Viene descritto un protocollo di produzione per la produzione su piccola scala di bevande probiotiche a base di latte fermentato con l'aiuto di una nuova coltura batterica starter.
Articolo metodologico
Viene descritto un protocollo di produzione per la produzione su piccola scala di bevande probiotiche a base di latte fermentato con l'aiuto di una nuova coltura batterica starter.
Un romanzo essiccato consorzio batterica di Lactobacillus rhamnosus yoba 2012 e Streptococcus thermophilus C106 è coltivato in 1 L di latte. Questo avviamento fresca può essere utilizzata per la produzione di latte fermentato e altri alimenti fermentati a casa o in scala ridotta in ambienti rurali. Per l'antipasto fresco, 1 L di latte viene pastorizzato in una vaschetta che si inserisce in un più ampio acqua contenente pan, posto su una fonte di calore. In questo bagno d'acqua, il latte viene riscaldato ed incubate a 85 ° C per 30 min. Successivamente, il latte viene raffreddato a 45 ° C, trasferito in una beuta da vuoto, inoculati con i batteri essiccati e sinistra per almeno 16 ore tra 30 ° C e 45 ° C. Ai fini della produzione sede frequente, l'avviatore fresca viene congelata in cubetti di ghiaccio, che possono essere utilizzati per la produzione di piccoli volumi fino a 2 litri di latte fermentato. Ai fini della produzione su piccola scala nei paesi poveri di risorse, la pastorizzazione fino a 100 L di I Lattes condotti in lattine di latte che vengono inseriti in una grande casseruola riempito con acqua e riscaldato su un fuoco a 85 ° C per 30 minuti, e successivamente raffreddata a 45 ° C. Successivamente, il 100 L batch viene inoculato con 1 L di avviamento appena preparata menzionato prima. Per assicurare una fermentazione efficace a una temperatura compresa tra 30 e 45 ° C, il latte può è coperto con una coperta per 12 ore. Per la produzione di alimenti fermentati non-caseari, l'avviatore fresco viene lasciato in un panno formaggio per 12 ore, e il siero drenato off può essere successivamente utilizzato per l'inoculazione di una vasta gamma di materie prime alimentari comprendente legumi e di cereali alimenti a base di.
Questo articolo descrive un protocollo di produzione che consente la produzione di latte fermentato nutriente e probiotici e altri alimenti fermentati probiotici con l'aiuto di una cultura seme che ha dimostrato benefici per la salute. Il protocollo è robusto e facile da eseguire da parte di chiunque, in qualsiasi luogo, compresi i paesi poveri di risorse.
In Africa sub-sahariana, il 21% delle morti di bambini <5 anni è causata da diarrea 1, di cui il 29% è causato da eziologia rotavirali in particolare 2. E 'stato dimostrato che il consumo giornaliero di alimenti fermentati contenente una dose raccomandata di 1 x 10 10 CFU di L. rhamnosus GG stimola la salute intestinale e riduce l'incidenza e la gravità di rotavirus diarrea associata 3-7.
Batteri benefici sono presenti in una vasta gamma di cibi tradizionali fermentati in tutta l'Africa subsahariana 8-10. Tuttavia, questi alimenti sono quasi esclusivamente in casa produced, hanno un parente breve durata e sono aumentati rischi per la sicurezza a causa della natura non controllata della fermentazione 11. Inoltre, il consumo di questi alimenti tradizionali diminuisce a causa di urbanizzazione e di una occidentalizzazione generale di diete in Africa 10,12.
Il batterio probiotico generica L. rhamnosus yoba 2012 13, che è identico a L. rhamnosus GG, è stato introdotto dopo il brevetto originale per L. rhamnosus GG era scaduto 14. La cultura seme essiccato ha un A w di circa 0,1, che mantiene l'elevata redditività dopo uno stoccaggio di almeno un anno a temperatura ambiente (dati non mostrati).
