Descriviamo un metodo altamente riproducibile per l'occlusione permanente di un roditore grande vaso sanguigno cerebrale. Questa tecnica può essere realizzato con pochissima danni periferici, minima perdita di sangue, un elevato tasso di sopravvivenza a lungo termine, e volume dell'infarto coerente commisurato alla popolazione clinica umana.
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Articolo metodologico
Cerebrale permanente occlusione di vasi
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'ictus è una delle principali cause di morte, invalidità, e la perdita di socio-economici in tutto il mondo. La maggioranza di tutti i colpi risultare da un'interruzione nel flusso sanguigno (ischemia) 1. Dell'arteria cerebrale media (MCA) offre una grande maggioranza di sangue alla superficie laterale della corteccia 2, è il sito più comune di ictus 3 umano, e ischemia nel suo territorio può causare un'estesa erettile o morte 1,4,5. I sopravvissuti di ictus ischemico spesso soffrono di perdita o rottura delle capacità motorie, deficit sensoriali, e infarto. Nel tentativo di catturare queste caratteristiche chiave della corsa, e in tal modo sviluppare un trattamento efficace, molta enfasi è posta su modelli animali di ischemia in MCA.
Qui vi presentiamo un metodo di occludere in modo permanente un vaso sanguigno corticale superficiale. Saremo presenti con questo metodo con un esempio di un rilevante occlusione nave che modella il tipo più comune, la posizione e outcome di ictus umana, occlusione dell'arteria cerebrale permanente (pMCAO). In questo modello, abbiamo chirurgicamente esponiamo MCA nel ratto adulto e successivamente occludere con doppia legatura e resezione del vaso. Questo pMCAO blocca il ramo corticale prossimale MCA, causando ischemia in tutti MCA territorio corticale, una grande porzione della corteccia. Questo metodo di occlusione può essere utilizzato anche per occludere porzioni più distali dei vasi corticali per conseguire ischemia focale più mira una regione più piccola di corteccia. Gli svantaggi principali di pMCAO sono che la procedura chirurgica è alquanto invasiva poiché è richiesta una piccola craniotomia per accedere MCA, sebbene questo provoca danni tissutali minimi. I vantaggi principali di questo modello, tuttavia, sono: il sito di occlusione è ben definita, il grado di riduzione del flusso sanguigno è coerente, funzionale e compromissione neurologica avviene rapidamente, dimensioni dell'infarto è coerente, e l'elevato tasso di sopravvivenza a lungo permette valutazione cronica termine.
Introduzione
Al fine di indurre condizioni di ischemia che imitano efficacemente ictus ischemico umano, vari modelli ictus animali sono ampiamente utilizzati, con diversi volumi di infarto risultanti. Nel modello photothrombotic, il cervello viene irradiato attraverso il cranio intatto utilizzando illuminazione laser dopo l'iniezione endovenosa di una sostanza fotosensibile (come rosa bengala), con conseguente coagulazione fotochimica, ostruzione dei vasi irradiati, ischemia e nel tessuto circostante 6, 7. Photothrombosis può portare a molto piccole, le regioni isolate di infarto ed è tipicamente utilizzato come mezzo di modellazione "mini-ictus", o "micro-ictus". ....
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Protocollo
1. Per iniziare: Strumenti chirurgici richiesti
Vedere la Figura 4
- Trapano dentale (Kavo Dental Equipment, Modello: UMXL-TM), 2-bit trapano, trapano e 3 bit
- Aghi ipodermici Due ~ 30 gauge
- Seghettato pinzette, curvo punta opzionale (può essere utile ma non essenziale)
- Due belle pinzette punta
- tronchesi
- Filo di sutura
- Micro forbici
2. Creazione della finestra chirurgica
- Anestesia: Le procedure sono in conformità con le linee guida NIH e sono stati approvati da UC Irvine cura degli animali e del Comitato Usa. ....
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Risultati
Occlusione di successo di una nave può essere confermata utilizzando laser speckle di imaging (LSI), tra le altre tecniche di imaging del flusso sanguigno. Flusso sanguigno nei principali rami corticali di MCA deve scendere a ~ 25% del valore basale o meno seguente occlusione seconda del livello di rumore nel sistema di registrazione e la sensibilità della tecnica. Vedi Figura 3 per un'immagine rappresentativa LSI di un segmento di un ramo corticale di MCA prima e dopo MCA occlusion.......
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Discussione
Questo protocollo è stato sviluppato per indurre ischemia all'interno della corteccia roditore, e di farlo con il minimo impatto periferico a soggetti sperimentali. La doppia occlusione e metodo transezione permette la conferma visiva che la nave è stata occlusa modo permanente, e possono essere eseguite senza invasione eccessiva o danni ai tessuti, e con un alto tasso di sopravvivenza. Questo protocollo occlusione può essere applicato a qualsiasi imbarcazione corticale che si può accedere mediante craniotomia per i.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare in questo momento.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla American Heart Association Predoctoral Fellowship 788.808-41.910, il NIH-NINDS NS-NS-066.001 e 055.832, e il Center for Hearing Research Training NIH di Grant 1T32DC010775-01.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Pinze Graefe extra fini - Punte da 0,5 mm Curva leggera (1) | Fine Science Tools | 11151-10 | |
| Pinze Dumont #5 rivestite in ceramica (2) | Fine Science Tools | 11252-50 | |
| Forbici Bonn extra fini, dritte (1) | Fine Science Tools | 14084-08 | |
| Aghi da sutura rotondi 3/8 (16 mm) | Fine Science Tools | 12050-02 | |
| 6-0 Seta intrecciata Strumenti di sutura | le scienze NC9071061 < | br/> Harvard Apparatus No.:510461 | |
| ago da 30 gauge, ½ " lunghezza | Fine Science Tools | NC9867376 No.: ZT-5-030-5-L/COL |
Riferimenti
- Caplan, L. R. Caplan's Stroke, A Clinical Approach. , 4th edn, Saunder's & Elsevier. (2009).
- Blumenfeld, H. Neuroanatomy Through Clinical Cases. , Sinauer Associates. (2002).
- Roger, V. L., et al. Heart Disease and Stroke Statistics--2011 Update: A Report From the American Heart Assoc....
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Ristampe e permessi
