L'uso di un modello che simula la condizione di malattie polmonari nell'uomo è fondamentale per lo studio della fisiopatologia e / o eziologia di una particolare malattia e per lo sviluppo di un intervento terapeutico. Ecco un metodo non invasivo intubazione endotracheale in grado di fornire direttamente i materiali esogeni ai polmoni del mouse è presentato.
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Articolo metodologico
Non invasivo intratracheale intubazione per studiare la Patologia e Fisiologia del mouse polmone
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'uso di un modello che simula la condizione di malattie polmonari nell'uomo è fondamentale per lo studio della fisiopatologia e / o eziologia di una particolare malattia e per lo sviluppo di un intervento terapeutico. Con la crescente disponibilità di knockout e transgenici derivati, insieme ad una grande quantità di informazioni genetiche, i topi forniscono una delle migliori modelli per studiare i meccanismi molecolari alla base della patologia e fisiologia delle malattie polmonari. Inalazione, instillazione intranasale, instillazione, e l'intubazione endotracheale sono le tecniche più utilizzate da un numero di investigatori per amministrare i materiali di interesse per i polmoni del mouse. Ci sono pro e contro per ogni tecnica a seconda degli obiettivi di uno studio. Ecco un metodo non invasivo intubazione endotracheale in grado di fornire direttamente i materiali esogeni ai polmoni del mouse è presentato. Questa tecnica è stata applicata ad amministrare bleomicina ai polmoni topo come modello per lo studio della fibrosi polmonare. </ P>
Introduzione
Polmone è un organo in cui molte malattie devastanti sono comunemente diagnosticati. Tra questi, il cancro del polmone è la seconda più cancro diagnosticati in uomini e donne, e la causa più comune di morte per cancro. Malattia cronica polmonare ostruttiva, noto anche come enfisema e bronchite cronica, è una malattia molto grave e la terza causa di morte negli Stati Uniti. Nel 2011, è stato stimato che 25,9 milioni di americani avevano l'asma, tra cui 7,1 milioni di bambini al di sotto dei 18 anni. L'asma è la terza causa di ospedalizzazione tra i bambini al di sotto dei 15 anni (American Lung Association, http://....
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Protocollo
Il seguente protocollo descrive un metodo non invasivo, semplice e veloce per fornire materiali di interesse per i polmoni del mouse. Tale procedura è stata approvata dalla cura degli animali e del Comitato Usa National Cancer Institute.
1. Anestesia
- Primo, anestetizzare il mouse usando una miscela di chetamina e xilazina (100 mg / kg di peso corporeo e 10 mg / kg di peso corporeo, rispettivamente). Questo è il ACUC raccomandato anestesia e dose. Con questo importo, i topi sono incosciente, almeno per ~ 20 min.
- Applicare vet unguento agli occhi del mouse per evitare l'essiccazione degli occhi durante l'anestes....
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Risultati
Inizialmente, soluzione verde-tinto è stato usato per intubare topi per la pratica. Il polmone è stato asportato immediatamente dopo l'intubazione per esaminare come uniformemente il colore è stato distribuito nel polmone (Figura 2). Questa tecnica è stata applicata per studiare la fibrosi polmonare indotta da bleomicina utilizzando C57BL / 6 topi. Quando i topi sono stati intratracheale intubati con 1,2 U / kg di bleomicina o soluzione fisiologica come controllo e necroscopia dopo 3 settimane, i to.......
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Discussione
Intubazione endotracheale qui descritto è un metodo semplice, ma ottima non invasivo per fornire in modo uniforme i materiali di interesse per il mouse del polmone. Questo metodo permette studio dell'effetto e / o il ruolo del materiale somministrato sulla fisiologia e / o patologia polmonare. I materiali possono essere somministrati molecole endogene come le citochine, o materiali esogeni, quali sostanze chimiche xenobiotiche / farmaci, sostanze cancerogene, inquinanti, allergeni, o virus che provocano varie malatt.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato dal programma di ricerca intramurale del National Cancer Institute, Center for Cancer Research.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| KetaVed | Vedco | Ketamina | |
| AnaSed Iniezione 20 mg | LLOYD | Xilazina | |
| BioLite Stand | Braintree Scientific | RIS100 | Per topi |
| Sistema di illuminazione per intubazione BioLite | Braintree Scientific | BIO MI-KIT | Per topi |
| 22 G, catetere endovenoso da 1 pollice | Terumo | SR-OX2225CA | Per topi sotto 30 g. Il catetere viene utilizzato solo nel caso in cui non venga utilizzato il sistema di illuminazione per intubazione. |
| Catetere endovenoso da 20 G, 1 pollice | Terumo | SR-OX2025CA | Per topi over 30 g. Il catetere viene utilizzato solo nel caso in cui non venga utilizzato il sistema di illuminazione per intubazione. |
Riferimenti
- Das, S., Macdonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. A simple method of mouse lung intubation. J. Vis. Exp. (73), e50318(2013).
- Miller, M. A., et al. Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis....
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Ristampe e permessi
