Articolo metodologico

Crescente aortica Costrizione in ratti per la creazione di sovraccarico di pressione cardiaca Ipertrofia Modello

DOI:

10.3791/50983

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29 giugno 2014

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1Cardio Vascular Disease Biology, Rajiv Gandhi Centre for Biotechnology, 2Animal Research Facility, Rajiv Gandhi Centre for Biotechnology, 3Cardiology Department, Sree Chitra Tirunal Institute for Medical Sciences & Technology

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

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Descriviamo una procedura graduale per la creazione di sovraccarico di pressione e ipertrofia ventricolare sinistra in ratti Wistar dalla costrizione dell'aorta ascendente con una piccola clip metallica. Questo modello è ampiamente utilizzato per studiare i cambiamenti di rimodellamento durante l'ipertrofia cardiaca e per identificare e valutare le strategie per la regressione di tali cambiamenti.

Abstract

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Crescente costrizione aortica è il modello chirurgica più comune e di successo per la creazione di sovraccarico di pressione indotta ipertrofia cardiaca e insufficienza cardiaca. Qui, descriviamo una procedura chirurgica dettagliata per la creazione sovraccarico di pressione e ipertrofia cardiaca in ratti mediante costrizione dell'aorta ascendente con una piccola clip metallica. Dopo l'anestesia, la trachea è intubato inserendo una cannula attraverso un'incisione a metà strada tra due anelli di cartilagine trachea. Poi una incisione cutanea viene effettuata a livello del secondo spazio intercostale sulla parete toracica sinistra e strati muscolari vengono cancellati per identificare la parte ascendente dell'aorta. L'aorta ascendente viene costretto a 50-60% del suo diametro originale mediante applicazione di una piccola clip titanio dimensioni. A seguito di costrizione aortica, la seconda e terza costola vengono approssimate con punti di sutura prolene. La cannula tracheale viene rimossa la respirazione spontanea una volta è stata ristabilita. L'animale è permesso di recuperare on per il rilievo di riscaldamento abbassando gradualmente anestesia. L'intensità del sovraccarico di pressione creata dalla costrizione dell'aorta ascendente è determinato registrando il gradiente di pressione utilizzando transtoracica bidimensionale Doppler-ecocardiografia. Nel complesso questo protocollo è utile per studiare gli eventi di rimodellamento e le proprietà contrattili del cuore durante la graduale insorgenza e la progressione da compensata ipertrofia cardiaca allo stadio di insufficienza cardiaca.

Introduzione

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Modelli piccoli animali sono gli strumenti più preferite per lo studio dei cambiamenti cronici nello sviluppo di ipertrofia cardiaca e la sua progressione a insufficienza cardiaca. Modelli di insufficienza cardiaca con metodi chirurgici sono stati originariamente sviluppati in ratti in quanto questi animali sono più adatti per interventi chirurgici al torace aperto, ecocardiografia e la valutazione dei parametri emodinamici. Essi forniscono inoltre adeguate campioni post mortem di tessuti, cellule e gli studi a livello molecolare 1. Costrizione dell'aorta ascendente è uno dei modelli chirurgiche più comuni e di successo per la creazione di sovraccarico....

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Protocollo

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Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti dopo aver ottenuto l'approvazione del Comitato Etico Animal Istituzionale. Ratti Wistar sono stati alloggiati in un buio 12 ore al ciclo di luce, temperatura costante (24 ± 2 ° C), con cibo e acqua ad libitum (secondo le linee guida CPCSEA).

1) Assistenza pre-operatoria e anestesia

  1. Tenere rat (circa 200 g di peso corporeo), sotto antibiotico ombrello 24 ore prima dell'intervento chirurgico con la somministrazione di amoxicillina per via orale (dose: 500 mg / L di acqua).
  2. Sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici (come forbici, pinze, clip applicatore, aghi da....

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Risultati

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Nei nostri esperimenti siamo in grado di raggiungere oltre il 80% i tassi di sopravvivenza. L'efficacia di costrizione aortica è stata confermata eseguendo ecocardiografia Doppler. Ratti (n = 6) con un gradiente di pressione di circa 60 mm di Hg nel sito ristretta aortica sono stati osservati per 8 settimane e sacrificato per analizzare lo sviluppo di ipertrofia cardiaca (Figura 1). Dopo 8 settimane di valutazione ecocardiografica post-chirurgia ha rivelato un significativo aumento dei parametri ventric.......

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Discussione

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Ci sono diversi modelli chirurgici per l'induzione di sovraccarico di pressione e ipertrofia cardiaca e scompenso cardiaco. In piccoli animali, Lorell e colleghi hanno sviluppato il modello che abbiamo descritto qui ed hanno segnalato la comparsa di ipertrofia cardiaca compensata 8 settimane dopo banding aortico 5. Alterazioni cardiache gradualmente progredire a uno stato scompensata e poi portare a insufficienza cardiaca. Il vantaggio principale di questo modello è la graduale insorgenza di aumento della.......

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Dichiarazioni

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Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

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Gli autori riconoscono Dipartimento di Biotecnologie, Governo dell'India per il sostegno finanziario di questo progetto. Ajith Kumar GS è stato sostenuto con borsa di ricerca senior Consiglio di ricerca scientifica e industriale, Governo dell'India e Binil Raj con assegno di ricerca senior Consiglio indiano di ricerca medica, Governo dell'India.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Rattimantenuti presso ARF, RGCB
Sistemi di anestesia per inalazioneVetEquipAB19276
Ventilatore per roditoriCWE IncSAR- 830/AP 
Cannula tracheale per rattoCWE Inc13-21032
EcografoPhilipsHD7
Trasduttore ecograficoPhilipsS 12
Clip in titanio (piccola)Horizon1204
Applicatore di clipWeck137081
Rasoio elettricoVinverthVBT0817
Lama BP (dimensioni: 11)ChirurgoREF10111Preparazione del sito chirurgico
TramadolOrchid assistenza sanitariaOCH043
Amoxicillina cloridratoRanbaxy
IsofluranoPiramal assistenza sanitariaA23M10A
siringheBD2015-09
4-0 seta intrecciataDiamante
3-0 proleneJohnson& JohnsonNW018
Nastro chirurgicoRomsonsSH 6301
Iodio povidoneWin Medicare
Temp. termoforo controllatoFlamingoHC1003
Wistar

Riferimenti

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  1. Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).
  2. Weinberg, E. O., et al.

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Tag

Procedura chirurgica su rattoapplicazione di clip in titaniointubazione trachealeecocardiografia Dopplerapprossimazione costalerecupero postoperatoriostudio dello scompenso cardiaco

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