Baffo-segnalato Eyeblink condizionamento classico nei topi Head-fisso

Sommario

La preparazione qui presentata per il condizionamento del battito di ciglia segnalato dai baffi nei topi con testa fissa stimola con precisione i baffi specifici, consentendo ai topi di deambulare su un tapis roulant cilindrico. Uno stimolo condizionato da stimolazione dei baffi (CS) abbinato a uno stimolo incondizionato da shock periorbitale (US) si traduce in un apprendimento associativo affidabile su questo apparato.

Abstract

Il condizionamento delle palpebre è un paradigma comune per studiare i meccanismi neurali alla base dell'apprendimento e della memoria. Per utilizzare al meglio l'ampio repertorio di tecniche scientifiche disponibili per studiare l'apprendimento e la memoria a livello cellulare, è ideale disporre di una piattaforma cranica stabile. Poiché i topi non tollerano facilmente la contenzione, di solito vengono addestrati mentre si muovono liberamente in una camera. Le informazioni sullo stimolo condizionato (CS) e sullo stimolo incondizionato (US) vengono fornite e le risposte del battito di ciglia vengono registrate tramite un cavo collegato alla testa del topo. Nell'apparato fissato alla testa qui presentato, i topi possono correre come desiderano mentre le loro teste sono fissate per facilitare la sperimentazione. Con questo apparecchio di allenamento si ottiene un condizionamento affidabile della risposta del battito di ciglia, che consente l'erogazione della stimolazione dei baffi come il CS, una scossa elettrica periorbitale come l'US e l'analisi dell'attività elettromiografica (EMG) dalla palpebra per rilevare le risposte del battito di ciglia.

Introduzione

condizionata Eyeblink è una forma di condizionamento pavloviano e un sistema modello per studiare i meccanismi neurali di apprendimento associativo e della memoria. E 'stata studiata in varie specie, compreso l'uomo, conigli, gatti, ratti e topi. Il paradigma prevede la presentazione di due stimoli appaiati: un neutrale stimolo condizionato (CS, ad esempio, un tono, un lampo di luce, o la stimolazione baffo), e uno stimolo incondizionato saliente (USA, ad esempio, un soffio d'aria per l'occhio, o scossa periorbitale). Gli Stati Uniti suscita un incondizionato, riflessiva risposta eyeblink (vale a dire, UR). Alla fine, dopo varie presentazioni del abbinato CS-USA, il soggetto impara ad associare il CS con gli Stati Uniti. Questo apprendimento si manifesta sotto forma di una risposta condizionata (CR), un eyeblink suscitato dalla sola CS che precede la presentazione degli USA.

condizionata Eyeblink sotto forma di traccia include un intervallo libero da stimoli di pochi hmillisecondi undred che separa il CS e gli Stati Uniti (Figura 1). Trace condizionata è una forma di apprendimento dichiarativa in quanto richiede la consapevolezza delle contingenze stimolo ^1. Il divario temporale richiede l'animale a mantenere un neurale 'traccia' del CS in regioni del cervello anteriore, come l'ippocampo in modo che gli Stati Uniti ed il CS di diventare associato ^1-6. Insieme con le regioni prosencefalo, tracce di condizionamento dipende anche il cervelletto ^7.

condizionata Eyeblink è, quindi, un paradigma utile per la ricerca dei molteplici aspetti di memoria, compresi l'acquisizione, il consolidamento e recupero. Durante condizionata eyeblink, un gruppo di controllo di animali è presentato con stimoli spaiati in ordine casuale per verificare pseudoconditioning o sensibilizzati risposte al CS che possono essere causati dalla presentazione Stati Uniti da soli, piuttosto che una associazione CS-US imparato.

Un appara comunemente usatoTus per l'indagine di condizionamento eyeblink nei roditori è una camera in cui i roditori sono autorizzati a muoversi liberamente durante il processo di formazione ^8-10. Con questo tipo di apparecchiatura, un tether è normalmente collegato a un casco che è apposto cranio del roditore. Il tether consente l'erogazione degli Stati Uniti (e talvolta CS) e per trasmettere la risposta dell'animale a tali stimoli (cioè, la risposta eyeblink) ^10. Il tether stesso può essere modificato in base al tipo di stimoli consegnato e come viene registrata la risposta eyeblink.

