Questo studio riguarda lo sviluppo e la standardizzazione di un protocollo valido strumento metodologico per determinare a lungo termine (14 giorni) tossicità letale esercitata da sostanze chimiche, delle acque reflue industriali o acque di scarico e liquidi campioni ambientali sul crostaceo d'acqua salata, Artemia franciscana.
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Articolo metodologico
A lungo termine del test di tossicità letale con il crostaceo Artemia franciscana
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le nostre attività di ricerca incentrato sull'uso di metodi biologici per la valutazione della qualità ambientale, con particolare riferimento ad acqua salata / acqua salmastra e sedimenti. La scelta degli indicatori biologici deve basarsi su conoscenze scientifiche affidabili e, eventualmente, la disponibilità di procedure standardizzate. In questo articolo, vi presentiamo un protocollo standardizzato che ha utilizzato il crostaceo marino Artemia per valutare la tossicità delle sostanze chimiche e / o di matrici ambientali marine. Gli scienziati propongono che l'artemia (Artemia) è un candidato idoneo per lo sviluppo di un saggio biologico standard per l'utilizzo in tutto il mondo. Un certo numero di lavori sono stati pubblicati sugli effetti tossici di varie sostanze chimiche e sostanze tossiche sul artemia (Artemia). Il vantaggio principale di questo crostaceo per gli studi di tossicità è la disponibilità complessiva delle cisti secchi, questi possono essere immediatamente utilizzato nei test e la coltivazione difficile non è richiesto 3. Il metodo proposto prevede la mortalità un endpoint. I numeri dei sopravvissuti sono stati contati e la percentuale di decessi sono stati calcolati. Le larve sono stati considerati morti se non ha evidenziato alcun movimento interno o esterno durante alcuni secondi di osservazione 4. Questa procedura è stata test standardizzati una sostanza di riferimento (sodio dodecil solfato); alcuni risultati sono riportati in questo lavoro. In questo articolo si accompagna un video che descrive le prestazioni delle prove di tossicità procedurale, mostrando tutti i passaggi relativi al protocollo.
Protocollo
1. Metodo Standard
Il test consiste nel sottoporre larve Artemia ad un intervallo di concentrazioni della sostanza o di un campione di prova per determinare i livelli di concentrazione o diluizione che potrebbero causare la morte del 50% degli organismi (LC 50) esposto per 14 giorni e di soddisfare le condizioni definite con questo metodo. Se necessario e possibile, possono anche essere determinato: a) il livello di concentrazione che provoca la morte del 20% degli organismi esposti (LC 20), b) il più alto livello di concentrazione analizzato che non determina un tasso di mortalità più elevato di quello dei il....
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Discussione
Artemia è uno dei più importanti organismi di prova disponibili per i test di ecotossicità e di ricerca fatto finora ci consente di affermare che è possibile sostenere diverse opzioni connessi al consumo di Artemia in Tossicologia ed Ecotossicologia. Le caratteristiche che trasformano questo organismo in una specie adatti per saggi biologici sono: una vasta distribuzione geografica, elevata adattabilità a condizioni ambientali avverse e nutrienti vari, la cultura di laboratorio relativamente semplice e.......
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Dichiarazioni
Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.
Ringraziamenti
Prodotto da Loredana Manfra dell'Istituto per la tutela dell'ambiente e della ricerca (ISPRA-Dipartimento di controllo della qualità ambientale) e Federica Savorelli dell'Agenzia Regionale per la Protezione dell'Ambiente (Emilia-Romagna, Italia).
I membri di riferimento per il sub-gruppo di lavoro il crostaceo Artemia all'interno del gruppo biologico Metodi - Saltwater / acque salmastre e sedimenti della Commissione UNICHIM sulla qualità delle acque (l'istituto per il funzionamento delle norme tecniche nel settore chimico).
Videografia e l'editing di Marco Pisapia di ISPRA ....
