Questo nuovo modello per il trapianto degli arti posteriori ortotopico nel topo, applicando una tecnica bracciale non sutura per anastomosi super-microvascolare, fornisce un potente strumento per la ricerca in vivo meccanicistica immunologica relative al allotrapianto composito vascolarizzato (VCA).
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Articolo metodologico
Ortotopico degli arti posteriori del trapianto di mouse
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
I sistemi di modelli animali in vivo, e in particolare i modelli murini, si sono evoluti in strumenti scientifici potenti e versatili indispensabili per la ricerca di base e traslazionale nel campo della medicina dei trapianti. In questo contesto è disponibile una vasta gamma di reagenti, tra cui anticorpi mono e policlonali sia per applicazioni diagnostiche che interventistiche. Inoltre, un vasto numero di ceppi genotipizzati, consanguinei, transgenici e knock out consente un'indagine dettagliata dei contributi individuali dei componenti umorali e cellulari alla complessa interazione di una risposta immunitaria e rende il topo il gold standard per la ricerca immunologica.
'L'allotrapianto composito vascolarizzato (VCA) delinea un nuovo campo di trapianto utilizzando allotrapianti per sostituire "simile con simile" nei pazienti che soffrono di perdita di tessuto traumatica o congenita. Questo protocollo metodologico chirurgico mostra l'uso di una tecnica di cuffia senza sutura per l'anastomosi super-microvascolare in un modello di trapianto ortotopico di arto posteriore di topo. Il modello consente in particolare il confronto tra i paradigmi consolidati nel trapianto di organi solidi con una nuova forma di trapianto costituita da vari componenti tissutali diversi. In modo univoco, questo modello consente il trapianto di un compartimento e di una nicchia di midollo osseo vascolarizzati vitali che hanno il potenziale di esercitare un effetto benefico sull'equilibrio dell'accettazione e del rigetto immunitario. Questa tecnica fornisce uno strumento per studiare il riconoscimento degli alloantigeni e il rigetto e l'accettazione dell'allotrapianto, oltre a consentire il perseguimento di studi sulla rigenerazione funzionale dei nervi per far progredire ulteriormente questo nuovo campo dei trapianti.
Introduzione
La fine degli anni novanta ha segnato i giorni pionieristici del trapianto ricostruttivo con il primo trapianto di mano eseguito con successo in Francia nel 1998. Da allora, l'uso di VCA per la ricostruzione di difetti tissutali devastanti è stato impiegato con successo in un ampio spettro di pazienti. Ad oggi, il mondo conta 76 destinatari di 112 arti superiori e 31 volti 1-3. Inoltre, sono stati eseguiti diversi altri tipi di VCA come la parete addominale 4, la laringe 5, la trachea 6, le articolazioni vascolarizzate 7 e persino il pene 8. Inoltre, la nascita viva di un bambino è stata recentemente se....
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sono stati condotti in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio del National Institute of Health (NIH) e sono stati approvati dal Comitato Johns Hopkins University Animal Care e Usa (JHUACUC). Le procedure specifiche sono state eseguite sotto la MO13M108 protocollo ACUC approvato.
Operazione 1. donatore
- Somministrare l'analgesia al punto momento opportuno per ogni formulazione farmacologica prima di un intervento chirurgico. Come per la cura degli animali approvato e l'uso l'uso del protocollo 0,1 mg / kg di peso corporeo di buprenorfina per via sottocutanea 1 ora prima della incisi....
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Risultati
Esecuzione vascolarizzato allotrapianto composito in un modello di topo usando una tecnica bracciale non sutura consente di ottenere eccellenti e lungo graft termine e animali sopravvivenza come mostrato in Figura 1. Inoltre, rappresenta un metodo affidabile per ottenere risultati riproducibili di graduale rifiuto allograft in composito vascolarizzata allotrapianto come documentato dalle immagini mostrate in figura 2. H & e istologic.......
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Discussione
Vascolarizzato Composite allotrapianto, come ad esempio arti superiori e il trapianto di faccia per la ricostruzione di difetti del tessuto devastanti, si è evoluto come opzione di trattamento valido per i pazienti non modificabili a procedure ricostruttive tradizionali. I progressi tecnici nel campo della microchirurgia ricostruttiva, nonché una vasta esperienza con immunosoppressori potenti e le terapie modulatori del sistema immunitario a trapianto di organo solido, ora permette la sopravvivenza del trapianto a lungo.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere alcun interesse finanziario concorrente.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato dal Esercito, Marina, NIH, Aeronautica, VA e Health Affairs per sostenere lo sforzo AFIRM II, sotto Premio n W81XWH-13-2-0053. L'US Army Medical Research di acquisizione di attività, 820 Chandler Street, Fort Detrick MD 21.702-5.014 è l'Ufficio acquisizione assegnazione e la gestione. Opinioni, interpretazioni, conclusioni e raccomandazioni sono quelle dell'autore e non sono necessariamente condivise dal Dipartimento della Difesa.
Gli autori desiderano ringraziare Jessica Izzi, DVM, Caroline Garrett, DVM e Julie Watson, DVM per il loro eccellente supporto veterinario nel corso di questo studio.....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sutura, 6-0 Nylon | MWI | 31849 | |
| Sutura, 6-0 Polisorbo | MWI | 72667 | |
| Sutura, 10-0 Nylon | Aero Surgical | TK-107038 | |
| Tubo in poliimmide, misura 25 | Vention Medical | 141-0023 | |
| Tubo in poliimmide, misura 27 | Vention Medical | 141-0015 | |
| Morsetti microvascolari (singolo) | Synovis | 00396 | |
| Morsetti microvascolari (doppi) | Synovis | 00414 | |
| Micro-forbici | Synovis | SAS-18 | |
| Micro-Pinze | Synovis | FRS-15 RM-8 | |
| Micro-dilatatori | Synovis | FRS-15 RM-8D.1 | |
| Micro-Needledriver | Synovis | C-14 | |
| Applicatore Micro-Clamp | Synovis | CAF-4 | |
| Ago per microlavaggio | Hamilton | 10MM, 30°, 33G | |
| Soluzione di ringer lattati | Fisher | Scientific NC9968051 | |
| Buprenorfina | Numero DEA richiesto; Ottenuto da farmacia ospedaliera. | ||
| Enrofloxacina; Baytril | Bayer Health Care | 186599 | |
| eparina | ottenuta da farmacia ospedaliera |
Riferimenti
- Khalifian, S., et al. Facial transplantation: the first 9 years. Lancet. , (2014).
- Petruzzo, P., Dubernard, J. M. The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation. Clin. Transpl. , 247-253 (2011).
- Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A.
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Ristampe e permessi
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