La cultura seme viene confezionato in porzioni di 1 g e può essere utilizzato per la produzione di un massimo di 100 L di latte fermentato. Quando la produzione di uno o due lotti al giorno, le colture starter possono aiutare a raggiungere una capacità produttiva fino a 1.000 L a settimana da Evary-giorno latte fresco.
L'uso di L. rhamnosus Yoba 2012 con S. thermophilus C106 come una cultura adiuvante che permette Lactobacillus probiotico per propagare 15 è un consorzio di batteri unico che non è stato riportato da altri autori. Il protocollo produzione comporta risospensione da una pacchetto di contenuto (1 g) di liofilizzato coltura starter (coltura seme) in 1 L di latte, risultante in un cosiddetto avviamento fresco dopo incubazione per un periodo di 16 ore. L'avviatore fresco è successivamente usato per inoculare un massimo di 100 L di latte. Questo metodo di pre-incubazione riduce la quantità di batteri liofilizzati utilizzati, riducendo così i costi di produzione rispetto a incubazione diretta come ad esempio descritto da Goff 16. La formulazione utilizzata per il protocollo descritto in questo documento mantiene i vantaggi di una coltura liofilizzata, come la stabilità shelf life e facile stoccaggio e manipolazione, con conseguente altamente rfermentazioni eproducible.
Inoltre, il disciplinare di produzione, come descritto in questo articolo non richiede attrezzature ad alta tecnologia in contrasto con i metodi di produzione standard utilizzati nel mondo sviluppato 17.
Infine l'avviatore fresca può essere utilizzato per l'inoculo di altri (non-casearia) materie prime per la produzione di una vasta gamma di alimenti fermentati come è mostrato con successo per Obushera, KWETE, Uji e Zomkom, tutti gli alimenti tradizionalmente fermentati a base di cereali dall'Uganda (i primi due), Kenya e Burkina Faso, rispettivamente, 15. Questo è solo una frazione minore della grande quantità di alimenti fermentati sviluppati in Africa 18.
La fermentazione è la ripartizione delle macromolecole, come amido, zuccheri e proteine in prodotti che hanno una digeribilità aumentate, attraverso le attività di enzimi e / o microrganismi. La fermentazione è una tecnica ampiamente usata in Africa sub-sahariana. togetere con l'essiccazione e la salatura permette la conservazione degli alimenti, in assenza di strutture o tecniche industriali come conserve 9,19 raffreddamento. Fermentazione tradizionale utilizza spesso back-slopping, in cui si aggiunge una piccola porzione da un lotto precedente in un batch per facilitare la fermentazione e per ridurre la probabilità di fallimento di fermentazione 11. Harrison e Tomkins 20 descrivono una vasta gamma di alimenti tradizionali africane fermentati a base di mais, sorgo o il miglio, e il ruolo benefico questi alimenti possono portare i bambini per lo svezzamento, per esempio riducendo la diarrea infantile e la mortalità associate. Nout e Sarkar 19 descrivono la produzione tradizionale di un piatto di manioca fermentata che è ampiamente consumato in Africa occidentale. Franz et al. 9 fornisce una descrizione dettagliata di alimenti fermentati africani classificati in cereali e verdura alimenti, cibi colture radice amidacei e alimenti ricchi di proteine animali. In aggiunta a ciò, Narvhus e Gadaga 21 specificamente descrivere la tradizionale produzione di latte fermentato in Africa.
Per la produzione di latte fermentato probiotici (o altri alimenti fermentati), soprattutto nel caso di produzione di casa, la disponibilità di un congelatore è vantaggioso per memorizzare l'avviatore fresco in porzioni congelati. In paesi poveri di risorse, la produzione di latte fermentato può essere eseguita anche da parte delle comunità produttrici di latte. L'esperienza attuale con le comunità locali in Uganda indica che le cooperative lattiero-caseari sono entità adatte per avviare la produzione di yogurt dalle proprie forniture di latte. La disponibilità di una lattina latte è vantaggioso, anche se è possibile, anche se meno preferibile, per preparare grandi lotti di latte fermentato in una padella grande. Inoltre, la disponibilità di energia elettrica e la essa relativo presenza di raffreddamento impianti in negozi locali e chioschi nei paesi poveri di risorse è un vantaggio per l'espansione del business e la riduzione operdite f dovute a deterioramento. Tuttavia, come sarà discusso nel protocollo, attraverso l'aggiunta di sorbato di potassio è possibile conservare lo yogurt per diversi giorni a temperatura ambiente e ridurre spoilages in caso di fluttuazioni di potenza.
