Siamo qui presentiamo un modello di trapianto di rene di ratto per valutare in modo non invasivo rigetto acuto utilizzando la tomografia ad emissione di positroni con 18F-fluorodeossiglucosio.
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Articolo metodologico
Imaging non invasivo di acuta Alloinnesto rigetto dopo trapianto renale Rat Utilizzo
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il numero di pazienti con malattia renale allo stadio terminale, e il numero di riceventi trapianto allogenico di rene aumenta continuamente. Gli episodi di rigetto acuto cellulare (AR) sono un fattore prognostico negativo per la sopravvivenza del trapianto a lungo termine, e la sua diagnosi tempestiva è fondamentale per la funzionalità dell'organo trapiantato 1. Allo stato attuale, AR può essere definitivamente diagnosticata solo mediante biopsia core-ago, che, come un metodo invasivo, scopre significativo rischio di lesioni o addirittura la perdita dell'innesto. Inoltre, le biopsie non sono fattibili in pazienti che assumono farmaci anticoagulanti e il sito di campionamento limitato di questa tecnica può portare a risultati falsi negativi se l'AR è focale o irregolare. Di conseguenza, questo ha dato luogo a una continua ricerca di nuovi metodi di rilevazione AR, che spesso deve essere fatto in animali, compreso l'uso di vari modelli di trapianto.
Dall'inizio degli anni '60 il trapianto renale ratto è un metodo sperimentale consolidata per l'esazione e l'analisi di AR 2. Noi qui presenti oltre piccola tomografia a emissione di positroni animali (PET) con 18 F-fluorodeossiglucosio (FDG) per valutare AR in un ratto uninephrectomized renale modello di trapianto allogenico e proporre innesto di imaging FDG-PET come una nuova opzione per un non-invasiva, specifica e la diagnosi precoce di AR anche per la situazione umana 3. Inoltre, questo metodo può essere applicato per il follow-up per migliorare il monitoraggio del rigetto del trapianto 4.
Protocollo
1. Donor Recovery Organ
- Impostare il microscopio stereotassica, record di peso del 8-10 settimane di età ratto (donatore e ricevente di peso corporeo dovrebbe corrispondere).
- Anestetizzare il topo donatore (Lewis Brown Norway F1, LBN F1) con ossigeno / inalazione isoflurano (isoflurano 4% / 2 L / min di ossigeno). Mantenere l'anestesia abbassando isoflurano al 2-2,5%.
- Posizionare il topo anestetizzato sul pad chirurgia. Fissare le estremità del ratto con del nastro adesivo sul tampone e applicare pomata oftalmica (Bepanthen, Bayer) agli occhi del ratto.
- Shave e disinfettare l'addome del ratto e di eseguire una incision....
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Risultati
Istologia
Durante AR leucociti, cioè soprattutto linfociti T sono reclutati nel trapianto, mentre la gravità del rigetto viene riflessa dal grado di infiammazione. Nel periodico-Acid-Schiff (PAS) colorazione raffigurato qui (figura 1), il trapianto renale mostra significativi segni istologici di AR, ovvero glomerulite, tubulitis, endothelialitis e infiltrazione innesto (figura 1, ATX Pod4) (POD = giorno post-operatorio) mentre segnali di rigetto sono a.......
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Discussione
L'imaging FDG-PET è una nuova opzione per la diagnosi di rigetto acuto. A causa della sua natura non invasiva e specifici, FDG-PET è vantaggi rispetto alla diagnostica classica da Core ago biopsia. In contrasto con la dimensione del campione limitata di una biopsia, analisi FDG-PET tutta innesto. Inoltre, si può applicare a pazienti in terapia anticoagulante, e si può effettuare misure di PET ripetutamente ad esempio per monitorare l'efficienza di trattamento 4. Inoltre, abbiamo già dimostrat.......
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, in Germania, i progetti C7 e C6) e il IZKF Münster (Core unità SMAP). Gli autori sono grati a Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich e Priebe romana per un'eccellente assistenza tecnica e di Daniel Burkert e Sven Fatum per la produzione di radiofarmaci.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Attrezzatura | |||
| Pinza per ago di Mathieu - 14 cm | Fine Science Tools | 12010-14 | |
| Pinza microchirurgica Castroviejo - 9 cm | Fine Science Tools | 12061-01 | |
| Forbici chirurgiche - Appuntite_Ottime | Fine Science Tools | 14001-12 | |
| Forbici ad iris - ToughCut dritte 11,5 cm | Fine Science Tools | 14058-11 | |
| Forbici a molla Vannas per studenti | Fine Science Tools | 91500-09 | |
| Forbici a molla Vannas - Lame da 3 mm | Fine Science Tools | 15000-00 | |
| Pinze per tessuti da studente - 1x2 denti 12 cm | Fine Science Tools | 91121-12 | |
| Pinze Dumont SS-45 - Inox Medical | Fine Science Tools | 11203-25 | |
| Applicatore di clip micro-Serrefine con blocco | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm | Fine Science Tools | 18055-03 | |
| Micro-Serrefine 4 mm x 0,75 mm | Fine Science Tools | 18055-04 | |
| Reagente | |||
| Isoflurano (ad es. Forene 100% v/v) | Abott | ||
| antiseptico cutaneo (ad es. Octeniderm) | Schülke | ||
| Iodopovidone (ad es. Betaisodona) | Mundipharma | ||
| unguento oftalmico (ad es. Bepanthen) | Bayer | ||
| Buprenorfina (ad es. Temgesic) | RB Pharmaceuticals | ||
| Soluzione di perfusione HTK (ad es. CUSTODIOL HTK) | Dr. Franz Köhler Chemie | ||
| Filo chirurgico Mersilene 0 | Ethicon | EH6665E | |
| Filo chirurgico Mersilene 4-0 | Ethicon | EH6732H | |
| Filo chirurgico Prolene 6-0 | Ethicon | 8697H | |
| Filo chirurgico Ethilon 9-0 | Ethicon | 2809G | |
| Filo di seta chirurgica 5-0 | Vömel | 14739 | |
| Canula (ad es. Microlance 3, 27G ¾) | BD | 302200 |
Riferimenti
- Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
- Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194
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Ristampe e permessi
