Articolo metodologico

Murino cervicale Cuore trapianto Modello utilizzando una tecnica Cuff Modificato

DOI:

10.3791/50753

12 ottobre 2014

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

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Il modello murino di trapianto di cuore cervicale è adatto per immunologica nonché studi danno da ischemia riperfusione. Abbiamo modificato la procedura utilizzando una tecnica bracciale non sutura ed eseguito più di 1.000 trapianti di successo con questo approccio.

Qui, forniamo ulteriori dettagli di questa tecnica per integrare il video.

Abstract

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Modelli murini sono di particolare interesse per la ricerca in quanto una grande varietà di anticorpi monoclonali e commercialmente definiti inbred e ceppi di eliminazione diretta sono a disposizione per effettuare meccanicistico studi in vivo. Mentre i modelli di trapianto di cuore utilizzando una tecnica di sutura sono stati sviluppati con successo nei ratti, la traduzione in un altrettanto diffuso equivalente murino usato non è mai stata raggiunta a causa della complessità tecnica del procedimento microchirurgico. Al contrario, le tecniche di gemelli non sutura, anche sviluppati inizialmente nei ratti, sono stati adattati con successo per l'utilizzo nei topi 1-3. Questa tecnica di rivascolarizzazione prevede due fasi principali I) eversione della nave ricevente su un bracciale in polietilene; II) tirando la nave cedente sopra la nave ricevente precedentemente estroflesso e tenendolo in posizione con un pareggio circonferenziale. Ciò garantisce una continuità dello strato endoteliale, tempo di funzionamento breve e molto elevati tassi di pervietà 4. t "> Utilizzando questa tecnica di anastomosi vascolare abbiamo effettuato più di 1.000 trapianti di cuore cervicale con un tasso di successo complessivo del 95%. Per afflusso arterioso l'arteria carotide comune e l'arco aortico prossimale sono stati anastomizzata conseguente perfusione retrograda del cuore trapiantato. Per il drenaggio venoso polmonare dell'innesto è stata anastomizzata con la vena giugulare esterna del destinatario 5.

Qui, forniamo ulteriori dettagli di questa tecnica per integrare il video.

Introduzione

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Il trapianto cardiaco rappresenta la terapia di scelta per i pazienti affetti da diverse malattie di cuore allo stadio terminale. I progressi nelle tecniche chirurgiche, più efficace profilassi delle infezioni, e nuovi regimi immunosoppressivi determinato marcatamente migliore risultato del trapianto di organi 6. Tuttavia, la sopravvivenza del trapianto a lungo termine non è migliorata con rigore negli ultimi anni 7. Rigetto cronico, caratterizzata da trapianto arteriosclerosi continua ad essere un grave ostacolo per la sopravvivenza del trapianto a lungo termine 8-11.

Il modello di trapianto cardiaco eter....

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Protocollo

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Gli animali sono alloggiati in una struttura senza barriere patogeno. Tutti gli animali ricevono cure umana nel rispetto dei "Principi di cura degli animali da laboratorio" formulate dalla Società Nazionale per la ricerca medica "e la" Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio ", preparati dalla National Academy of Sciences e pubblicata dal National Institutes of Health (NIH Publication no. 86-23, rivisto 1985). Tutti gli esperimenti sono approvati dal Ministero della Pubblica Istruzione, la Scienza e la Cultura austriaca.

1 Destinatario Preparazione

  1. Anestetizzare il destinatario animale con una iniezione im di xi....

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Risultati

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La Figura 2 mostra i dati di sopravvivenza rappresentativi di trapianti cardiaci da donatori BALB / c dopo il trapianto in pieno MHC non corrispondenti C57BL / 6 destinatari. I cuori sono respinti il ​​giorno 7 ± 1 dopo il trapianto. Finger palpazione del trapianto allogenico trapiantato è un metodo sensibile per rilevare il corso dipendente dal tempo di rigetto. Tutti i trapianti di cuore eseguiti singeniche nella nostra serie sono sopravvissuti a tempo indeterminato (> 150 giorni).

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Discussione

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Rifiuto di trapianti vascolarizzati comporta una pletora di diverse fasi che possono essere non sufficientemente valutati solo con modelli in vitro. Fenomeni come la sensibilizzazione dei destinatari, trasformazione antigeni negli organi linfoidi secondari, ma anche la differenziazione e la proliferazione delle cellule immuno-competenti sono meglio caratterizzati in vivo. I modelli animali sono quindi lo strumento ideale per la ricerca traslazionale 16. Modelli murini rappresentano ancora il.......

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Dichiarazioni

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Questo studio è stato supportato dal grant #207 del "Medizinischer Forschungsfond Tirol", grant #2010022010 del "MUI-START Förderungsprogramm" dell'Università di Medicina di Innsbruck.

Ringraziamenti

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Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Yasargil Clip Mini Permanente 7 mmAesculapFE720K
Micro clip per vasiS & TB1 00396 V
MicroforbiceFST14075-11
Dilatatore per vasiS & TD-5a.2 00125
MicropinzeFSTDumont 11271- 30
ClipapplicatorS & TCAF-4 00072
Clip per microvasiS & TB1 00396 V

Riferimenti

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  1. Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
  2. Schneeberger, S., et al.

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Tag

Trapianto di cuore murinoanastomosi vascolareprocedura microchirurgicatrapianto eterotopicoarteria carotide comunevena giugulare esternaperfusione retrogradatasso di successoimmunologia del trapianto

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