Etica Dichiarazione: procedure che coinvolgono soggetti umani sono stati approvati dalle etica della ricerca partecipante umani comitato / Institutional Review Board presso l'Academia Sinica, Taiwan.
1. stimoli e sperimentale del programma di preparazione
- Preparare un pool di oltre 60 fotografie fronte impressionabile 29 suddivisi in tre espressioni facciali (arrabbiato, felice, e neutro). Utilizzare software di grafica per mascherare i capelli e le orecchie parti nelle fotografie con sfondo nero, come mostrato in Figura 1A in modo che i partecipanti possano concentrarsi sulle caratteristiche facciali nelle fotografie.
- Aprire una fotografia nel software di grafica. Utilizzare la casella degli strumenti di selezione per disegnare una regione ellittica e regolare le dimensioni regione in modo che le orecchie e la maggior parte dei capelli non rientrano nel dell'ellisse.
- Invertire la regione selezionata. Fai clic su "Elimina" per rimuovere la regione indesiderata della fotografia e sostituirlo con il colore di sfondo nero.

Figura 1. Esempi di stimoli facciali emozionali. (A) facce fotografia dove i capelli e le orecchie sono state mascherate nel colore di sfondo nero, e (B) linea di disegno facce che sono modificati da (A) dal software grafici. I volti mostrano emozioni neutri, felici, e arrabbiati, rispettivamente, da cima a righe inferiori. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
- Creare uno studio pilota. Reclutare i partecipanti pilota per la selezione di stimoli adeguati dal pool fotografia.
Nota: I partecipanti pilota non dovrebbero partecipare all'esperimento EEG. - Configurare il programma di presentazione dello stimolo che inizia con lo schermo del computer prima di presentare le istruzioni compito, seguito da 5 familprove iarization. Iniziare ogni prova con una croce fissazione, seguito da uno stimolo faccia, e un'attività di valutazione emotività. Vedere file di codice supplementare per un programma di esempio.
Nota: I veri prove pilota seguono immediatamente i processi di familiarizzazione selezionando fotografie faccia in un ordine casuale dalla piscina. - Creare un programma sperimentale, compresi gli schermi di istruzioni e uno schermo centrale occhio-fissazione. Creare schermo stimolo viso come illustrato in figura 2 configurando la dimensione fotografia da 18.3 x 24.4 cm 2 (larghezza x altezza) con sfondo nero, in un formato di schermo di computer 41 x 25.6 cm 2 con risoluzione 1.680 x 1.050. Vedere file di codice supplementare per un programma di esempio.
- Creare un sistema di punteggio di valutazione emotività nel programma come illustrato in figura 3. Inserire una linea orizzontale che vanno da -100 a +100 in una scala continua al centro dello schermo without eventuali zecche-marchi, fatta eccezione per la centrale e gli endpoint. Preparare il programma in modo tale che i partecipanti possono liberamente valutare l'emotività di un volto fotografia trascinando il cursore punteggio a sinistra per molto arrabbiato (-100) e verso destra per molto felice (+100), e premere il pulsante GO.
Nota: la linea di punteggio è stato progettato senza tick-segni perché i pazienti con AS possono facilmente rimanere bloccati nel porre il cursore tra zecche durante la valutazione emotività. Pertanto, una scala continua è preferito per i pazienti. - Assicurarsi che il programma registra i risultati del comportamento di un partecipante (ad esempio, tempi di reazione e punteggi emotività), che vengono utilizzati come criteri per la scelta di fotografie dal pool (vedere il punto 1.3.1).
- partecipanti pilota Recruit (5 di controllo e di 5 partecipanti come pilota). Diagnosticare i pazienti clinici in base alle Gillberg 30 e criteri DSM-IV 26 e amministrare il breve-forma clinica derivati di Wechsler per adulti Intelligence Scale (WAIS-III) 31. Abbinare i controlli alle loro controparti AS il più possibile sul genere e sui punteggi QI verbale / prestazioni.
