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Articolo metodologico

Cronica Costrizione Lesioni del Rat infraorbitario Nerve (ION-CCI) per studiare trigemino Dolore neuropatico

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DOI:

10.3791/53167

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21 settembre 2015

 , 

In questo articolo

Sommario

Questo manoscritto descrive un modello di roditore per studiare il dolore neuropatico del trigemino. I metodi descritti includono procedure chirurgiche per eseguire una lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitario del ratto e i test comportamentali post-chirurgici per misurare i cambiamenti nel comportamento spontaneo ed evocato che sono indicativi di dolore persistente e allodinia.

Abstract

I modelli animali sono strumenti importanti per studiare la fisiopatologia e la farmacologia del dolore neuropatico. Questo manoscritto descrive le procedure chirurgiche e comportamentali per studiare il dolore neuropatico trigeminale nei ratti. Per soddisfare la specificità del trigemino sindromi da dolore neuropatico, il nervo infraorbitale (Ion) viene sottoposto ad una lesione costrizione cronica (CCI) dal liberamente legatura del nervo. Un approccio intra-orbitale è presentato qui per esporre e legare lo ione nella cavità orbitale. Dopo IoN legatura, ratti mostrano cambiamenti nel comportamento spontaneo e in risposta a von Frey stimolazione capelli che sono indicativi di dolore persistente e allodinia meccanica. Due fasi possono essere definite nello sviluppo dei cambiamenti comportamentali. Durante la prima settimana seguente ionico CCI (fase 1), ratti mostrano un'attività governare faccia maggiore e asimmetrica, cioè, con volto di lavaggio colpi diretta principalmente al territorio IoN nervo feriti. Viene fatta una distinzione tra il viso grooming comportamento che fa parte di un comportamento corpo governare più generale, che rimane in gran parte influenzato da ION-CCI, e faccia governare che non è né preceduta né seguita da una cura del corpo, che è significativamente aumentato dopo ION-CCI. Durante questo periodo, la reattività alla stimolazione meccanica del territorio ione è ridotta. Questo iporesponsività è bruscamente sostituito da un estremo iperreattività cui intensità di stimolo anche molto deboli provocare comportamenti nocifensive (fase 2). Le somiglianze fenomenologico tra queste alterazioni comportamentali e segnalati segni di dolore facciale (cioè, risposte a stimolazione nocicettiva del volto) suggeriscono la presenza di disestesia / parestesia e allodinia meccanica nel territorio IoN legatura.

Introduzione

Danni ai nervi somatosensoriali più spesso porta alla perdita di sensibilità. Non è molto ben compreso come e perché, in alcuni casi, danni ai nervi periferici conduce al dolore cronico. Come risultato, neuropatie dolorose rimangono una condizione difficile da trattare 1 e risultare in una riduzione sostanziale della qualità della vita dei pazienti 2-3. I modelli animali sono uno strumento importante per esaminare l'efficacia dei farmaci esistenti e di nuova concezione e di identificare i meccanismi fisiopatologici coinvolti nello sviluppo e manutenzione del dolore neuropatico. Tra le principali sfide per la ricerca sul dolore traslazionale ....

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Protocollo

Dichiarazione Etica: animali vengono trattati e curati secondo le linee guida del Comitato per la ricerca e le questioni etiche della IASP 11. Il protocollo è stato approvato dal Comitato Etico istituzionale.

1. Soggetti

  1. Utilizzare ratti maschi Sprague-Dawley (250-300 g all'arrivo).
  2. Ratti Casa in gabbie a fondo in una stanza colonia con una umidità del 40-60% e una RT di 21 ± 1 ° C.
  3. Rendere l'acqua e cibo disponibile a libitum.
  4. Tenere ratti sotto una rovesciata 00:12 h scuro ciclo / luce (luce accesa a 20 ore).

2. Chirurgia

  1. Per ratto,....

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Risultati

Ratti ION-CCI evidenziano una forte crescita post-operatoria nella quantità di tempo speso sul viso isolato governare (Figura 1). L'aumento di picchi alla fine della prima settimana post-operatorio e poi diminuisce durante le seguenti settimane. La maggior parte degli studi recenti hanno trovato faccia governare essere significativamente aumentato per un massimo di tre settimane. Faccia comportamento governare in sham operati ratti è più o meno inalterati.

Ratti ION-CCI .......

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Discussione

L'aspetto più interessante del modello ION-CCI è che esso fornisce una misura unica di spontaneo, (neuropatico) dolore non evocato. La maggior parte degli studi sugli animali di dolore neuropatico, utilizzando i modelli dei nervi spinali, si rivolgono esclusivamente comportamenti nocifensive (ad es., La vocalizzazione e le risposte di astinenza), riflettendo ipersensibilità al stimolazioni meccaniche o termiche 12. Tuttavia, la denuncia clinica principale nei pazienti è dolore in corso, non ipera.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori riconoscono il lavoro che è stato fatto dal primo autore del modello IoN-CCI, Bart Vos†.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Catgut cromicoDynek CG504
Nembutal  (pentobarbital)Farmacia
AtropinaFarmacia
Clipper per piccoli animali - Favorita IIAesculapGT104
Strumento stereotassicoStoelting51600
Unguento oftalmico (Liposic)Farmacia
Sistema di monitoraggio omeotermicoHarvard ApparatusPY8 50-7221-F
Applicatore di cotoneFarmacia
Cotton fioc di precisioneQosina10225
Microscopio operativoKapsSOM 62
Dumont #5 pinzeFine Science Tools11251-10
Pinze Dumont - Punte micro-smussate (#5/45)Fine Science Tools11253-25
Forbici - puntesmussateFine Science Tools14574-09
Suture in poliestere - Mersilene (4-0)EthiconR871H
Videocamera digitaleSonyHDR-CX330E
Semmes-Weinstein Von Frey Kit estetimetroStoelting58011

Riferimenti

  1. Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. The clinical picture of neuropathic pain. Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).
  2. Meyer Rosberg, K., et al. Neuropathic pain a multidimensional burden for patients. Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).
  3. Meyer Rosberg, K....

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Ristampe e permessi

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