Imaging multispettrale a riflettanza diffusa del flusso sanguigno cerebrale di ratto e della struttura dei tessuti

Abstract

Fonte: Nishidate, I., et al. Valutazione simultanea dell'emodinamica cerebrale e delle proprietà di diffusione della luce del cervello di ratto In vivo utilizzando l'imaging multispettrale a riflettanza diffusa. J. Vis. Exp. (2017)

Questo video dimostra l'uso dell'imaging multispettrale a riflettanza diffusa per analizzare il flusso sanguigno cerebrale, i livelli di ossigeno e i cambiamenti della struttura dei tessuti in un ratto anestetizzato, fornendo informazioni sull'emodinamica e la morfologia del cervello in condizioni variabili.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Acquisizione di immagini campione
   Nota: Le immagini dell'intensità luminosa riflessa diffusamente del cervello di ratto esposto a nove lunghezze d'onda vengono catturate e salvate sul disco rigido di un personal computer utilizzando le stesse condizioni di acquisizione.
   1. Posiziona delicatamente il ratto sul tavolino e regola lentamente il livello del tavolino in modo che la fotocamera possa mettere a fuoco la superficie del cervello del topo.
   2. Seleziona il comando "salva" dal menu file per salvare un'immagine in un file.
   3. Modificare la posizione del filtro ruotando la ruota portafiltri.
   4. Salvare un'immagine alle altre lunghezze d'onda secondo il processo descritto sopra. Il nome del file deve identificare il campione e la lunghezza d'onda (, ad esempio, , R500, R520, R540 ... R760).
2. Acquisizione di immagini scure
   NOTA: La telecamera CCD (dispositivo ad accoppiamento caricato) può generare un'intensità luminosa in risposta a un segnale elettrico. Tuttavia, c'è qualche uscita minore dovuta al rumore nei circuiti elettrici e nei rivelatori, anche se la luce non entra nel rivelatore; Questo è chiamato rumore di corrente oscura. Per misurare con precisione l'intensità spettrale della luce, la componente della corrente di buio deve essere registrata come immagine scura e quindi sottratta dal segnale misurato. L'immagine scura è un'immagine scattata con il percorso della luce bloccato.
   1. Spegnere la sorgente luminosa della lampada alogena.
   2. Bloccare il percorso della luce verso il sistema di telecamere CCD utilizzando una piastra di schermatura.
   3. Seleziona il comando "salva" dal menu file per salvare un'immagine in un file. Il nome del file deve identificare l'esempio (, ad esempio, Dark).

Materiali