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Materiali
Prodotto da Loredana Manfra dell'Istituto per la tutela dell'ambiente e della ricerca (ISPRA-Dipartimento di controllo della qualità ambientale) e Federica Savorelli dell'Agenzia Regionale per la Protezione dell'Ambiente (Emilia-Romagna, Italia).
I membri di riferimento per il sub-gruppo di lavoro il crostaceo Artemia all'interno del gruppo biologico Metodi - Saltwater / acque salmastre e sedimenti della Commissione UNICHIM sulla qualità delle acque (l'istituto per il funzionamento delle norme tecniche nel settore chimico).
Videografia e l'editing di Marco Pisapia di ISPRA (Scientific Advisory e servizi di documentazione).
Coordinamento della produzione di Anna Maria Cicero e Erika Magaletti di ISPRA (Dipartimento di controllo della qualità ambientale).
Vorremmo ringraziare l'Agenzia Regionale per la Protezione Ambientale della Regione Emilia-Romagna, Filiale di Ferrara e la BiologiCal Metodi Group - Saltwater / acqua salmastra e sedimenti della Commissione UNICHIM sulla qualità dell'acqua per la loro collaborazione, Rossella Boscolo e Massimo Gabellini di ISPRA (Dipartimento di Prevenzione e mitigazione degli impatti) per il loro sostegno finanziario, e la London School of Languages di Roma per il loro supporto linguistico.
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Nome del reattivo | Azienda | Codice prodotto | |
| Sodio dodecil solfato | Sigma-Aldrich | L4390 |
Appendice
Il algale supporto deve essere preparato utilizzando reagenti di qualità analitica.
Un litro di soluzione nutritiva viene preparata sciogliendo 300 g di NaNO 3, 30 g di KH 2 PO 4 g e 20 di NH 4 Cl in acqua distillata.
Quattro soluzioni iniziali (A, B, C, D) Di minerali vengono preparati come segue:
- Un litro di soluzione "A" contenente 30 g di ZnSO 4 H 2 O, 25 g di CuSO 4 5 H 2 O, 30 g di CoSO 4 7 H 2 O e 20 g di MnSO 4 H 2 O in acqua distillata;
- Un litro di soluzione "B" contenente 50 g di FeCl 3 • 6 H 2 O in acqua distillata;
- Un litro di soluzione "C" contenente 25 g di Na 2 MoO 4 • 2 H 2 O in acqua distillata;
- Un litro di soluzione "D" contenente 50 g di Na 2 EDTA • 2 H 2 O in acqua distillata.
Un litro di una soluzione finale di minerali (soluzione "E") è ottenuta aggiungendo aliquote delle suddette soluzioni in acqua distillata. La seguente ordine di aggiunta si raccomanda: 100 ml di soluzione "D", 10 ml di soluzione "C", 10 ml di soluzione "B" e 10 ml di soluzione "A".
Tre iniziativesoluzioni L (F, G, H), di vitamine vengono preparati come segue:
- Un litro di soluzione "F" contenente 100 mg di biotina in acqua distillata;
- Un litro di soluzione "G" contenente 10 g di tiamina in acqua distillata;
- Un litro di soluzione "H" contenente 100 mg di cobalamina in acqua distillata.
Un litro di una soluzione finale di vitamine (soluzione "I") ottenuto aggiungendo 10 ml delle tre soluzioni iniziali di acqua distillata.
Un litro di alghe supporto viene preparata sciogliendo 1 ml della soluzione nutritiva, 1 ml della soluzione finale minerale (soluzione "E") e 1 ml della soluzione di vitamina finale (soluzione "I") in acqua di mare. Quest'ultimo può essere ottenuta sciogliendo riconosciuti reagenti di qualità analitica o una formulazione disponibile in commercio in acqua distillata o deionizzata. Miscele di sale per creare l'acqua salata ideale sono commercialmente disponibili, ad esempio le miscele Ocean istantanea. Si tratta di raccomandazioniDed l'utilizzo di acqua di mare con salinità di 30 (± 2) PSU e temperatura di 20 (± 1) ° C.
Riferimenti
- Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
- Persoone, G., Wells, P. G. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterizat....
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Ristampe e permessi
