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Articolo metodologico

Umana Cartilagine Tessuto Fabrication Uso tridimensionale Tecnologia Inkjet Printing

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DOI:

10.3791/51294

10 giugno 2014

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

I metodi descritti in questo documento mostrano come convertire una stampante a getto d'inchiostro di commercio in un bioprinter con polimerizzazione UV simultanea. La stampante è in grado di costruire la struttura del tessuto 3D con cellule e biomateriali. Lo studio ha dimostrato qui costruito un neocartilage 3D.

Abstract

Bioprinting, che si basa sulla stampa a getto d'inchiostro termico, è una delle tecnologie abilitanti più interessanti nel campo dell'ingegneria dei tessuti e medicina rigenerativa. Con cellule di controllo digitale, ponteggi e fattori di crescita possono essere depositati esattamente alla desiderata bidimensionale (2D) e tridimensionali (3D) riprese rapidamente. Pertanto, questa tecnologia è un approccio ideale per fabbricare tessuti mimano loro strutture anatomiche native. Al fine di progettare la cartilagine con l'organizzazione nativo zonale, composizione della matrice extracellulare (ECM), e le proprietà meccaniche, abbiamo sviluppato una piattaforma bioprinting utilizzando una stampante a getto d'inchiostro commerciale con fotopolimerizzazione contemporanea capace per 3D cartilagine ingegneria dei tessuti. Condrociti umani sospesi in poli (glicole etilenico) diacrilato (PEGDA) sono stati stampati per la costruzione neocartilage 3D via assemblaggio layer-by-layer. Le cellule stampati sono stati fissati sui loro posizioni originali depositati, sostenuto dal ampliata daFINANZIAMENTO impalcatura in fotopolimerizzazione simultanea. Le proprietà meccaniche del tessuto stampato erano simili alla cartilagine nativa. Rispetto alla fabbricazione tessuto convenzionale, che richiede l'esposizione UV più, la vitalità delle cellule stampati con fotopolimerizzazione simultanea era significativamente maggiore. Neocartilage Stampato dimostrato eccellente glicosaminoglicani (GAG) e la produzione di collagene di tipo II, che era coerente con l'espressione genica. Pertanto, questa piattaforma è ideale per la distribuzione delle cellule accurate e arrangiamento per l'ingegneria tissutale anatomica.

Introduzione

Bioprinting basata sulla stampa a getto d'inchiostro termico è una delle tecnologie abilitanti più promettenti nel campo dell'ingegneria dei tessuti e medicina rigenerativa. Con controllo digitale e high throughput testine fattori cellule, scaffold, e crescita possono essere depositati esattamente alla desiderata bidimensionale (2D) e (3D) posizioni tridimensionali rapidamente. Molte applicazioni di successo sono stati realizzati con questa tecnologia in ingegneria dei tessuti e medicina rigenerativa 1-9. In questo lavoro, una piattaforma bioprinting è stato istituito con una Hewlett-Packard (HP) Deskjet 500 stampante a getto d'inchiostro termi....

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Protocollo

1. Bioprinting Platform Establishment

La modifica stampante è basata su una stampante a getto d'inchiostro termico HP Deskjet 500 e HP 51626a cartuccia di inchiostro nero.

  1. Rimuovere il coperchio di plastica superiore della stampante e con attenzione rimuovere il pannello di controllo dal coperchio.
  2. Staccare i 3 cavi di collegamento tra la parte superiore della stampante e base. Rimuovere la parte superiore della stampante dalla base.
  3. Sulla parte superiore della stampante, rimuovere la piccola plastica e gomma accessori (sistema di pulizia delle testine di stampa) a destra sotto la cartuccia di inchiostro....

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Risultati

La stampante a getto d'inchiostro termico modificato era capace di cellule e scaffold deposizione ad alta velocità e la vitalità delle cellule eccellente. Unendo con fotopolimerizzazione simultanea e biomateriali fotosensibili, questa tecnologia è in grado di fissare le cellule e altre sostanze stampati nelle posizioni inizialmente depositati. Secondo le proprietà della stampante a getto d'inchiostro termica modificato, la risoluzione di stampa 2D era 300 dpi con un unico volume goccia d'inchiostro di 130 pl.......

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Discussione

Questo sistema bioprinting 3D con capacità di fotopolimerizzazione simultaneo offre una risoluzione di stampa significativamente maggiore rispetto il miglior metodo precedentemente riportato nella stampa situ dei difetti osteocondrali con siringa estruso un idrogel alginato cellulare 16. Maggiore risoluzione di stampa è particolarmente critico per l'ingegneria tissutale della cartilagine per ripristinare il anatomico cartilagine organizzazione zonale. Fotopolimerizzazione simultanea dura.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno alcun interesse finanziario in questo studio.

Ringraziamenti

Gli autori desiderano ringraziare il sostegno da parte del New York Capital Region Research Alliance Grant.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Stampante a getto d'inchiostro termico HP Deskjet 500Hewlett-PackardC2106aFuori produzione. Acquistato ricondizionato da un venditore online.
Cartuccia d'inchiostro nero HPHewlett-Packard51626a
Lampada a raggi ultraviolettiUVPB-100AP
Misuratore di luce UVStrumenti generaliUV513AB
Microscopio a scansione laser Zeiss LSM 510Carl ZeissLSM 510
Dulbeccos Modified Eagles Medium (DMEM)Mediatech10-013
Penicillina-streptomicina-glutammina (PSG)Invitrogen10378-016
Reagente di dissociazione cellulare accutasiInvitrogenA11105-01
Soluzione salina tamponata con fosfato (PBS)Invitrogen10010-023
Kit di vitalità/citotossicità viva/mortaInvitrogenL-3224
Poli(glicole etilenico) diacrilato (PEGDA)Glycosan BiosystemsGS700
Irgacure 2959Ciba Specialty ChemicalsI-2959
Condrociti articolari umaniLonzaCC-2550

Riferimenti

  1. Cui, X., Boland, T. Human microvasculature fabrication using thermal inkjet printing technology. Biomaterials. 30, 6221-6227 (2009).
  2. Cui, X., Breitenkamp, K., Finn, M. G., Lotz, M., D'Lima, D. D. Direct human cartilage repair using three-dimensional bioprinting....

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Ristampe e permessi

Tag

Bio-stampa 3D di tessutiStampante inkjet termicaFotopolimerizzazione simultaneaCondrociti umaniScaffold in PEGDAAssemblaggio layer-by-layerMicroscopia confocaleColorazione istologicaSaggio di vitalità cellulareProduzione di glicosaminoglicani