- Eseguire la procedura sperimentale nello studio pilota per ogni singolo partecipante. Dopo aver completato il compito emotivo riconoscimento del volto, intervistare ciascun pilota AS partecipante sulla ragionevole durata dei periodi di centro-occhio di fissaggio e presentazione dello stimolo, la difficoltà del compito, la facilità di utilizzo del sistema di punteggio e il numero massimo di prove per mantenere il suo / la sua la concentrazione, in base al quale il programma può essere riconfigurato per l'esperimento EEG (vedere il punto 1.3.2)

Figura 2. Uno screenshot di uno stimolo volto nel programma. Le dimensioni del volto è configurato per adattarsi all'altezza dello schermo. L'area vuota viene riempita con il colore nero.caricare / 53962 / 53962fig2large.jpg "target =" _ blank "> Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Figura 3. Uno screenshot del sistema di punteggio per la valutazione emotività. La barra di punteggio è progettato per avere alcun segno di spunta. Il partecipante deve trascinare il mouse per selezionare il punteggio assegnato a un volto e premere il tasto GO per terminare l'operazione. Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.
- Programma per il task 1: Fotografia di sessione.
- Selezionare dalla piscina di 30 fotografie, che comprende 10 ciascuno per le espressioni facciali felici, arrabbiati, e neutro (5 maschi e 5 femmine facce per ogni tipo di espressioni), che danno i tempi di reazione medi più comparabili e punteggi medi emotività tra il 5 AS e 5 partecipanti pilota di controllo.
- Aggiornare le configurazioni sperimentali programma incorporando feedback dei pazienti pilota, come il periodo centrale eye-fissazione ottimale (cioè, 1,000 msec), durata della presentazione dello stimolo (cioè, 1,000 msec), l'intervallo inter-stimolo (cioè, randomizzati in -Tra 4 e 7 secondi), e la scala del sistema di punteggio (vale a dire, da -100 a 100). Aggiungere cinque prove familiarizzazione prima di fare le 30 prove sperimentali nel programma.
- Modificare il numero di stimoli e intervalli di tempo in un file di testo di configurazione esterno associato al programma sperimentale.
Nota: Il file di testo può essere modificato per adattarsi diverse condizioni sperimentali senza l'intervento di ingegneri del software. - Non contare le cinque fotografie per prove di familiarizzazione ai 30 fotografie selezionate. Non utilizzare i EEG ei dati comportamentali rilevati nelle prove di familiarizzazione in analisi dei dati.
- programma Fo Attività 2: Linea-sessione di disegno.
- Crea immagini line-disegno delle 35 fotografie (5 per le prove di familiarizzazione, 30 per le prove sperimentali) utilizzati in Task 1 tracciando i bordi di ogni faccia. Utilizzare software di grafica per modificare le fotografie in scala di grigio in line-disegni in bianco e nero, come mostrato in Figura 1B.
Nota: I passaggi di seguito per l'editing fotografia è una delle possibili soluzioni per rendere line-disegni. - Nel software di grafica, regolare la luminosità / contrasto della fotografia in modo che l'intensità originale scala di grigi nei pixel di maggioranza cade in nero o bianco.
- Applica "effetto schizzo" a "effetto" o nel menu "filtro" del software per una fotografia in scala di grigi in modo che si conserva solo contorno della parte alta frequenza spaziale, e applicare "effetto angoscia" per aumentare la dilatazione delle curve di livello .
- Utilizzare qualsiasi strumento pennello per migliorare i contorni e utilizzare uno strumento gomma perripulire le parti indesiderate. Assicurarsi di mantenere importanti caratteristiche facciali controllando avanti e indietro tra la fotografia originale e la sua controparte line-drawing.
- Fare una copia del programma di Task 1 al punto 1.3 per creare un programma per il Task 2 e sostituire le 35 fotografie in Task 1 con le corrispondenti linee-disegni.
2. Procedura di registrazione EEG
- preparativi
- Reclutare 10 controlli sani e 10 pazienti con AS per esperimenti EEG sulla base delle linee guida dell'etica di ricerca partecipante umano locale comitato / Institutional Review Board.
- Somministrare la forma abbreviata di WAIS-III 31 ai pazienti con AS individualmente prima degli esperimenti, e trovare i comandi che corrispondono il più possibile i pazienti in genere e sui punteggi QI verbale / prestazioni.
