Imaging multispettrale a riflettanza diffusa del flusso sanguigno cerebrale di ratto e della struttura dei tessuti

Abstract

Fonte: Nishidate, I., et al. Valutazione simultanea dell'emodinamica cerebrale e delle proprietà di diffusione della luce del cervello di ratto In vivo utilizzando l'imaging multispettrale a riflettanza diffusa. J. Vis. Exp. (2017)

Questo video dimostra l'uso dell'imaging multispettrale a riflettanza diffusa per analizzare il flusso sanguigno cerebrale, i livelli di ossigeno e i cambiamenti della struttura dei tessuti in un ratto anestetizzato, fornendo informazioni sull'emodinamica e la morfologia del cervello in condizioni variabili.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Acquisizione di immagini campione
   Nota: Le immagini dell'intensità luminosa riflessa diffusamente del cervello di ratto esposto a nove lunghezze d'onda vengono catturate e salvate sul disco rigido di un personal computer utilizzando le stesse condizioni di acquisizione.
   1. Posiziona delicatamente il ratto sul tavolino e regola lentamente il livello del tavolino in modo che la fotocamera possa mettere a fuoco la superficie del cervello del topo.
   2. Seleziona il comando "salva" dal menu file per salvare un'immagine in un file.
   3. Modificare la posizione del filtro ruotando la ruota portafiltri.
   4. Salvare un'immagine alle altre lunghezze d'onda secondo il processo descritto sopra. Il nome del file deve identificare il campione e la lunghezza d'onda (, ad esempio, , R500, R520, R540 ... R760).
2. Acquisizione di immagini scure
   NOTA: La telecamera CCD (dispositivo ad accoppiamento caricato) può generare un'intensità luminosa in risposta a un segnale elettrico. Tuttavia, c'è qualche uscita minore dovuta al rumore nei circuiti elettrici e nei rivelatori, anche se la luce non entra nel rivelatore; Questo è chiamato rumore di corrente oscura. Per misurare con precisione l'intensità spettrale della luce, la componente della corrente di buio deve essere registrata come immagine scura e quindi sottratta dal segnale misurato. L'immagine scura è un'immagine scattata con il percorso della luce bloccato.
   1. Spegnere la sorgente luminosa della lampada alogena.
   2. Bloccare il percorso della luce verso il sistema di telecamere CCD utilizzando una piastra di schermatura.
   3. Seleziona il comando "salva" dal menu file per salvare un'immagine in un file. Il nome del file deve identificare l'esempio (, ad esempio, Dark).

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Sorgente luminosa alogena da 150 W	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Giappone	LA-150SAE
Guida luminosa	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Giappone	LGC1-5L1000
Lente da collezione	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Giappone	SH-F16
Filtri interferenziali l@500nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#65088
Filtri interferenziali l@520nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#65093
Filtri interferenziali l@540nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#65096
Filtri interferenziali l@560nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#67766
Filtri interferenziali l@570nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#67767
Filtri interferenziali l@580nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#65646
Filtri interferenziali l@600nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#65102
Filtri interferenziali l@730nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#65115
Filtri interferenziali l@760nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	#67777
Ruota portafiltri motorizzata	Andover Corporation, NH, USA	FW-MOT-12.5
Telecamera CCD raffreddata a 16 bit	Bitran, Giappone	BS-40
Obiettivo zoom video	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Giappone	VZMTM300i
Spectralon bianco standard con riflettanza diffusa del 99%	Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA	SRS-99-020