Articolo metodologico
Drosophila melanogaster sono utili per studiare le manipolazioni genetiche o ambientali che influenzano i comportamenti come l'attività locomotoria spontanea. Qui si descrive un protocollo che utilizza il monitor con raggi infrarossi e software di analisi dei dati per quantificare l'attività locomotoria spontanea.
Drosophila melanogaster è stato utilizzato come un ottimo organismo modello per studiare le manipolazioni ambientali e genetici che influenzano il comportamento. Un tale comportamento è l'attività locomotoria spontanea. Qui si descrive il protocollo che utilizza monitor popolazione Drosophila e un sistema di monitoraggio che consente il monitoraggio continuo dell'attività locomotoria spontanea di linea per diversi giorni alla volta. Questo metodo è semplice, affidabile e obiettivo e può essere utilizzato per esaminare gli effetti dell'invecchiamento, sesso, variazioni nel contenuto calorico degli alimenti, aggiunta di farmaci o manipolazioni genetiche che mimano malattie umane.
Moscerini della frutta, Drosophila melanogaster, sono stati utilizzati come organismo modello prezioso per studiare i meccanismi alla base di comportamenti complessi, quali l'apprendimento e la memoria, l'interazione sociale, l'aggressività, abuso di droghe, il sonno, la funzione sensoriale, corteggiamento e accoppiamento 1,2. Un comportamento che è stato studiato attraverso molteplici protocolli è l'attività locomotoria spontanea. Geotassi negativo è stato uno dei primi metodi sviluppati per la misurazione dell'attività Drosophila, e questo protocollo prevede la misura la percentuale di mosche che raggiungono una cert....
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Nota: Il ceppo Canton-S è la linea di fondo wild-type standard ottenuta da Bloomington Stock Center.
1. Preparazione Cibi e Ricetta per 1.000 ml di Alimenti
Nota: Questa sezione descrive il protocollo per la preparazione dei cibi. Grandi vasi metallici sono usati per preparare circa 18 L di cibo alla volta. Il protocollo qui descritto viene ridimensionato e utilizza 1.000 ml H 2 O. Il cibo è autoclavato due volte.
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L'attività locomotoria spontanea in Drosophila dipende fly genere (Figura 3A), il contenuto calorico del cibo (Figura 3B) e il ciclo luce / buio. Una volta che la luce è spenta attività mosca diminuisce drasticamente. Figura 3A mostra 24 ore di registrazioni di attività locomotoria di mosche maschili e femminili. Un asterisco sul asse x segna il momento in cui la luce era spenta e la transizione al ciclo di buio. Figura 3B illustra la.......
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Attività locomotoria spontanea di mosche è influenzato da molti fattori quali l'età, background genetico, e di genere 2,13,18,19. Inoltre, fattori ambientali come il contenuto calorico del cibo, temperatura dell'ambiente, l'aggiunta di diversi farmaci, e il giorno / notte ciclo di luce possono influenzare l'attività mosca. Per esempio, mosche maschio della stessa età hanno una maggiore attività fisica spontanea rispetto alle femmine (Figura 1). Pertanto, in linea della stessa .......
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Non abbiamo nulla da rivelare.
Questo lavoro è stato sostenuto da una sovvenzione da parte del National Institutes of Health (AG023088 a BR).
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Saccarosio FCC per uso alimentare 100 libbre, | Fisher Scientific MP Biomedicals | ICN90471380 | |
| Brewer' s Lievito | Fisher Scientific MP Biomedicals | ICN90331280 | |
| Drosophila Agar Fine | SciMart | DR-820-25F | |
| Farina di mais | Fisher Scientific MP Biomedicals | ICN90141125 | |
| Metil4-idrossibenzoato, tegosept | Sigma | H5501-5KG | |
| EtOH | Pharmco-AAPER | 111000200 | |
| Lievito Secco Attivo | Fisher Scientific | ICN10140001 | |
| Fly CO2 pad | LabScientific | BGSU-7 | |
| Stereomicroscopio | Olympus | SZ40 | |
| Drosophila anidride carbonica (CO2) serbatoio | Airgas | UN1013 | |
| Pennello piccolo per spingere le mosche | |||
| Tappo a guscio largo | Fischer Scientific | AS519 | |
| Buzzplugs per fiale in plastica larghe | Fischer Scientific | AS275 | |
| Fiale in vetro (25 x 95 mm) | Fischer Scientific Kimble 60931-8 | AS-574 | |
| Tappi in spugna per fiale in vetro | SciMart | DR-750 | |
| Drosophila Food Dispenser | Applied Scientific (Fischer Scientifico) | AS780Q | |
| DPM Drosophila Population Monitor | Trikinetics Inc. | ||
| Alimentatore CC con cavo di linea | Trikinetics Inc. | ||
| PSIU9 L'unità di interfaccia dell'alimentatore | Trikinetics Inc. | ||
| Cavi telefonici e splitter a 5 vie | Trikinetics Inc. | ||
| Hardware USB (Universal Serial Bus) | Trikinetics Inc. | ||
| Macintosh o PC Windows con porta | |||
| Software di acquisizione dati DAMSystem308X per Macintoch OSX (Intel) | www.trikinetics.com | ||
| Software di acquisizione dati DAMSystem308 per PC Windows (XP/Vista/7) | www.trikinetics.com | ||
| [header] | |||
| Software DAMFileScan108X per Macintosh | |||
| Software DAMFileScan108X per PC Windows (XP/Vista/7) | www.trikinetics.com | ||
| Software USB (PSIUdrivers.zip) | www.trikinetics.com | ||
| DAMSystem Notes 308 | (http://www.trikinetics.com/Downloads/DAMSystem%20Notes%20308.pdf |
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