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Articolo metodologico

Protocollo per lo studio Extinction of Fear Condizionata in Naturalmente bicicletta ratti di sesso femminile

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DOI:

10.3791/52202

23 febbraio 2015

In questo articolo

Sommario

Gli ormoni gonadici come gli estrogeni modulano la formazione della memoria in una serie di paradigmi sperimentali, tra cui la memoria di estinzione della paura. Questo protocollo descrive una serie di metodi per studiare l'influenza degli ormoni gonadici in particolare durante l'estinzione nelle femmine in ciclo naturale, tra cui il monitoraggio del ciclo estrale e la somministrazione di estrogeni esogeni.

Abstract

Estinzione della paura condizionata è stata ampiamente studiata nei roditori maschi. Recentemente, ci sono stati un numero crescente di studi che indicano che i meccanismi neurali per determinati compiti comportamentali e comportamenti di risposta sono diversi in femmine e maschi. Utilizzando femmine in studi di ricerca può rappresentare una sfida a causa della variazione di ormoni gonadici durante il loro ciclo estrale. Questo protocollo descrive le procedure consolidate che sono utili nelle indagini il ruolo degli estrogeni nella paura consolidamento della memoria estinzione nei ratti femmina. Fase del ciclo estrale e somministrazione di estrogeni esogeni prima formazione all'estinzione può influenzare richiamo estinzione 24 ore più tardi. La tecnica swabbing vaginale per l'identificazione fase estrale descritto favorisce l'esame e la manipolazione di ciclismo naturalmente ormoni gonadici. L'utilizzo di questo modello di roditore di base può ulteriormente delineare i meccanismi attraverso i quali gli estrogeni possono modulare paura memoria estinzionefemmine.

Introduzione

Differenze di sesso inerenti si osservano in vari comportamenti cognitivi e paradigmi di apprendimento in entrambi gli esseri umani e roditori. Ad esempio, è stato riportato che le donne hanno generalmente abilità verbali e orientato al dettaglio più forti, mentre gli uomini hanno migliori abilità spaziali 1-3. Queste differenze di sesso può essere dovuto in parte l'influenza degli ormoni gonadici. Alti livelli di estradiolo migliorare le prestazioni in compiti in cui le donne sono migliori, ma peggiorano le prestazioni in compiti che gli uomini in genere fanno bene 4-6. Anche se questa prova è convincente, la limitata capacità di controllar....

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Protocollo

NOTA: Tutte le procedure di questo protocollo sono stati approvati dalla sottocommissione per la ricerca cura degli animali, che serve come la cura e l'uso degli animali Comitato Istituzionale (IACUC) per il Massachusetts General Hospital, e sono in conformità con le linee guida del National Institutes of Salute.

1. Animal Housing e procedura Handling

  1. All'arrivo, casa adulti Sprague Dawley femmine circa 8-10 settimane di età (del peso di 200-225 g) in gruppi di bidoni di plastica 3-4 pollici con biancheria da letto di cippato. A mantenere una dieta ad libitum accesso a Chow e acqua e un 12 hr luce / buio ciclo. Lasciare....

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Risultati

In questo protocollo richiamo paura dell'estinzione, per cento di congelamento è stata misurata come indicatore della paura. Gli animali che estinte bene e conservate la memoria della formazione dell'estinzione esposte basso paura l'ultimo giorno di test comportamentali durante il richiamo di estinzione. Ratti maschi e femmine non presentano differenze significative nell'espressione paura condizionata durante il condizionamento, l'estinzione, e ricordano le fasi (Figura 2). Tuttavia, una differenza di s.......

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Discussione

La paura di estinzione è stata ampiamente studiata in ratti maschi con i meccanismi neurali che mediano condizionato estinzione paura individuati e valutati in diverse manipolazioni. Relativamente pochi studi hanno esaminato topi di sesso femminile o il ruolo degli ormoni gonadici nella paura di estinzione. Per studiare specificamente gli effetti degli estrogeni sulla paura estinzione, naturalmente ciclismo ratti femmine sono sottoposti ad un paradigma comportamentale di tre giorni. Questa procedura si compone di fasi a.......

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Dichiarazioni

Gli autori di questo manoscritto non hanno interessi finanziari in competizione o altri conflitti di interesse da dichiarare.

Ringraziamenti

Mohammed R. Milad è supportato dalla sovvenzione NIMH R01 MH097880 e da fondi istituzionali del Dipartimento di Psichiatria del MGH.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Camera di condizionamento della pauraCoulbourn Instruments
Stato graficoCoulbourn Instruments
Scatola di attenuazione del suonoMed Associates, Inc.NIR-022MD
EstradioloSigma-AldrichE1024In olio di sesamo per iniezione sottocutanea
Olio di sesamoSigma-AldrichS3547-250ML
FreezescanCleversys, Inc.
Immersione macchia rapidaJorgensen Laboratories, Inc.J0322A1, J0322A2, J0322A3
Applicatori con punta in cotoneFisher Scientific23-400-1146 pollici, soluzione
salina sterile allo 0,9%LabChem, Inc.LC23460-2Cloruro di sodio con
vetrini per microscopio SelectfrostFisher Scientific12-550-003
Virex II 256Diversey, Inc.5019317Diluire 1:256 con acqua
Luer-Lok Tip 1ml SiringheBecton Dickinson309628
Aghi ipodermici monousoExelint International, Co.26402Calibro 26

Riferimenti

  1. Baron-Cohen, S., Knickmeyer, R. C., Belmonte, M. K. Sex differences in the brain: implications for explaining autism. Science. 310 (5749), 819-823 (2005).
  2. Voyer, D., Voyer, S., Bryden, M. P. Magnitude of sex differences in spatial abiliti....

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Ristampe e permessi

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Estinzione della pauraciclo estraletampone vaginalesomministrazione di estradiolostati ormonalirichiamo dell'estinzioneormoni gonadicidifferenze tra i sessi