenesi.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono campioni di animali sono state esaminate e approvate dal comitato di revisione etica degli animali appropriato.

1. Analisi morfologiche di neuroni di granuli cerebellari o CGN - ricostruzione tridimensionale (3D) e area superficiale e volume cellulare

1. Immagine di singole CGN elettroporate su un microscopio confocale con obiettivo 63x con zoom 2x, scattando immagini z-stack a 0,5 μm per stack. Immagine di una cella per finestra dell'imm....

Risultati

Materiali