La ragione per usare "liberamente in movimento" topi legati per un condizionamento eyeblink è che i topi lotta contro la moderazione. Anche se altre specie possono essere più suscettibili di moderazione, il principale vantaggio di utilizzare topi negli esperimenti di condizionamento eyeblink è che la maggior parte dei disponibili ceppi mutanti geneticamente modificati sono ceppi di topi. Oltre alla lotta, res completiTraint di topi si traduce in difficoltà acuta. Una preparazione topo testa fissa che minimizza lo stress aumenterebbe le informazioni fisiologiche che possono essere ottenute durante il condizionamento eyeblink. Ad esempio, questo sistema permetterebbe di imaging di neuroni corticali con 2-photon microscopia a ^11.

Preparati Testa-fisso sono stati utilizzati in precedenti esperimenti di imaging ottico della corteccia attraverso protesi craniche rimovibili, in vivo registrazioni elettrofisiologiche del cervello dei roditori con array tetrodo, Calcio Imaging a due fotoni, e anche come piattaforma per il condizionamento eyeblink nei topi ^{11 -16.}

Nel sistema testa fissa, stimolazione affidabile e registrazioni sono assicurati senza completa ritegno del mouse (Figura 2). Un casco come quello utilizzato nel sistema liberamente mobile viene apposto cranio del mouse. Durante l'allenamento, la testata viene apposto un connettore che è collegato a barre suun tapis roulant cilindrica per stabilizzare la testa del roditore (Figura 2A). Il tapis roulant cilindrica permette il mouse per riposare comodamente, ma se il mouse lo desidera, permette anche l'esecuzione o camminare. Con l'uso di questo sistema, i topi possono essere formati con una vibrazione baffo come CS ed una scossa elettrica periorbitale mite come gli Stati Uniti (Figura 1). Gli Stati Uniti è espresso attraverso i fili chirurgicamente posizionati sotto la pelle laterali per l'occhio. Il CS è espresso tramite un pettine che è collegato a un 2-layer rettangolare flessione attuatore (Figura 2B). Il pettine e attuatore piegatura vengono poi attaccati ad una base magnetica che viene spostato nella posizione corretta durante la formazione ed è regolata per la consegna ottimale per ogni singolo animale. Il pettine è posizionato a cavalcare i baffi selezionati. Durante l'erogazione del CS, un segnale viene inviato all'attuatore flessione che sposta il pettine e porta alla vibrazione delle basette ^17.

jove_content altri stimoli, come un tono o un lampo di luce sono stati utilizzati come stimoli condizionati efficaci nei topi in passato ^16,18,19. La stimolazione baffo motivo è stato scelto per il CS in questo paradigma sperimentale è la dipendenza degli animali murini sul loro vibrisse per l'input informazioni somatosensoriali durante l'esplorazione. Stimolazione baffo ha dimostrato di essere un affidabile ed efficace CS ^20. Inoltre, dato il substrato ben consolidata e organizzato corticale del sistema vibrisse (vale a dire, la corteccia barile), la stimolazione baffo come il CS fornisce uno strumento elegante per mappare i cambiamenti corticali e la plasticità connessi con l'apprendimento eyeblink condizionata ^20,21. Un sistema di testa fissa consente la precisa stimolazione di baffi selezionati per confrontare le risposte tra i neuroni e neuroni ricevono input da baffi non-stimolata stimolati. Infine, molti ceppi di topi mostrano perdita dell'udito legata all'età come relativamente giovani adulti ^{22, e la chiusura delle palpebre durante un batter condizionata altera un CS visivo (anche se un CS visiva fa migliorare i problemi con startle risposte 16). stimolazione baffo non è influenzata da una di queste complicazioni.}

Presentato qui sono modifiche uniche e importanti su altri preparati testa-fisso per eyeblink condizionata, compresi i metodi di CS e US consegna, e l'acquisizione della risposta eyeblink. L'affidabilità di questo apparecchio e il paradigma di formazione nel condizionamento eyeblink è dimostrato imparando curve da topi condizionata e una curva di apprendimento relativamente piatta da animali di controllo pseudoconditioned (Figura 7a).

