Renale ischemia riperfusione: un modello murino di infortuni e rigenerazione

Sommario

Il modello murino di danno da riperfusione per ischemia renale qui descritto comprende una nefrectomia destra che fornisce il tessuto di controllo e il bloccaggio del peduncolo renale sinistro per indurre ischemia che provoca danno renale acuto. Questo modello utilizza un approccio laparotomico della linea mediana con tutti i passaggi eseguiti tramite un'unica incisione.

Abstract

Renale lesioni ischemia riperfusione (IRI) è una causa comune di danno renale acuto (AKI) nei pazienti e occlusione del flusso ematico renale è inevitabile durante il trapianto renale. Modelli sperimentali che accurato e riproducibile ricapitolano renale IRI sono fondamentali per sezionare la fisiopatologia di AKI e lo sviluppo di nuovi agenti terapeutici. Presentato ecco un modello murino di insufficienza renale IRI che si traduce in riproducibile AKI. Ciò è ottenuto mediante un approccio mediano laparotomia per la chirurgia con una incisione che consente sia una nefrectomia destra che fornisce tessuto di controllo e bloccaggio del peduncolo renale sinistra per indurre ischemia del rene sinistro. Con un attento monitoraggio della posizione di arresto e la temperatura corporea durante il periodo di ischemia questo modello raggiunge pregiudizio funzionale e strutturale riproducibile. I topi sacrificati 24 ore dopo l'intervento chirurgico dimostrare la perdita della funzione renale con elevazione del siero o livello di creatinina plasmatica e strutturadanno renale turale con evidente tubulare acuta necrosi. La funzione renale migliora e il danno tissutale acuto si risolve nel corso di 7 giorni IRI renali tale che questo modello può essere utilizzato per studiare la rigenerazione renale. Questo modello di renali IRI è stato utilizzato per studiare la fisiopatologia molecolare e cellulare di AKI così come l'analisi della successiva rigenerazione renale.

Introduzione

Ischemia riperfusione (IRI) è un modo comune di lesioni per più organi, tra cui il rene, cuore e cervello. Renale IRI può portare a insufficienza renale acuta (AKI) nei pazienti e nessun trattamento specifico è disponibile. AKI come risultato di IRI ha una patogenesi complessa che coinvolge sia la risposta immunitaria innata e ^1. Un modello sperimentale di renale IRI offre il potenziale per sezionare le celle chiave e mediatori coinvolti nella patogenesi di AKI nonché la rigenerazione renale conseguenti che ne consegue nei giorni successivi. Inoltre, gli effetti dei nuovi agenti terapeutici su processi patologici possono essere valutati.

Protocollo

NOTA:. Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e regolamenti imposti dalle Animals (Scientific Procedures) Act 1986 le procedure sono state condotte utilizzando (autoclave), strumenti e materiali di consumo chirurgici sterili. Mentre il modello murino di renale IRI presentato qui è stato eseguito su un 8 settimane di età maschio topo BALB / c può essere riproducibile eseguita su una varietà di ceppi murini di qualsiasi genere tipicamente di età compresa tra 7 - 15 settimane con l'essere età ottimale 8 settimane. I dati presentati nella sezione dei risultati rappresentante è stato ottenuto sia da Balb / c e topi FVB. L....

Risultati

Danno tubulare e di recupero possono essere valutati da H & E o PAS colorazione di sezioni di tessuto seguenti renale IRI. Tubuli ubicati nella OSOM sono classificati come sani, feriti, necrotico o di recupero secondo la morfologia cellulare, l'integrità e il numero di nuclei (Figura 1). La lesione funzionale e strutturale in questo modello dipende dalla durata di ischemia. Un progressivo aumento della gravità della disfunzione renale, valutata mediante creatininemia e BUN, è evidente come la durata.......

Discussione

Renale IRI è una causa importante di AKI senza alcun trattamento specifico. Lo studio sperimentale renale IRI è altamente informativo con il lavoro precedente e dimostrano il ruolo dei macrofagi, cellule dendritiche, linfociti, cellule T regolatorie nonché altre cellule e mediatori nell'induzione sia della lesione acuta e guarigione fase ^{5,8 - 16.} Inoltre, sperimentale IRI renale è stato utilizzato per valutare l'effetto di vari agenti terapeutici ^4,17-19.

Il mo.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Forbici per tessuti	Fine Science Tools	14072 - 10
pinze Micro-Adson (dentate per ratti)	Fine Science Tools	11019 - 12
S& T JFA-5bTC Pinze - Strumenti angolati SuperGrip	per le scienze fini	00649-11
Divaricatore Colibri	Strumenti per le scienze Fini	17000 - 04
Applicatore di micro clip	Strumenti per le scienze fini	18057-14
Micro serrafines	Fine Science Tools	18055-04
Porta aghi Olsen-Hegar	Fine Science Tools	12002 - 12
clip di legatura Hemoclip Plus Sistema di clip avvolte Autoclip 533837
Weck piccolo, 9 mm	Harvard Apparatus	PY2 52-3748
Sutura intrecciata nera in seta, misura 6-0	Harvard Apparatus	723288
calore standard
Coperta Omeoretermica & Unità di controllo	Harvard Apparatus
Lacri-Lube	Allergan
Vetasept Clorexidina	AnimalCare
Vetalar : Ketamina cloridrato			100 mg/ml soluzione
Domitore : medetomidina cloridrato			1 mg/ml
Vetergesic : Buprenorfina cloridrato			0,3 mg/ml
Antisedan : Atipamezolo idrocoreride			5 mg/ml

Matt