1. Preparazione del dolce Starter
Per preparare l'antipasto fresco, prendere 1 L di entrambi ultra-alta temperatura (UHT) trasformati o latte vaccino fresco. Se si tratta di latte UHT, procedere al punto 1.3. Se si tratta di latte di mucca fresco, procedere con passo 1.1.
2. La produzione di piccoli lotti a livello familiare
3. Produzione in ambiente rurale in paesi poveri di risorse
Nota: utilizzare un massimo di 100 l di latte per 1 L antipasto fresco.
4. Produzione di altri alimenti fermentati
Questa sezione descrive la produzione di alimenti fermentati diversi dal latte fermentato con un volume massimo di circa 50 L.
Il lato sinistro della tabella 1 mostra un diagramma schematico della sezione 1 del protocollo. Questo è seguito da un diagramma combinato generalizzato delle sezioni 2 e 3 sul lato destro della tabella.
Profili di fermentazione di latte inoculato con la cultura seme utilizzando il protocollo di produzione come descritto in questo articolo sono stati registrati. La figura 1 mostra la fermentazione dello starter fresco (come descritto nella sezione 1). La Figura 2 mostra la fermentazione del latte fermentato (prodotto finale , come descritto nelle sezioni 2 e 3). Poiché in pratica nelle zone rurali rigoroso controllo della temperatura è difficile, le misurazioni sono state effettuate a temperatura di 37 ° C e 45 ° C.
Per fermentazione a 37 ° C, i profili acidificazione dei due bustine testati mostrano una leggera differenza nell'insorgenzadell'acidificazione esponenziale di circa 30 minuti, sia nella produzione di starter fresco e il prodotto finale. I valori di pH finali di entrambe le culture sono uguali, dopo 16 ore.
Valori di pH tipici e titoli per la L. propagato rhamnosus e S. ceppi thermophilus seguendo le procedure descritte di produzione per i diversi alimenti fermentati può essere trovato nella tabella 2 Cell. conta per L. rhamnosus e S. thermophilus sono stati determinati sulla agar MRS e LM17 rispettivamente, utilizzando comunemente applicati metodi di placcatura microbiologici. Conta delle cellule finali di L. rhamnosus Yoba 2012 sono stati 1,7 x 10 7, 3,7 x 10 9 e 3,3 x 10 9 CFU ml -1 per il latte fermentato, KWETE e uji, rispettivamente. valori di pH finale erano rispettivamente 4,3 e 4,2 per il latte fermentato e KWETE,. I risultati preliminari indicano che l'aggiunta di potassio sorbato prima della fermentazione non influenza negativamente, ma anche aumenta il numero di vitali L. rhamnosus Yoba 2012 batteri nello yogurt due settimane dopo la produzione (dati non riportati).
La Figura 3 mostra i risultati della cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) in combinazione con un indice di rifrazione (RI) rilevatore di latte non fermentato rispetto al latte fermentato. I risultati indicano che i livelli di lattosio nel latte diminuzione, mentre i livelli di acido lattico e livelli di galattosio aumentano, che è un risultato dell'attività metabolica della cultura seme.

