Un modello di topo standardizzato di emorragia subaracnoidea da Circolo endoluminale di Willis perforazione viene descritto. Nave di perforazione e emorragia subaracnoidea sono monitorati da un monitoraggio della pressione intracranica. Inoltre diversi parametri vitali vengono registrati e controllati per mantenere condizioni fisiologiche.
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Articolo metodologico
Un modello murino di emorragia subaracnoidea
In questo articolo
Sommario
Abstract
In questa pubblicazione il video viene presentato un modello standardizzato di topo di emorragia subaracnoidea (SAH). Bleeding è indotta da Circolo endovascolare di Willis perforazione (CWP) e provato dalla pressione intracranica (ICP) di monitoraggio. In tal modo una distribuzione omogenea di sangue negli spazi subaracnoidei che circondano la circolazione arteriosa e fessure cerebellari è raggiunto. Fisiologia degli animali è gestito da intubazione, ventilazione meccanica, e continuo monitoraggio on-line di vari parametri fisiologici e cardiovascolari: la temperatura corporea, la pressione arteriosa sistemica, frequenza cardiaca e saturazione dell'emoglobina. In tal modo la pressione di perfusione cerebrale può essere strettamente monitorati generando un volume meno variabile di sangue travasato. Questo permette una migliore standardizzazione delle endovascolare perforazione filamento nei topi e rende l'intero modello altamente riproducibile. Così è prontamente disponibile per gli studi farmacologici e fisiopatologici in wild type e geneticaly alterato topi.
Introduzione
SAH è il sottotipo corsa con il risultato meno favorevole per i pazienti: 40% dei pazienti muoiono entro un mese dopo l'emorragia 1 e sopravvissuti raramente avere un esito clinico favorevole.
La grande maggioranza di Sahs spontanei (80%) sono causati dalla rottura di aneurismi intracranici che in genere si trovano lungo la anteriore e comunicante posteriore, l'arteria basilare e dell'arteria cerebrale media (MCA) 2.
Tali aneurismi sono difficili da modellare negli animali e quindi modelli animali di SAH sono o eseguite da iniezione di sangue nello spazio / ventricoli cerebral....
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Protocollo
Tutte le procedure chirurgiche sono stati sottoposti a esame etico e approvati dal governo dell'Alta Baviera (numero di riferimento: 55.2-1-54-2532.3-13-13 e -2532-136-11). Animali sono maschio C57BL / 6 topi con un peso corporeo di circa 25 g.
1. Preparazione degli animali
- Indurre l'anestesia mettendo il mouse in una camera. Lavare la camera con il 5% isoflurano fino a quando l'animale perde conoscenza.
- Iniettare anestetici premiscelati intraperitoneale: fentanil (0,05 mg / kg), midazolam (5 mg / kg) e medetomidina (0,5 mg / kg). Controllare i riflessi prima e regolarmente durante la procedura. Reinject t....
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Risultati
Mortalità
Una volta che la tecnica chirurgica è padroneggiata la procedura non suscitare alcuna mortalità intraoperatoria. Sanguinamento può anche essere raggiunto in quasi tutti gli animali. La mortalità postoperatoria è del 30-40% con la maggior parte degli animali muore il giorno 1 dopo l'intervento chirurgico (Figura 5).
ICP valori dopo SAH
L'ICP prima del dissanguamento è di circa 4 mmHg. Sanguinamento risultati in un .......
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Discussione
Le opzioni di trattamento dopo SAH sono scarse e per lo più inefficace. Pertanto la fisiopatologia del danno cerebrale post-emorragica deve essere ulteriormente compreso per identificare nuovi bersagli terapeutici e sviluppare nuovi approcci terapeutici. Standardizzati e modelli animali ben riproducibili negli animali geneticamente modificati, ossia topi, sono cruciali per tali indagini. Il modello CWP è diventato un modello ampiamente utilizzato per SAH come assomiglia alla fisiopatologia nell'uomo vicino,.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
L'attuale ricerca è finanziata dalla Fondazione Solorz-Zak Research.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Equipment | |||
| operation microscopio | Leica | KL2500 | |
| vaporizzatore di isoflurano | Harvard Instruments | Vaporizzatore | |
| respiratore | Hugo Sachs | Minivent 845 | |
| microcapnografo | Hugo Sachs | Type 340 | |
| FHC | DC Regolatore | ||
| trapano odontoiatrico | Paggen | Labset- N | |
| Monitor ICP Monitor | Codman | Monitor ICP | |
| Monitor | AD Instruments Pompa | Bridge Amp FE221 | |
| World Precision Instruments | SP101IZ pulsossimetro | ||
| Kent | Scientific MouseSTAT | ||
| LDF | Perimed | Periflux 5000 | |
| AD Instruments | Power Lab 16/35 | ||
| Material | |||
| cement per il fissaggio della sonda ICP | Colla | Speiko Carbossilate | |
| per il fissaggio della sonda LDF | Colla cianoacrilato Bob Smith Industries (Maxi Cure e Insta Set) | ||
| catetere venoso | Johnson Johnson | Jelco catetere endovenoso alato; REF 4076 | tubo per intubazione modificato |
| per catetere femorale | Smiths Medical | Fine Bore Polythene Tubing; ID 0,28 mm, diametro esterno 0,61 mm; REF 800/100/100 | tagliato a filamento di 30 cm di lunghezza |
| per la perforazione del vaso | Ethicon | Prolene 5-0 | tagliato a 12 mm di lunghezza |
| attrezzatura chirurgica | Fine Scientific Instruments | pinza medica #5, forbici per vasi 8 cm, microclip ganascia | |
Riferimenti
- Cahill, J., Zhang, J. H. Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction. Stroke. 40, 86-87 (2009).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. Lancet. 369, 306-318 (2007).
- Lin, C. L., et al.
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Ristampe e permessi