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono i topi sono stati eseguiti in conformità con i protocolli approvati dalla Institutional Animal Care della Northwestern University e del Comitato Usa sulla base di linee guida emanate dal National Institute of Health.

1. Il cilindro (Figura 2A)

1. Costruire il cilindro come descritto da Chettih et al. E Heiney et al. Da un cilindro lungo di schiuma ^14-15. Tagliare una lunghezza di 10 cm di cilindro e praticare un foro attraverso il centro per adattare l'assale, un metallo asta di 12,7 mm (0,5 in.) Di diametro. Montare il cilindro con il suo asse su una basetta ottico metallo come descritto da Heiney et al., O un altro supporto (ad esempio, plexiglas) ^15.
2. Eretti due aste metalliche verticali di 12,7 mm di diametro su entrambi i lati del cilindro.
3. Fissare due supporti ad angolo retto sulle aste di metallo.
4. Fissare altre due aste (lunghi 5 cm, 12,7 mm di diametro) attraverso i supporti ad angolo retto. Bevel °e termina di queste canne e il livello delle loro estremità sopra il centro del cilindro (figura 2G).
5. Forare e toccare un foro attraverso le estremità rivolte delle aste per adattarsi due 4-40 viti di macchina che conterrà le ali del connettore in posizione (Figura 2G).

2. Assemblaggio del sistema di stimolazione Baffo (Figura 2B)

1. Tagliare un segmento di 10 denti di pettine da un normale pettine.
2. Tagliare una fessura circa 2-3 mm di larghezza e circa 5 mm di profondità nella parte superiore del pettine per accettare un attuatore flessione rettangolare 2 strati.
3. Saldare un filo ad ogni superficie dell'attuatore piegatura. Utilizzare la saldatura e flusso fornito dal produttore. Coprire l'attuatore e saldatura con nastro isolante per proteggere il mouse e utente dalla corrente elettrica.
4. Infilare la striscia attuatore nella fessura tagliata a pettine in modo che la striscia attuatore piegatura siede perpendicolare al piano del pettine. Angle il pettine in modo che sia inclinato di 45 ° e più naturale segue la curva del viso del mouse.
5. Fissare l'estremità della striscia attuatore all'inizio del pettine con rapida impostazione epossidica.
   Nota: I fili saldati alla striscia attuatore flessione devono essere collegati a un reostato che fornisce 40 volt a dell'attuatore. Precedenti esperimenti hanno dimostrato che 40 volt è efficace per il condizionamento, ma non evoca tutte le risposte spavento.
6. Posizionare l'attuatore piegatura e il pettine su un monte mobile. Un supporto pipetta attaccato ad una base magnetica come normalmente utilizzati per impianti di perforazione in vitro elettrofisiologia funziona bene.

3. Montaggio del connettore che monta a Canne al di sopra del cilindro (Figura 2C, 2E)

Nota: Il connettore è un 3-D stampato striscia 7 buche modellata dalla striscia di nylon serie 221 Amphenol utilizzato per la cavezza da Weiss e Disterhoft e Galvez et al ^10,17.

