L'obiettivo di questo protocollo è quello di valutare in modo non invasivo i cambiamenti strutturali e funzionali cardiaci in un modello murino della malattia di cuore creato da trasversali costrizione aortica, con B e M-mode ecocardiografia e colore / impulsi di imaging onda Doppler.
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Articolo metodologico
Valutazione del Cardiac morfologiche e funzionali Variazioni modello murino di trasversale aortica costrizione da parte ecocardiografica Imaging
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
La costrizione aortica trasversa (TAC) nei topi è stata utilizzata come modello prezioso per studiare i meccanismi dell'ipertrofia cardiaca e dell'insufficienza cardiaca1. Un metodo affidabile e non invasivo è essenziale per valutare in tempo reale i cambiamenti morfologici e funzionali cardiaci in modelli animali di malattie cardiache. L'ecocardiografia transtoracica rappresenta uno strumento importante per la valutazione non invasiva della struttura e della funzione cardiaca2. Qui abbiamo utilizzato un sistema di imaging a ultrasuoni ad alta risoluzione per monitorare il rimodellamento miocardico e la progressione dell'insufficienza cardiaca nel tempo in un modello murino di TAC. L'imaging B-mode, M-mode e Doppler sono stati utilizzati per valutare con precisione l'ipertrofia cardiaca, la dilatazione ventricolare e il deterioramento funzionale nei topi dopo TAC. L'imaging Doppler a colori e a onde di polso (PW) è stato utilizzato per misurare in modo non invasivo il gradiente di pressione attraverso la costrizione aortica creata dalla TAC e per valutare il flusso sanguigno trasmissivo nei topi. Pertanto, l'imaging ecocardiografico transtoracico fornisce misurazioni complete e non invasive delle dimensioni e della funzione cardiaca in modelli murini di malattie cardiache.
Introduzione
I modelli murini di malattie cardiache, come la TAC e l'infarto del miocardio (IM), si sono dimostrati preziosi per studiare i meccanismi della malattia e per sviluppare nuove strategie terapeutiche3. La TAC induce inizialmente ipertrofia compensatoria, ma un sovraccarico di pressione prolungato porta a dilatazione cardiaca e insufficienza cardiaca4. La tenuta della costrizione aortica determina direttamente il grado di ipertrofia cardiaca e la sua transizione all'insufficienza cardiaca. La misurazione non invasiva e affidabile del gradiente di pressione attraverso la costrizione aortica è essenziale per il successo di questi studi. L'imaging Dop....
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Protocollo
Il protocollo segue le linee guida del Comitato Cura e uso istituzionale animali dell'Università di Washington.
1. Procedura chirurgica e preparazione per l'imaging
- Soggetto C57BL / 6 topi per TAC o la chirurgia sham come descritto in precedenza 10.
- Una settimana dopo la TAC o la chirurgia sham, anestetizzare il mouse nella camera di induzione con il 2% isoflurano mescolato con 1 L / min O 2. Verificare il corretto anestesia per mancanza di risposta alla punta o la coda pizzicare. Usare pomata veterinario occhi per prevenire la secchezza mentre sotto anestesia. Rimuovere i peli del torace....
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Risultati
La figura 1 mostra le immagini B-mode della vista aortico del cuore del mouse sottoposti a sham (Figura 1A) o la chirurgia TAC (Figura 1B). L'arco aortico, arteria anonima, ha lasciato l'arteria carotide comune, e l'arteria succlavia sinistra sono mostrati. Si noti che costrizione aortica è chiaramente visibile nel TAC, ma non sham cuore. Immagini Color Doppler da vista aortica sono mostrati nella Figura 2A. .......
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Discussione
L'ecocardiografia è stato ampiamente utilizzato per valutare la funzione cardiaca in modelli di roditori di malattie cardiache 2,6. Rispetto alle metodologie invasive o terminali, come la pressione-volume di misura del ciclo 11 e ex vivo di lavoro del cuore 12, l'ecocardiografia fornisce un potente, strumento non invasivo per valutare i cambiamenti strutturali e funzionali cardiache in corso in animali viventi. Per ottenere dati affidabili, è importante mantenere la temp.......
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Dichiarazioni
Questo lavoro è stato sostenuto in parte dalle sovvenzioni NIH/NHLBI R00HL0908076 e R01HL116507 (a Q.L.).
Ringraziamenti
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Apparecchiature per anestesia | Harvard Apparatus, 84 October Hill Road Holliston, MA | 723015 | |
| Vevo 2100 Imaging System | VisualSonics Inc., 3080 Yonge Street Suite 6100, Box 66, Toronto, Ontario, Canada | Vevo 2100 | |
| Aquasonic gel per ultrasuoni | Parker Laboratories, 286 Eldridge Rd, Fairfield, NJ | 03-50 | |
| Isoflurane | Piramal Healthcare, Inc, 3950 Schelden Circle Bethlehem, PA | NDC 66794-017-25 | |
| Unità di filtraggio del gas per anestesia F/air | AM Bickford, Inc, 12318 Big Tree Rd, Wales Center, NY | Codice 80120 |
Riferimenti
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci USA. 88 (18), 8277-8281 (1991).
- Tanaka, N., et al.
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Ristampe e permessi