- La registrazione EEG
- Sedile il partecipante in una sedia confortevole in una isolare suonod camera (poco illuminata) e regolare la posizione della sedia in modo che lo schermo del computer è di 60 cm davanti al partecipante. Dopo un tutorial sulla procedura sperimentale, hanno il partecipante di compilare i moduli di consenso insieme ad alcune domande sul suo / la sua manualità.
- Utilizzare un tappo EEG con 132 elettrodi Ag / AgCl (tra cui 122 10-10 sistema EEG, e la VEOG bipolare, HEOG, ECG, elettrodi EMG, insieme a sei canali del viso-muscolari) per la registrazione EEG. Collegare il tappo a due amplificatori a 64 canali con 0,1-100 Hz filtro passa-banda analogica per digitalizzare EEG prime a 1.000 Hz frequenza di campionamento.
- Montare il 128 canali cappuccio standard EEG alla testa di ogni partecipante. Regolare il cappuccio in modo che l'elettrodo etichettato "riferimento" è posto nella posizione "Cz", che si trova rispetto ai punti di riferimento linea mediana anteriore / posteriore (cioè centro del nasion della distanza inion), ed a / destra monumenti sinistro (cioè centro del tragis sinistra / destra), secondo la EEG sistema internazionale 10/10.
- usare delicatamente un ago smussato per iniettare gel conduttore in tutti gli elettrodi. Mescolare con l'ago lentamente all'interno dell'elettrodo per assicurare un buon contatto tra il gel del cuoio capelluto e l'elettrodo (cioè, per mantenere l'impedenza inferiore a 5 kΩ). controllare costantemente lo stato del contatto in gel agli elettrodi etichetta "di riferimento" e "terreno" sul cappuccio EEG per assicurarsi che la misura di impedenza è corretta.
- Osservare l'impedenza degli elettrodi visualizzando la schermata dell'elettrodo impedenza supportato dal software di registrazione EEG (ad esempio SCAN 4.5 in questo studio), che di solito va con il sistema EEG. Sullo schermo, gli elettrodi sono mostrati in colori, e diversi colori indicano i livelli di impedenza.
- Inserire un elettrodo HEOG al canto di un occhio (sito positiva), e il secondo elettrodo al canto dell'altro occhio (sito negativo), un elettrodo VEOG sopra e l'altra sotto l'locchio eft, elettrodi ECG bipolari sul retro degli elettrodi bipolari EMG sinistro e mano destra, e nella zona tra il pollice e il dito indice della mano destra, ed i sei elettrodi facciali intorno al sopracciglio e guancia.
- Record in un notebook quei cattivi canali in cui l'impedenza è superiore a 5 kΩ, o salvare direttamente l'impedenza schermo mostra a tutti gli elettrodi. Utilizzare questo come riferimento futuro per scartare i canali cattivi in fase di elaborazione dei dati EEG.
- Registra EEG riposo stato dopo istruire il partecipante a chiudere gli occhi per 12 min. Durante questo tempo, controllare doppiamente la qualità del flusso EEG istante mostrato sullo schermo supportato dal software di registrazione EEG.
Nota: Ci dovrebbero essere chiare onde alfa distribuiti nei canali occipitali durante la condizione di occhi chiusi rispetto alla condizione occhi aperti. Se le onde alfa sono troppo rumorosi (ignorando i canali cattivi) o distorta, tornare al punto 2.2.4 e regolare il contatto del gel. - Avviare i due compiti sperimentali in un ordine contro-bilanciato tra i partecipanti. Registra EEG facendo clic sull'icona di registrazione sullo schermo supportato dal software di registrazione.
- Dopo aver letto le istruzioni compito mostrata sullo schermo, hanno ogni partecipante eseguire le 5 prove di familiarizzazione, seguiti dai 30 prove di attività. Utilizzare la stessa procedura sia per la fotografia e le attività di linea di disegno. Nelle istruzioni compito, incoraggiare i partecipanti di assegnare un punteggio ad emotività di uno stimolo faccia il più rapidamente possibile.
- IMPORTANTE: Controllare i programmi preparati in passi 1.3.2 e 1.4.2 per l'invio correttamente i fatti di tempo-locked per l'inizio del centro dell'occhio fissazione, presentazione dello stimolo volto, e premendo il tasto GO per il software di registrazione durante la valutazione emotività. Quei tempi di inizio sono codificati come numerico e possono essere controllati sullo schermo supportato dal software di registrazione.