1. Toccare il primo foro nella striscia di 0-80 x-1"Vite di macchina. Questo servirà come una vite di bloccaggio per fissare il casco al connettore. Applicare un 0-80 dado alla testa della vite di bloccaggio con colla cianoacrilato per facilitare ruotando la vite a mano.
2. Lascia un buco vuoto dopo il foro filettato (per lasciare spazio per il dado 0-80 della macchina) e spingere cinque basi relia-tac placcati in oro attraverso i restanti cinque fori.
3. Striscia il rivestimento off cinque fili lunghi (fili ottenuti da un cavo Ethernet) e saldare le estremità delle prese.
   Nota: le prime due fili saranno utilizzati per registrare i segnali elettromiografici (EMG) che rileverà una risposta eyeblink seguente filtraggio del segnale e l'amplificazione da un amplificatore. La seconda di due consegnerà il segnale scossa da un isolatore stimolo. L'ultimo cavo servirà come collegamento a terra. Questi fili saranno collegati ai sistemi utilizzati per la consegna temporizzato CS-US.
4. Garantire la connettività elettrica tra i cavi e le prese con una multImeter. Mettere il multimetro l'impostazione continuità e tenere una delle sonde per il perno e l'altra sonda alle estremità spellata del filo. I perni ed i fili sono collegati elettricamente quando la resistenza è bassa e il multimetro emette un tono.
   1. In alternativa, se il multimetro non ha un'impostazione di continuità, misurare la resistenza tra i pin e cavi. C'è continuità elettrica se c'è poca resistenza misurata.
5. Preparare le ali del connettore dal transistor stile due TO-220. Tagliare i cavi di emettitore, di base e di collettore del transistore e livellare la superficie in modo che possa essere fissata al connettore.
6. Tagliare il bordo della linguetta di montaggio a violare il foro per la scheda può scivolare sotto la testa della vite.
7. Epossidico transistori al connettore. Il foro nella linguetta di montaggio verrà utilizzato per fissare il connettore alle aste sopra il cilindro.
8. Applicare epossidica alla base dei fili protruding dalle prese e consentire la resina epossidica ad asciugare. La resina epossidica isolerà e proteggere le connessioni.

4. Preparare il copricapo (Figura 2D, 2E)

Nota: La striscia testata è un 3-D stampato striscia 7 buche modellata dalla striscia di nylon serie Amphenol 221 utilizzato per la testata da Weiss e Disterhoft e Galvez et al ^10,17.. Questo pezzo non viene più prodotta commercialmente. Il file stampante può essere scaricato dal sito web di questo giornale.

1. Toccare il primo foro nella striscia per una vite 0-80 x 1 "e lasciare un buco vuoto dopo il primo buco.
2. Premere cinque perni dorati attraverso il fondo dei restanti cinque fori (attraverso le estremità più strette). Utilizzare una morsa per facilitare spingere i perni nella striscia in modo uniforme.
3. Utilizzando un estrattore termico, rimuovere circa 0,5 cm di rivestimento in poliimmide l'estremità di un filo di acciaio inossidabile (0,005 in. Diametro), saldare l'estremità nuda del wire all'apertura di uno dei perni e tagliare il filo di 0,6-0,7 cm.
4. Striscia circa 0,2 cm dall'estremità del filo per permettere il passaggio di corrente per l'animale.
5. Ripetere i passaggi 4,3-4,4 per i restanti tre fili.
   Nota: le prime due fili registra le risposte EMG mentre il secondo di due servirà ad erogare uno shock per l'animale.
6. Come l'ultimo (quinta) filo servirà come un filo di terra, taglio di circa 5 cm di filo non rivestito di acciaio inossidabile (0.005 in. Di diametro), e saldare al pin rimanenti.
7. Garantire la continuità tra i fili e per i perni con un multimetro. (Nel caso del filo di terra, che è rivestito, la sonda multimetro può essere posizionato in qualsiasi punto lungo il filo.)

