Questo articolo dimostra procedure chirurgiche di reflusso gastroesofageo con topi. Questi modelli sono strumenti utili per la ricerca sui meccanismi e il trattamento del reflusso gastroesofageo e potenzialmente dell'esofago di Barrett e dell'adenocarcinoma esofageo.
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Articolo metodologico
I modelli chirurgici di reflusso gastroesofageo con Mice
In questo articolo
Sommario
Abstract
Sono state segnalate diverse procedure chirurgiche in grado di indurre reflusso gastroesofageo negli animali. In questo articolo, descriviamo tre modelli chirurgici con topi volti a indurre il reflusso di contenuti gastrici, contenuti duodenali o contenuti misti. Le procedure chirurgiche e i principi generali sono stati descritti in dettaglio. Un ricercatore con esperienza chirurgica dovrebbe essere in grado di comprendere la tecnica dopo un breve periodo di pratica. Dopo l'intervento, la maggior parte dei topi può sopravvivere e sviluppare una esofagite da reflusso simile a quella umana. Tuttavia, va notato che le differenze istologiche tra l'esofago del topo e quello umano sono i limiti intrinseci di questi modelli chirurgici. Se utilizzati per la ricerca sull'esofago di Barrett e l'adenocarcinoma, queste procedure potrebbero dover essere combinate con modifiche genetiche.
Introduzione
La malattia da reflusso gastroesofageo (GERD) è una malattia cronica causata dall'esposizione prolungata dell'esofago distale a contenuti gastrici o gastroduodenali1. L'esposizione prolungata a questi reflusso nocivi compromette le difese intrinseche all'interno dell'epitelio esofageo e quindi provoca esofagite2. L'esofago di Barrett si sviluppa in presenza di reflusso cronico ed è una lesione premaligna con un aumentato rischio di adenocarcinoma esofageo3,4. Nonostante l'importanza clinica, i meccanismi della GERD, dell'esofago di Barrett e dell'adenocarcinoma non sono stati ben compresi.
I modelli animali ....
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dalla cura degli animali e Usa Comitato Istituzionale.
1. Preparazione del mouse
- Utilizzare i mouse sopra ~ 20 g di peso corporeo o superiori a ~ 6 settimane di età per la chirurgia.
- Prima dell'intervento, dare topi un laboratorio chow e acqua ad libitum e mantenere su un ciclo luce-buio 00:12 h.
- Radere l'area chirurgica con un tagliatore di capelli. Anestetizzare topi mediante iniezione intraperitoneale di 80 mg / kg di ketamina e 12 mg / kg xilazina. Questa dose mette topi nel sonno in pochi minuti e fornisce anestesia sufficienti pe....
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Risultati
La maggior parte dei topi (> 95%) possono sopravvivere chirurgia. Durante il periodo perioperatorio, le principali cause di morte includono sovradosaggio di anestetici, sanguinamento e motivi sconosciuti.
Quattro settimane dopo l'intervento,> 90% topi con reflusso gastrico o reflusso misto e> 80% topi con reflusso duodeno possono sopravvivere. Durante questo periodo, i topi muoiono principalmente da stenosi esofagea e l'incapacità di mangiare. Questi topi mostrano segni di g.......
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Discussione
Vari modelli chirurgici sono stati stabiliti per imitare gastrica, duodenale e reflusso misto nei roditori. Queste tre procedure descritte sono adatte per esperimenti a lungo termine con tassi ragionevoli di sopravvivenza postoperatoria. Un ricercatore con esperienza chirurgica dovrebbe essere in grado di cogliere la tecnica, dopo un breve periodo di pratica.
Il sanguinamento può derivare da iniezione intraperitoneale di anestetici prima dell'intervento chirurgico, la lacerazione del feg.......
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Dichiarazioni
Uno degli autori (XC) ha ricevuto finanziamenti forniti da Takeda Pharmaceutical Company Ltd che supporta la ricerca di base associata alla malattia da reflusso gastroesofageo. Nessuno dei reagenti o strumenti utilizzati in questo articolo è prodotto da questa azienda.
Ringraziamenti
Siamo supportati da sovvenzioni di ricerca della National Natural Science Foundation of China (NO. 81400590), National Institutes of Health (U54 CA156735) e Takeda Pharmaceutical Company Ltd. (MA-NC-D-156).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Dumont #1 Forceps Dumostar Tip | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Clip Applying Forceps 5.5" | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Bonn Scissors 3.5" Straight 15 mm Sharp/Sharp Tungsten Carbide Blades | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Operating Scissors 5.5" Straight Sharp/Sharp SureCut | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| 4-0 Silk Black Braid 100 Yard Spool | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Surgeon's Needle 1/2 Circle Cutting Edge Size 12 (25 mm Chord Length) Pack 12 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Halsey Needle Holder 5" Smooth | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Needle Holder 5.125" Curved Lock.6 mm | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clip Applier | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clips Box Of 100 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| PRONOVA Poly (hexafluoropropylene-VDF) Suture 8-0 | Ethicon US, LLC | ||
| Ringer's solution | Henry Schein, Inc. | ||
| ketamine | Henry Schein, Inc. | ||
| xylazine | Henry Schein, Inc. |
Riferimenti
- Kandulski, A., Malfertheiner, P. Gastroesophageal reflux disease--from reflux episodes to mucosal inflammation. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9 (1), 15-22 (2012).
- Orlando, R. C. The integrity of the esophageal m....
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Ristampe e permessi