Nota: Il partecipante può prendere una pausa tra le due attività. Non c'è EEG recondo durante la pausa.
- Utilizzare un digitalizzatore (ad esempio, il digitalizzatore Polhemus FASTRAK 3D in questo studio) per registrare le posizioni 3D di elettrodi e salvarlo in un file (ad esempio .3dd o .dat file) per tappi EEG co-registrazione di tutta partecipanti l'analisi dei dati.
- Dopo l'esperimento EEG, hanno il partecipante di compilare un inventario di 35 domanda sulle sue / suoi comportamenti e sensazioni durante l'esperimento EEG (ad esempio, avere emozioni negative, quasi cadde in sonno), e fornire loro il pagamento per la partecipazione alla sperimentazione.
- Portare il partecipante alla toilette per pulire / asciugare il suo / suoi capelli.
- Pulire e sterilizzare il tappo EEG secondo le istruzioni clinici.
3. Il trattamento dei dati EEG
Nota: i comandi software forniti in questa sezione sono specifici per EEGLAB.
- Filtrare i segnali EEG utilizzando un filtro passa-alto di 1 Hz e un filtro passa-basso 50 Hz chiamando ilfunzione di pop_eegfilt.m 32.
Nota: utilizzare un filtro passa-basso di 40 Hz per alcuni paesi che hanno 50 Hz frequenza di rete elettrica - Eliminare cattive canali con impedenza superiore a 5 kΩ dopo aver controllato l'impedenza degli elettrodi registrato nel passaggio 2.2.6. Scartare quelle cattive canali con diverso spettro di potenza rispetto ai canali adiacenti mediante ispezione visiva delle caratteristiche dello spettro di potenza (ad esempio, il valore massimo, la curvatura, ecc) in ogni canale.
- Calcolare e tracciare lo spettro di potenza del segnale EEG chiamando la funzione pop_spectopo.m 32.
- Ri-fare riferimento ai segnali EEG con la media dei canali cervello senza i canali cattivi chiamando la funzione pop_reref.m.
- EEG segmento in epoche di stimolo-locked, ognuno dei quali va da -2.0 sec pre a 1,5 sec post-stimolo insorgenza. Corretto per basale (-2.0 a -1.2 sec prima della comparsa dello stimolo) togliendo la media di valu basalees da ogni epoca.
- Chiamare le funzioni pop_epoch.m e pop_rmbase.m, rispettivamente. Scegliere l'intervallo di linea di base prima del periodo eye-fissazione centrale e l'inizio dello stimolo volto.
- Brutto voto epoche che sembrano contenere artefatti. Eliminare le cattive epoche riservando le epoche contaminati da lampeggia gli occhi. Le epoche con manufatti di solito guardare rumoroso o hanno estremamente elevato valore di picco (ad esempio, superiore a 100 mV) rispetto a epoche tipici.
- Chiamare la funzione pop_rejmenu.m di avviare una procedura semi-automatica. Una finestra di interazione uscirà fuori di riconfermare epoche cattive auto impostate dall'utente tramite ispezione visiva. Anche se la maggioranza delle epoche sono contaminati da lampeggia gli occhi, queste epoche possono essere provvisoriamente riservati per dopo la rimozione dalla analisi delle componenti indipendenti (ICA) 33 in punto 3.8.
- Dopo aver scartato i canali cattivi e cattivi epoche, eseguire ICA sui dati EEG Potati utilizzando l'pop_runiFunzione ca.m.
- Tra le componenti indipendenti stimati (CI), identificare gli artefatti derivanti da movimento degli occhi / lampeggio, l'attività muscolare, battito cardiaco, e il rumore linea 32.
Nota: Una significativa correlazione elevata (R 2> 0.9) tra IC punteggi di un componente e quelli di tutti i canali di riferimento (VEOG, HEOG, ECG, e canali viso) indica che il componente è principalmente un contributo di artefatti. I punteggi IC stimato spiega con i manufatti possono essere puliti utilizzando l'analisi di regressione multipla. - Rimuovere circuiti integrati artefatto e stimare le EEG pulite che derivano dal prodotto dell'ACI matrice e la matrice punteggio IC artefatto puliti miscelazione. Salvare le EEG puliti per ulteriori analisi.