5. Preparazione chirurgica (Figura 2F)

1. Sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici, compresa la testata. Sterilizzare il casco immergendola in alcool e poi risciacquo con soluzione salina sterile.
2. Anestetizzare il mouse in una camera di induzione con 3-4% vaporized isoflurano mescolato con una portata di 1-2 L di ossigeno al minuto.
3. Accertare che l'animale è completamente anestetizzato con un pizzico punta. Il mouse è completamente anestetizzato quando non risponde di riflesso per il pizzico punta.
4. Una volta che l'animale è stato completamente anestetizzato, iniettare una dose di buprenorfina cloridrato come analgesico (0,05-2 mg / kg, sc), radere parte superiore della testa dell'animale, posizionarlo su una piastra elettrica coperta sulla base del telaio stereotassico , accertare che l'animale è completamente anestetizzato, e fissare la testa al telaio. Mantenere flusso di isoflurano vaporizzato all'animale, commutazione al 2% ad una portata di 1-2 L di ossigeno al minuto. Applicare una piccola quantità di pomata oftalmica alle cornee.
5. Disinfettare il cuoio capelluto con povidone-iodio e alcol tre volte ciascuna, alternando tra i due.
6. Con una lama numero 10 o 15 bisturi, fare un'incisione lungo la linea mediana del cuoio capelluto, esponendo il cranio dalla parte anteriore della tha gli occhi di oltre l'osso interparietale (~ 1,5-2 cm).
7. Trattenere i lembi della pelle con micro clip. Inserire una clip sopra l'occhio, uno lungo il centro dell'asse rostrale-caudale, ed una sul retro del cranio bilateralmente (cioè, utilizzare sei clip in tutto). Per evitare casco avulsione, esporre tanto del cranio possibile, compresi i lati e sul retro. Ciò aumenterà la superficie di applicazione del cemento cementazione adesiva.
8. Usando il bisturi, raschiare lungo la parte superiore del cranio per rimuovere il periostio e garantire una superficie di lavoro pulita e asciutta. Pulire la parte superiore del cranio con perossido di idrogeno al 3% per tre volte.
9. Praticare due fori nel cranio con una dimensione di 34 invertito Burr cono o una fresa 1,6 millimetri incisione punta da trapano di accettare 00-90 viti (0,0625 in. Lunga). Le viti forniranno il collegamento elettrico a terra. Inserire un foro davanti Bregma, e l'altra di fronte Lambda, a sinistra della linea mediana quando condizionamento del right occhio. Mettere una vite in ogni buco. Abbassare la vite 0,28 millimetri nel cranio per ogni giro completo; due giri completi è sufficiente.
10. Creare diverse piccole zolle di circa 0,75 mm di diametro sul cranio al fine di aumentare la superficie e la forza di presa per il cemento.
11. Prendere la testata completato e avvolgere il cavo di terra in una configurazione a forma di otto intorno alle due viti. Consentire un certo allentamento (~ 1,5 cm tra la testata e la vite) nel cavo di terra in modo che il casco può essere posizionato correttamente in seguito.
    Nota: La figura otto norma assicura un buon collegamento elettrico tra il filo e le viti di terra. Il filo può essere saldato alla vite per assicurare un collegamento elettrico.
12. Applicare il cemento cementazione adesiva. Seguire le istruzioni del produttore per la miscelazione del cemento cementazione adesiva o miscelare 4 cucchiai di mix L-polvere, 8 gocce di base, e 2 gocce di catalizzatore in un piatto di miscelazione in ceramica a freddo (garantire la striscia di temperatura on il piatto di miscelazione è completamente nero.) La temperatura fredda estende il tempo di lavoro del cemento.
