Imaging in bioluminescenza in vivo di cellule progenitrici neurali umane in un cervello di topo

Abstract

Fonte: Weber, R. Z., et al., Trapianto intracerebrale e monitoraggio della bioluminescenza in vivo delle cellule progenitrici neurali umane nel cervello del topo. J. Vis. Exp. (2022)

Questo video dimostra il metodo per l'imaging in bioluminescenza in vivo di cellule progenitrici neurali umane geneticamente modificate iniettate nel cervello di un topo. Il processo prevede l'iniezione di luciferina, la preparazione dell'imaging e il rilevamento di segnali bioluminescenti dalle cellule trapiantate nel sito di iniezione.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

Imaging in vivo

1. Preparazione di luciferina
   1. Scongelare il sale di potassio D-luciferina a temperatura ambiente (RT) e preparare una soluzione madre fresca di D-luciferina a 30 mg/mL in PBS.
   2. Sterilizzare la soluzione madre attraverso un filtro per siringa da 0,22 μm.
      NOTA: Si consiglia l'uso immediato della soluzione di lavoro. Se necessario, la luciferina disciolta può essere conservata a -20 °C.....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Filtro siringa per materiali di
; 0.22 μm	TPP	99722
Attrezzatura
Sistema			di
imaging in vivo (IVIS Lumina III con pacchetto software Living Imaging 4.2)	Perkin Elmer	CLS136334
Vaporizzatore di isoflurano	Provet AG	330724
Farmaci e reagenti
D-luciferina Sale	di potassioPerkin Elmer	122799
Etanolo; 70%			Prodotto a scelta
Isoflurano (Isofluran (1-Chlor-2,2,2-trifluoromethyl-difluoromethyleter) 99,9%)	Provet AG	Tutti i prodotti farmaceutici sono stati forniti dalla farmacia cantonale di Zurigo, Svizzera
Lubrificante oftalmico (Retinol palmitat: 15.000 UI)	Bausch & Lomb Swiss AG	Tutti i prodotti farmaceutici sono stati forniti dalla farmacia cantonale di Zurigo, Svizzera

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