- Mantenere i residui di prevedere circuiti integrati artefatto (R 2> 0.9) dal riferimento VEOG, HEOG, ECG ed i canali del viso nella matrice punteggio IC. Rimuovere altri circuiti integrati artefatto dalla funzione pop_subcomp.m. La funzione restituisce le EEG artefatto puliti.
4. Analisi statistica
- canali partizione EEG in undici regioni omogenee per ridurre il numero di confronti statistici in ERP e analisi ERSP, cioè, a sinistra (10 canali), midline- (14) e destro frontale (10); sinistra (13) e destro-temporale (13); sinistra (9), midline- (14) e destro centrale (9); sinistra (9), midline- (12) e il diritto-occipitale parietali (9) come mostrato in figura 4. Queste regioni sono definite in base alla anatomia funzionale della corteccia 34. L'omogeneità funzionale dei segnali EEG in queste regioni è stato convalidato in diversi esperimenti 13,35,36.

Figura 4. La partizione di canale. I canali sono suddivisi in undici regioni. LF: sinistra-frontale (10 canali), MF: linea mediana-frontale (14), RF: destro-frontale (10), LT: sinistra-temporale (13), RT: destro-temporale (13), LC: sinistro-centrale (9), MC: linea mediana-centrale (14), RC: destro centrale (9), LP: sinistra-occipitale parietali (9), MP: linea mediana-occipitale parietale (12), RP :. parietale-occipitale destra (9) Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande di questa figura.
- Caricare i EEG puliti nel passaggio 3.8. Calcolare il ERP canale media di segnali attraverso epoche in ogni canale, e ERP regionale facendo la media ERP all'interno della stessa regione.
Nota: Quando EEG vengono caricati utilizzando la funzione pop_loadset.m in EEGLAB, i segnali vengono memorizzati nella variabile struttura "EEG.data" in una matrice di canale per time-by-epoca. - Nella finestra di comando Matlab, calcolare l'ERP canale facendo la media EEG.data attraverso le epoche per ogni canale (ad esempio, channelERP = media (EEG.dat, 3)). Calcolare il ERP regionale calcolando la media delle ERP canale all'interno di ogni regione in base alla partizione a 4.1 (ad esempio, regionalERP = media (channelERP (indice, :), 1), dove "l'indice" sta per gli indici di canale in una determinata regione).
- Calcolare i ERSPs canale applicando una trasformata tempo-frequenza (es Wavelet Transform) per epoch segnali di ciascun canale, e ERSPs regionali mediando canale ERSPs nella stessa regione.
- Eseguire la trasformata tempo-frequenza chiamando la funzione pop_newtimef.m.
Nota: In questo studio, la voce "cicli wavelet" è impostato su [1, 0.5] e "base" è impostato su [-2.000--1.200] msec. I ERSPs canale risultanti saranno memorizzati in una matrice di frequenza-by-tempo per canale. - Nella finestra di comando Matlab, calcolare la ERSP regionale facendo la media ERSPs attraverso i canali all'interno di ciascuna regione in base alla partizione 4.1 (ad esempio, regionalERSP = media (channelERSP (:,:, indice), 3), dove "channelERSP" è l'uscita dalla funzione pop_newtimef.m, e "indice" sta per gli indici di canale a AGregione Iven).
- Calcolare i valori medi in diversi intervalli di tempo (ad esempio, 50-150, 150-250, 250-350, 350-450 msec) per ERP regionale. Calcolare i valori medi in diversi intervalli di tempo-frequenza (ad esempio 50-150, 150-250, 250-350, 350-450, 450-800 msec a 1-7 Hz, e 200-800 msec a 8-30 Hz) per regionali ERSPs.
- Applicare MANOVA nel software statistico (ad esempio IBM SPSS) per i valori medi di ERP regionali e ERSPs per valutare gli effetti principali per il compito (fotografia vs. linea-disegno), regione (undici regioni del cuoio capelluto), e il gruppo (AS rispetto al controllo) , nonché gli effetti di interazione tra il compito, regione e gruppo.
- Nell'analisi statistica, in considerazione di genere (maschi vs femmine) come covariata, e stimare i principali e di interazione effetti tenendo premuto il costante effetto di genere.