    1. Rivestire il cranio e le viti liberalmente con il cemento composito e consentire il cemento si asciughi. Questo dovrebbe prendere solo pochi minuti.
13. Dopo il cemento è asciugata, posizionare la testata verticale, con i perni in piedi, sopra il cranio. Tenere il casco in posizione con un supporto simile al connettore
    Nota: vedere "3. Montaggio del connettore" -Il titolare deve essere solo una striscia di cinque fori con prese placcati in oro al fine di ricevere i perni della testata. Il supporto è attaccato ad un braccio sul telaio stereotassico. L'utilizzo del supporto e del braccio facilita il posizionamento della testata ei fili.
14. Dopo la testata è stata posizionata, sbucciare indietro la pelle intorno alla zona periorbitale e posizionare i due fili d'urto per permettere ai 0,2 cm fine spogliato di riposare sotto la pelle e di circa 2-4 mm direttamente caudale al eye. Evitare che le estremità dei due cavi si tocchino. Posizionare i due fili EMG sulla muscolare orbicolare al di sopra della cavità oculare.
    1. Se necessario, tagliare le estremità dei fili se sono troppo lunghi e sembrano come se possono direttamente graffiare l'orbita e causare infezioni. Se tagliare le estremità del filo, assicurarsi che ci sia abbastanza filo nudo esposto. In alternativa, se i fili sembrano troppo lungo, piegare il filo indietro alla base, dove si estendono fuori dal casco.
    2. Cemento base dei fili (cioè, l'estremità vicino alla testata) in posizione sul cranio con una piccola diffusione del cemento composito adesivo e lasciare asciugare (uso la metà della porzione descritta in precedenza).
15. Rimuovere le micro clip e piegare delicatamente i lembi di pelle indietro sopra il cemento. Lasciare la pelle di stabilirsi naturalmente a prevenire tensioni su qualsiasi parte della pelle per evitare distorsioni della palpebra, la prevenzione della risposta eyeblink,e disagi all'animale.
16. Sigillare la zona esposta con cemento dentale, che copre tutto dalla pelle incisa al bordo della parte superiore della testata con cemento. Prestare particolare attenzione per evitare di gocciolare cemento sugli occhi o dei perni della testata. Parzialmente cemento indurito può essere lisciata e manipolato con un batuffolo di cotone che viene inumidito con solvente cemento dentale. Lasciare che il cemento si asciughi completamente prima di rimuovere il supporto testata.
17. Lasciare che l'animale per recuperare da anestesia su una superficie riscaldata prima di sostituire l'animale torna nella sua gabbia. Somministrare Metacam (1 mg / kg, SQ) e poi posto l'animale torna nella sua gabbia.
18. Permettere all'animale 5-7 giorni di recupero prima del test o di formazione. Mantenere cure post-operatorie standard per l'animale secondo le direttive del vostro istituto. L'animale deve essere controllato almeno una volta al giorno dopo che ha recuperato da un intervento chirurgico. Attenzione ai segni di scarsa mangiare e / o bere e il comportamento svogliato. Se il doloresi sospetta, fornire Metacam ogni 24 ore (stessa dose alla fine del post-chirurgico) fino alleviato. La lidocaina può essere applicato localmente sulla ferita se l'animale si gratta o mostra segni di disagio.