Figura 1. profilo fermentazione dello starter fresca fatta di semi latte scremato (grassi 1,5%, 3,5% di proteine). Un litro di latte è stato inoculato con una bustina (1 g) di coltura sementi e fermentato a 37 ° C(••••, duplicare), così come 45 ° C (- - - -, duplicate) per 16 ore. La linea retta (----) a pH 4.4 è inserito come indicazione per determinare quando la fermentazione è completata. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Figura 2. Profilo fermentazione del latte fermentato (prodotto finale) di semi latte scremato (grassi 1,5%, 3,5% di proteine). Un litro di latte è stato inoculato con una 20 g di avviamento fresco e fermentato a 37 ° C (•• ••, duplicare), così come 45 ° C (- - - -, duplicate) per 16 ore. La retta (----) a pH 4.4 è inserito come un'indicazione per determinare quando la fermentazione è completata.Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Figura 3. modelli HPLC-eluizione di latte non fermentato (nero) e latte fermentato per 16 ore con la cultura seme (blu). I modelli di eluizione indicano il consumo di lattosio e produzione di galattosio e lattato. Zuccheri e acido debole sono stati individuati sulla base del tempo di ritenzione e il rapporto superficie massima di raggi UV-assorbanza e indice di rifrazione. Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Tabella 1. Seed cultura appli protocollo zione. Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa tabella.

Tabella 2. Propagazione di Lactobacillus rhamnosus yoba 2012 in una varietà di alimenti fermentati. I dati sono stati ottenuti da Kort et al. 15. Le fermentazioni sono state effettuate a 37 ° C, salvo diversa indicazione. La conta delle cellule di L. rhamnosu s Yoba 2012 e S. thermophilus C106 dopo l'inoculazione sia variato tra 1 x 10 6 e 1 x 10 7 CFU ml -1. Il mutandabota funzionale è stato preparato con un antipasto contenente esclusivamente L. rhamnosus Yoba 2012 come riportato da Mpofu et al 24.; ND, non determinato.d / 54365 / 54365tbl2large.jpg "target =" _ blank "> Clicca qui per vedere una versione più grande di questa tabella.
File supplementare. La produzione locale e le vendite di yogurt probiotico in Africa rurale. Scatti e immagini sono prese in Balawoli e Namagera, Uganda, maggio 2016. La clip mostra la catena del valore a partire dal ricevimento del latte a lavorazione, confezionamento, vendita e, infine, al consumo di un lotto di 50 L di yogurt probiotico, preparati con l'uso solo attrezzature di base. clicca qui per scaricare.
Il semplice protocollo di produzione utilizzando attrezzature di base e un nuovo fermentato cultura alimentare di avviamento descritto in questo articolo facilita la produzione di alta qualità del latte fermentato probiotici a livello domestico e in ambienti rurali nei paesi poveri di risorse. E 'fondamentale per pastorizzare il latte per un minimo di 30 minuti al fine di ottenere la riduzione o l'eliminazione di organismi alteranti e potenziali microrganismi patogeni sufficiente. Inoltre, il riscaldamento adeguato provoca denaturazione delle proteine del siero di latte 17 che saranno successivamente associarsi con micelle di caseina 25 causando la formazione di legami incrociati nel latte fermentato 26. Di conseguenza, la viscosità del prodotto finale è maggiore rispetto al latte riscaldato meno estesamente 27. E 'anche importante evitare inoculo del latte superiore a 45 ° C, perché a temperature più elevate i batteri vengono inattivati.
Allo stesso modo, se disponibili e costiEfficace, l'uso di latte UHT è preferito, soprattutto per la produzione di starter fresco. In primo luogo, il latte UHT è praticamente privo di microrganismi indesiderati. In secondo luogo, in UHT proteine di siero di latte sono stati ampiamente denaturato, che li rende più accessibile per le proteasi batteriche, promuovendo la loro degradazione e successiva crescita dei batteri yogurt. Durante il processo di raffreddamento, le proteine parzialmente ripiegare al loro stato nativo, quindi ri-riscaldamento prima dell'inoculo è vantaggioso per la produzione di yogurt. risultati fermentazione prolungata in un latte fermentato con un pH <4,4, che è spesso indesiderabile. La fermentazione può essere fermato in modo tempestivo ponendo il latte fermentato in frigo.
