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Articolo metodologico

Costruzione di un microscopio ad alta risoluzione con convenzionali e Holographic Capabilities intrappolamento ottico

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DOI:

10.3791/50481

22 aprile 2013

In questo articolo

Sommario

Il sistema qui descritto impiega una trappola ottica tradizionale e una linea intrappolamento ottico olografico indipendente, capace di creare e manipolazione di più trappole. Questo consente la creazione di complessi arrangiamenti geometrici di particelle di rifrazione e che permetta ad alta velocità misurazioni simultanee, ad alta risoluzione della attività degli enzimi biologici.

Abstract

Sistemi microscopio ad alta risoluzione con trappole ottiche consentono di intervenire precisa di vari oggetti rifrazione, come dielettrici perline uno o organelli cellulari 2,3, nonché per lettura ad alta risoluzione spaziale e temporale della loro posizione rispetto al centro della trappola. Il sistema qui descritto presenta uno di tali "tradizionale" trappola operante a 980 nm. Esso fornisce inoltre un secondo sistema intrappolamento ottico che utilizza un pacchetto olografico disponibile in commercio per creare e manipolare simultaneamente schemi di cattura complessi nel campo visivo del microscopio a 4,5 ad una lunghezza d'onda di 1064 nm. La combinazione dei due sistemi permette la manipolazione di oggetti multipli refrattivi allo stesso tempo mentre condurre simultaneamente misure ad alta risoluzione di moto e di produzione di forza a scala nanometrica e piconewton alta velocità e.

Introduzione

Intrappolamento ottico è una delle tecniche chiave in biofisica 6. Un avanzamento cruciale intrappolamento ottico è stato lo sviluppo di trappole olografici che consentono la creazione di modelli di intrappolamento tridimensionali anziché trappole point convenzionali 7. Queste trappole olografiche possiedono il vantaggio di versatilità nel posizionamento di oggetti rifrazione. Tuttavia trappole convenzionali possono essere facilmente allineate per essere più simmetrica rispetto commercialmente disponibili kit olografiche. Permettono anche per un veloce monitoraggio preciso degli oggetti intrappolati. Qui si descrive un sistema (Figura 1)....

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Protocollo

1. Installazione di 980 nm Lunghezza d'onda singola trappola ottica

  1. Intrappolamento ottico a 980 nm di lunghezza d'onda è spesso ottimale sono facilmente disponibili con potenza di uscita alto come 300 mW esperimenti di biofisica e diodi laser poco costoso. È preferibile per un laser a diodi ad essere Pigtailed con polarizzazione-preserving fibra monomodale con un diametro del campo modalità noto. La fibra deve essere sufficientemente lungo per agire come filtro modalità e tipicamente è terminato sia con FC / PC o connettore FC / APC. Di questi, FC / APC è preferibile per minimizzare riflessione posteriore di instabilità di feedback chiari e potenz....

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Risultati

La configurazione assemblata permette all'operatore di intrappolare più oggetti rifrazione in tempo reale e posizionarli in tre dimensioni all'interno del campo di vista. Illustriamo le capacità olografiche dello strumento intrappolando 11 microsfere (Figura 2). La trappola confinare ogni oggetto è ricreare manualmente posizionato su di intrappolare in modo che la disposizione finale raffigura il logo della University of Utah, dove è stato eseguito questo esperimento. Una funzione combinata di t.......

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Discussione

Abbiamo costruito uno strumento che combina due trappole ottiche di tipo diverso (Figura 1) per fornire strutture trapping separate per manipolazione di oggetti e misura. La trappola ottica "convenzionale" è costruito intorno a un laser a diodo 980 nm. Questo fascio viene espanso, guidato e poi iniettato nel nostro microscopio invertito ("luce rossa" trave in Figura 1). La trappola ottica olografica è costruito intorno a un nm DPSS laser a 1.064. Il fascio viene espa.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Finanziamento è stato fornito dalla University of Utah. Vorremmo ringraziare il Dott. J. Xu (UC Merced) e il Dr. Reddy BJN (UC Irvine) per le discussioni utili.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Tavolo otticoNewport corporationST-UT2-56-8Irvine, CA
Microscopio, invertito, Eclipse TiNikon USAMEA53220Melville, NY
Obiettivo ad olio Plan apo 100X (1.4 NA)Nikon USAMRD01901Melville, NY
Condensatore ad olio Lente 1.4 NANikon USAMEL41410Melville, NY
Fotocamera EMCCDTecnologia Andor USAIxon DU897South Windsor, CT
1/3" CCD IEEE1394 fotocameraNET USA IncFoculus FO124SCHighland IN
Laser, TEM00, SLM, lunghezza d'onda 1.064 nmKlastech Laser TechnologiesSenza-1064-1000Dortmund;
Germania diodo laser, TEM00, SLM, 980 nmAxcel PhotonicsBF-979-0300-P5AMarlborough,
MA montaggio diodo laserILX LightwaveLDX-3545, LDT-5525 e LDM-4984Bozeman,
MT porte in fibra regolabiliThorlabsPAF-X-11-BNewton, NJ
sistema olograficoArryxHOTKIT-ADV-1064Chicago, IL
olografico specchioBoulder Sistemi non lineariquesta è una parte di HOTKIT-ADV-1064Lafayette, CO
Calcite polarizzatoreThorlabsGL10-BNewton, NJ
piastra a semiondaThorlabsWPH05M-1064Newton,
NJ Polarizzatore di rotazione supportoThorlabsPRM1Newton, NJ
semionda piastra di rotazioneThorlabsRSP1Newton, NJ
OtturatoreThorlabsSH05Newton, specchi
dicroici NJ (DM2 & DM3); 45 gradi AOIChroma Technologyt750spxrxtBellows Falls,
specchio dicroico VT (DM1); 45 gradi AOIThorlabsDMSP1000RNewton, NJ
adattatore meccanico personalizzatoThorlabsSM1A11 e AD12F con foro interno allargatoNewton, filtro notch NJ
SemrockFF01-850/310-25Rochester, NY
Deflettore acusto-ottico (2 assi)intraActionDTD-584CA28Bellwood,
IL stadio goniometricoNew Focus9081Santa Clara, CA
Lenti di sterzo da 60 mmThorlabsLA1134-BNewton, NJ
Lente ad espansione asferica da 16 mmThorlabsAC080-016-CNewton, NJ
Lente ad espansione da 175 mmThorlabsLA1229-CNewton, NJ
Spot blocker (sfera in acciaio cabron)Bal-Tec0,0100" di diametroLos Angeles, CA
Microsfere ( Carbossil-polistirene)SpherotechCP-45-10Lake Forest, IL

Riferimenti

  1. Svoboda, K., Block, S. M. Biological applications of optical forces. Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 23, 247-285 (1994).
  2. Ashkin, A., Schutze, K., Dziedzic, J. M., Euteneuer, U., Schliwa, M. Force generation of organelle transport measured in vivo by an infrared laser trap.<....

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Ristampe e permessi

Tag

Microscopio olograficoAllineamento del fascioDiodo laserModulatore spaziale di luceEspansore di fascioSpecchio dicroicoBanco otticoOggetti rifrattiviManipolazione della trappola