6. posizionando il mouse sul cilindro e la formazione (Figura 2G)

1. Per posizionare il mouse sul cilindro, frenare il mouse con una mano brevemente tenendola per la coda con una mano e poi afferrare il mouse dietro le spalle con indice e pollice con l'altra. Avvolgere le altre dita intorno addome e il tronco del mouse.
2. Con la mano non frenare il mouse, collegare il connettore al casco sulla testa del mouse e ruotare la vite di bloccaggio.
3. Posizionare il mouse delicatamente sul cilindro e tenerlo in posizione mentre si collega il connettore al telaio. Utilizzare le due viti per fissare il connettore al bar sopra il cilindro.
4. Una volta che il connettore è stato fissato al telaio del cilindro, release la presa sul mouse. Dare il mouse un giorno due sessioni di assuefazione al cilindro. Consentire ogni sessione assuefazione la stessa durata di ogni sessione di condizionamento.
   1. Record velocità di intermittenza spontanea durante assuefazione e pre-esporre i topi alla vibrazione baffo CS per minimizzare il verificarsi di risposte trasalimento. Applicare il CS come durante una sessione attuale di, ma senza la scossa elettrica degli Stati Uniti.
   2. Applicare la stimolazione baffo CS posizionando sistema Piezo stretta (circa 0,5 cm) al lato condizionata (lato destro) del mouse, mentre scivolare i denti del pettine sopra individuali baffi. Assicurarsi che le stesse basette vengono stimolati giorno per giorno posizionando il sistema Piezo nella stessa posizione da un giorno all'altro.
5. Iniziare la formazione con il mouse sul condizionamento classico. Consegnare due sessioni di allenamento al giorno per cinque giorni. Lasciare circa due ore tra una sessione di allenamento.
   1. Per il gruppo condizionata, deliver trenta prove per sessione di un lungo 250 msec vibrazioni whisker CS (60 Hz) accoppiato con una lunghezza di 100 msec impulso elettrico US (0,3 mA - 3 mA, forniti da un WPI A385R stimolo sezionatore). Separare il CS e gli Stati Uniti con un msec lungo intervallo di traccia 250 priva di stimoli per rendere il compito dipende l'ippocampo (Figura 1) ^23.
   2. Regolare l'intensità dello shock elettrico per ogni animale in modo che un battito viene evocata. prove separate con un intervallo tra le prove casuale di 30-60 secondi (media di 45 secondi, la durata complessiva di 30 minuti per sessione.)
   3. Invia trenta spaiato CS solo e noi soli sperimentazioni ciascuno (per un totale di sessanta studi) al gruppo pseudoconditioned, utilizzando gli stessi parametri di stimolo come indicato per il gruppo condizionata. Assicurarsi che il CS da solo e degli Stati Uniti prove da soli sono pseudorandomized in modo tale che nessuno stimolo è presentato più di due volte di fila. Separare ogni prova con un intervallo medio tra le prove di 22,5 sec.
6. defegato rumore di fondo a 65 dB in tutto assuefazione e di formazione, al fine di mascherare qualsiasi rumore della vibrazione generata dal stimolatore soffio.