Produzione locale yogurt in Africa hanno dimostrato di contenere livelli significativi di lattococchi 28 come L. lactis, che può causare la produzione di peptidi che hanno un sapore amaro 29-32, che è generalmente undesirabLe 31. Pertanto, è fondamentale che la fermentazione avviene ad una temperatura tra 45 e 35 ° C 15,28. Poiché la temperatura diminuirà lentamente durante la fermentazione in un ambiente semi-controllato, inoculazione avviene a 45 ° C, la temperatura massima ammissibile. isolamento sufficiente durante la fermentazione è essenziale per evitare diminuzione della temperatura inferiore a 35 ° C.
la produzione manuale di yogurt in ambiente rurale ha un rischio relativamente elevato di contaminazione microbica da parte di organismi di deterioramento. In particolare, i lieviti sono in grado di propagare nelle condizioni acide in yogurt. Contaminazione lievito può causare eccessiva produzione di gas, sia nella fase di incubazione o il magazzinaggio, rovinando così il yogurt immediatamente o significativamente accorciando la conservabilità 33,34. livelli di lievito possono essere minimizzati sterilizzazione a calore e / o pulizia con ipoclorito di sodio di tutti gli utensili e le attrezzature prima di ogni spirito di contatto h il latte o yogurt. Soprattutto dopo il lievito deterioramento si è verificato, la sterilizzazione e la pulizia grave ed estesa è necessario per eliminare la contaminazione.
I rischi sopra descritti mostrano chiaramente che il successo dell'applicazione di questo protocollo produzione nei paesi poveri di risorse è limitata dalla sua natura manuale e ad esso associato aumentato tasso deterioramento. Il tasso di deterioramento diventa ancora più elevato nelle comunità che la mancanza impianti di raffreddamento o che hanno disponibilità molto fluttuante di energia elettrica. Anche la mancanza di accesso a materiale di imballaggio di alta qualità a prezzi accessibili può limitare l'assorbimento del protocollo descritto. L'attrezzatura necessaria è essenziale e universale, ma un laboratorio o cucina termometro è essenziale. Infine, attualmente solo un numero limitato di paesi hanno le strutture per produrre il liofilizzati coltura starter. La maggior parte dei paesi poveri di risorse non dispongono di tali strutture, e quindi dipendono da importazioni per ottenere questo prodotto.
_content "> Tra i prodotti alimentari, latte fermentato compreso yogurt è il veicolo più comune per i batteri probiotici. La produzione di latte fermentato non richiede attrezzature speciali a parte un termometro. Così la combinazione di quanto sopra descritto per primo nucleo fermenti probiotici 13 con un semplice disciplinare di produzione consente la produzione riproducibili, controllata e sicura di latte fermentato probiotici da quasi chiunque, in qualsiasi luogo, compresa la produzione a livello di settore per la casa e la casa di campagna nelle zone rurali dei paesi poveri di risorse. in tradizionalmente praticata fermentazioni naturali, pari livelli di probiotici i batteri non possono essere garantite 9. la cultura d'avviamento di auto-stabile in 1 g bustine consenta ai produttori su piccola scala in modo redditizio produrre alimenti fermentati, senza la necessità di acquistare grandi quantità di colture starter che di solito perdono vitalità dopo l'apertura della confezione, soprattutto quando conservato a temperatura ambiente e ad una elevata umidità relativa, che èa nostra conoscenza il caso per tutte le altre culture yogurt di avviamento disponibili. Inoltre, la quantità di batteri secchi che viene importato rimane molto basso, inferiore allo 0,1% della concentrazione cultura probiotici nel prodotto finale, perché quasi tutta la coltura starter prodotto localmente a causa del metodo di pre-incubazione descritto in questo protocollo .La produzione di latte fermentato è descritto in dettaglio in questo articolo e può essere un primo passo per padroneggiare l'arte di produrre alimenti fermentati probiotici, che successivamente possono essere applicati a fermentare molti tipi di altri alimenti (di cui in questo articolo). Per aggiornare latte fermentato base, un possibile passo successivo è la produzione di reale frutta latte fermentato. Questo richiede la preparazione di un frutto sterile conserva di (una miscela di frutta, zucchero ed eventualmente alcuni additivi) o l'acquisto di un frutto ready-made preservare da miscelare con il latte fermentato dopo la fermentazione 35,36.