Risultati

8-10 settimane di età topi maschi C57Bl6 / J sono stati formati sulla traccia eyeblink condizionata sull'apparato tapis roulant cilindrica testa fissa. 8 topi sono stati addestrati con le presentazioni appaiate CS-Stati Uniti (gruppo condizionata) e 9 topi sono stati addestrati con le presentazioni spaiati CS e statunitensi (gruppo pseudoconditioned).

Esempio EMG registrazioni di una risposta condizionata da un mouse condi...

Discussione

Classical eyeblink condizionata è una forma di apprendimento associativo che è uno strumento utile per comprendere i substrati neurali alla base dell'apprendimento e della memoria. I metodi precedenti utilizzati per il condizionamento eyeblink in roditori come topi coinvolti una camera che ha permesso per l'animale di muoversi liberamente. Una preparazione testa fissa per il condizionamento eyeblink nei topi, con l'apparecchiatura descritta da Chettih et al. E Heiney et al. E più recentemen...

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Exervo TeraNova Foam Roller 36" x 6"	Amazon	B002ONUM0E	Per cilindro
in plexiglas			su misura; 1 cm di spessore
Aste in metallo (12.7  Vite
a macchina 4-40 su misura (.25  in. lungo)	Amazon Supply	B00F33Q8QO	per cilindro
pettine per capelli dal design classico	Conair	93505WG-320	per stimolazione dei baffi
Attuatore di piegatura rettangolare a 2 strati	Sistemi piezoelettrici	T220-A4-303X	Per la stimolazione dei baffi
Kit di saldatura e flusso	Sistemi piezoelettrici	MSF-003-NI	Per la stimolazione dei baffi
Base magnetica	Thor Labs	MB175	Per la stimolazione dei baffi
Barra filettata per base			Strisce su misura
basate sui connettori a striscia di nylon della serie 221 di Electronic Connector Corp.			Su misura, basato su Weiss e Disterhoft, 2008
TO-220 stile transistor	Amazon Supply	B0002ZPZYO	Per il connettore; per le ali
Relia-Tac Prese Connettore	Elettronico Corp.	220-S02	Per connettore
Relia-Tac Pins	Electronic Connector Corp.	220-P02	Per
testa 0-80 vite a macchina in acciaio inossidabile (1 pollice di lunghezza)	Amazon Supply	B000FN68EE	Vite di bloccaggio
0-80 in acciaio inossidabile dado esagonale (5/32 pollici di spessore)	Amazon Supply	B000N2TK7Y	Testa della vite di bloccaggio
Loctite Super Glue-Liquid	Loctite	1365896	Colla cianoacrilica; per la vite di bloccaggio
Quick Setting Epoxy	Ace Hardware	18613	Per il connettore e il sistema di stimolazione dei baffi
Cavi Ethernet Fili			Il cavo Ethernet può essere smontato per utilizzare i singoli fili per il connettore
Fili in acciaio inossidabile rivestiti in poliimmide (2  in. lungo, .005 pollici.	PlasticsOne	005sw/2.0 37365 S-S	Per copricapo, EMG e fili d'urto
Filo non rivestito in acciaio inox (.005  in. AM	Systems	792800	Per copricapo, fili di terra
Autotrasformatore variabile Tenma Tenma		72-110	Per la stimolazione dei baffi; reostato per regolare la corrente all'attuatore di flessione
Amplificatore	A-M Systems	1700	Amplificatore per filtrare e amplificare i segnali EMG
WPI A385R isolatore di stimolo	World Precision Instruments	31405	Per il scossa elettrica
Isothesia (isoflurano)	Henry Schein: Animal Health	50031	Per chirurgia; anestesia
Buprenex iniettabile CIII	Reckett Benckiser Pharmaceuticals Inc	NDC 12496-0757-1	Per chirurgia; analgesico
Akwa Tears: lubrificante unguento oftalmico	Akorn	NDC 17478-062-35	Unguento lacrimale artificiale per prevenire la secchezza oculare durante l'anestesia
Tamponi per la preparazione dello iodio povidina	PDI	NDC 10819-3883-1	Per la chirurgia; tamponi
		per la preparazione dell'alcol	Possono essere acquistati da qualsiasi farmacia standard
Manici per bisturi chirurgici in acciaio inossidabile (n.3)	Integra Miltex	4-7.Per	la chirurgia
Lame per bisturi chirurgici in acciaio inox	Integra Miltex	4-310 o 4-315	Per la chirurgia; numero 10 o 15 lama per bisturi
3% Perossido			Può essere acquistato da qualsiasi farmacia standard
Micro Clip	Roboz	RS-5459	Per la chirurgia, per trattenere la pelle
00-90 vite a macchina in acciaio inossidabile (0.0625  in. lungo)	Amazon Supply	B002SG89X4	Per la chirurgia, per avvolgere il filo di terra
Utensile rotante professionale	Walnut Hollow	29637	Trapano a mano per chirurgia, per praticare fori nel cranio
Fresa a cono rovesciato	Roboz	RS-6282C-34	Fresa a cono rovesciato misura 34; per chirurgia, per praticare fori nel cranio
Fresa per incisione Punta da trapano	Dremel	106	Fresa per incisione; punta da 1,6 mm; per chirurgia, per praticare fori nel cranio
C& B Metabond-Veloce! Sistema di cemento "B" Quick Base	Parkell	S398	Per chirurgia; sistema di cemento adesivo di fissaggio; importante per prevenire l'avulsione del copricapo
C& B Metabond-Veloce! Sistema di cemento Clear L-Powder	Parkell	S399	Per chirurgia; sistema di cemento adesivo di fissaggio; importante per prevenire l'avulsione del copricapo
C& B Metabond-Veloce! Sistema di cemento "C" Universal TBB Catalyst 0,7 ml	Parkell	S371	Per chirurgia; sistema di cemento adesivo di fissaggio; importante per prevenire l'avulsione del copricapo
C& B Metabond-Veloce! Cement System Piatto di miscelazione in ceramica con striscia di temperatura	Parkell	S387	Per chirurgia; sistema di cemento adesivo per fissaggio; importante per prevenire l'avulsione del copricapo
Pinzette svizzere, stile #5	World Precision Instruments	504506	Per la chirurgia
Applicatori puritani con punta in cotone	VWR International	10806-005	Per chirurgia
Kit di cemento per mastice dentale	Dentsply	675570	Per chirurgia; cemento dentale