Wilbert Sybesma e Remco Kort sono i fondatori del Yoba per fondazione Life, un non-profit, accreditato presso le autorità fiscali olandesi come Benevolent Institution pubblica (PBI), che mira a promuovere la produzione e il consumo di prodotti fermentati in Africa locali . prodotti fermentati a base di cultura seme Yoba, tra cui yogurt, zomkom, obushera e mutandabota non sono commercializzati dalla fondazione in quanto tale, ma il Yoba per fondazione Vita stimola la produzione e la proprietà locale, consentendo attività generatrici di reddito per gli imprenditori africani nel settore alimentare . Il Yoba for Life Fondazione distribuisce e vende bustine pronte per l'uso con secchi culture semi batterica attraverso una rete di partner e volontari per favorire la produzione locale di latte e prodotti dalla fermentazione batterica controllata a base di cereali.
Gli autori riconoscono il progetto East Development Dairy africana (EADD) per il loro sostegno concreto sul terreno in formazione cooperative lattiero-casearie in Uganda rurale nella produzione di latte fermentato. CSK cibo arricchimento è riconosciuto per la produzione, il controllo della qualità e la valutazione della capacità fermentativa della coltura starter. Lactosan GmbH & Co, in Austria, è riconosciuto per assistenza alla produzione. Gli autori ringraziano Karin Overkamp (TNO Microbiologia e biologia dei sistemi, Zeist, Paesi Bassi) per l'analisi HPLC, e Derrick Assimwe (UIRI) per la registrazione di dichiarazioni autore in Uganda. Queste registrazioni hanno avuto luogo nel corso della riunione inizio IDRC-supportata del cibo fermentato per il progetto di vita (CIFSRF Fase 2) a Entebbe, in Uganda, maggio 2016. La VU University Amsterdam e il museo Micropia sono riconosciuti per i contributi finanziari e fornitura di strutture di laboratorio per la produzione del video descritto in questo articolo. Gli autori ringraziano Wim van Egmondper microscopia dei batteri yogurt.
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Coltura iniziale Yoba | Fondazione Yoba for | Life-Latte | |
| Ottenuto da mucca | locale-Latte fresco, intero, privo di antibiotici e ottenuto da una mucca sana | ||
| Opzionalmente Zucchero | Acquistato al supermercato | locale-È | stata utilizzata la cannasugra, ma è possibile anche lo zucchero di barbabietola. Privo di impurità |
| Termometro da laboratorio | Narang Scientific Industries | TM-01 | |
| Lattometro | Narang Scientific Industries | LM-01 | |
| Etanolo 96% | Sigma Aldrich | 476226 | |
| pH carta | Macherey-Nagel GmbH & Co | 90206 | |
| Garza | Beyond | Gourmet-Qualsiasi | garza per alimenti di alta qualità può fare |
| Setacciatore/colino | Cuisinart | CTG-00-3MS | Qualsiasi filtro a maglia fine può fare, ma sono preferiti i filtri in acciaio inossidabile. |
| Thermos da 1 L | Acquistato presso il magazzino | locale-Padella | |
| da 1 L + coperchio | Acquistato presso il magazzino | locale-Padella | da |
| 2 L | Acquistato presso il magazzino | locale-Qualsiasi | materiale resistente al calore e impermeabile andrà bene Padella |
| 50 L | Acquistato presso il magazzino | locale-Qualsiasi | materiale resistente e impermeabile andrà bene |
| Lattina | di latte Narang Scientific Industries | MC-SS-30 | Qualsiasi lattina in acciaio inossidabile può fare |
| Coperta | acquistata presso il magazzino locale | : | più spessa è la coperta, migliore è l'isolamento |
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