Sono descritte le fasi cruciali di polimerizzazione anionica vivente di etere fenil glicidil (PheGE) di glicole metossi-polietilene (MPEG-b -PPheGE). Le micelle copolimero a blocchi risultanti (BCMS) sono stati caricati con doxorubicina 14% (% in peso) e rilascio prolungato di farmaci oltre 4 giorni sotto fisiologicamente è stato ottenuto relative condizioni.
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Articolo metodologico
Anionico polimerizzazione di un copolimero Amphiphilic per la preparazione di copolimero a blocchi micelle stabilizzata da π-¸ Interazioni Stacking
In questo articolo
Sommario
Abstract
In questo studio, un copolimero anfifilica che comprende un blocco di formazione nucleo con gruppi fenilici è stato sintetizzato da polimerizzazione anionica vivente di fenil glicidil etere (PheGE) on metossipolietilenglicole (MPEG-b -PPheGE). Caratterizzazione del copolimero rivelato una stretta distribuzione molecolare (PDI <1.03) e confermato il grado di polimerizzazione di mPEG 122 - b - (PheGE) 15. La concentrazione critica micellare del copolimero è stata valutata utilizzando un metodo a fluorescenza stabilita con il comportamento di aggregazione valutate dalla dispersione della luce dinamica e trasmissione microscopia elettronica. Il potenziale del copolimero per l'uso in applicazioni di consegna della droga è stata valutata in modo preliminare compreso in vitro biocompatibilità, caricamento e rilascio del idrofobico antitumorale doxorubicina farmaco (DOX). Una formulazione micelle stabile di DOX è stato preparato con i livelli di farmaco di carico fino al 14% (% in peso), carico di droga efficiper proiezione> 60% (w / w) e sostenuta rilascio di farmaco per 4 giorni in condizioni fisiologicamente rilevanti (pH acido e neutro, presenza di albumina). Il livello elevato carico di droga e rilascio prolungato è attribuita alla stabilizzazione interazioni ¸-π tra DOX e il blocco di centro di formazione delle micelle.
Introduzione
In mezzi acquosi, copolimeri a blocchi anfifilici assemblare per formare micelle copolimero a blocchi di dimensioni nanometriche (BCMs) che consistono di un nucleo idrofobico circondato da un guscio idrofilo o corona. Il nucleo micelle può fungere da serbatoio per l'incorporazione di farmaci idrofobi; mentre, la corona idrofila fornisce un'interfaccia tra il nucleo e il mezzo esterno. Poli (etilene glicole) (PEG) e suoi derivati sono una delle più importanti classi di polimeri e uno dei più ampiamente utilizzato nella formulazione di droga. 1-3 BCMs hanno dimostrato di essere una piattaforma drug delivery degna con diverse formulazioni basandosi su....
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Protocollo
Figura 1. Schema che mostra i nove passi chiave nella preparazione del MPEG-b -PPheGE copolimero. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.
1. Preparazione dei reagenti in condizioni asciutte
- Preparazione dei reagenti.
- Pesare 15 g di mPEG-5K (M n = 5400 g / mol, PDI 1.03) e posto a 50 ° C in stufa sotto vuoto per 48 ore prima dell'uso.
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Risultati
Figura 3. Illustrazione della polimerizzazione anionica fenil glicidil etere sull'MPEG macroinitiator produrre MPEG-b - (PheGE) 15 per la preparazione di micelle copolimero a blocchi per il caricamento di doxorubicina La rappresentazione la deprotonazione del gruppo ossidrile di mPEG utilizzando naftalene potassio.
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Discussione
Grazie al buon controllo che la polimerizzazione anionica fornisce più di peso molecolare è uno dei processi più applicati nell'industria per la preparazione di polimeri a base di monomeri di ossirano (PEG e PPG). Le condizioni ottimali e stringenti devono essere utilizzati per la polimerizzazione di successo da raggiungere. la purificazione rigorosa di tutti i reagenti e apparecchi adeguata sono essenziali per il personaggio vivente della sintesi. Limitazioni della configurazione attuale sono per lo più associati c.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
CA riconosce una sovvenzione Discovery dal Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada. CA riconosce una cattedra in Farmaceutica e somministrazione di farmaci da GSK. Gli autori dichiarano di non avere alcun interesse finanziario concorrente.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| DMEM/HAMF12 | Gibco, Life Technologies | 12500 | Integrato con il 10% di FBS. Caldo a 37 gradi C bagnomaria. |
| Tripsina-EDTA (0,25%) | Sigma-Aldrich | T4049 | Caldo in 37 gradi C bagno d'acqua |
| Siero fetale bovino (FBS) | Sigma-Aldrich | F1051 | origine Canada |
| MDA-MB-468 linea cellulare | ATCC | HTB-132 | |
| MTS reagente tetrazolio | PROMEGA | G111B | |
| Fenazina etosolfato (PES) | Sigma-Aldrich | P4544 | >95% |
| mPEG5K (Mn 5.400 g/mol) | Sigma-Aldrich | 81323 | PDI=1.02 |
| Dimetilsololfossido (DMSO) | Sigma-Aldrich | D4540 | >99,5% |
| Naftalene | Sigma-Aldrich | 147141 | >99% |
| Fenil glicidil etere | Sigma-Aldrich | A32608 | >85% |
| Benzofenone | Sigma-Aldrich | 427551 | >99% |
| Potassio | Sigma-Aldrich | 451096 | >98% |
| Tetraidrofurano | Caledon Prodotti chimici di laboratorio | 8900 1 | ACS |
| Esano | Caledon Prodotti chimici di laboratorio | 5500 1 | ACS |
| Idruro di calcio (CaH2) | ACP | C-0460 | >99,5% |
| Etere etilico | Caledon Prodotti chimici di laboratorio | 1/10/4800 | ACS |
| Lettore di micropiastre | BioTek Instruments | ||
| Calorimetria differenziale a scansione (DSC) | TA Instruments Inc | DSC Q100 | |
| Cromatografia a permeazione di gel (GPC) | Waters | 2695 moldule di separazione / 2414 rivelatore | 2 colonne: Agilent Plgel 5 µ m |
| Spettroscopia NMR | Mixed-D Varian Mercury 400MHz | ||
| Cloroformio-d | Sigma-Aldrich | 151858 | 99,96% |
| DMSO-d | Sigma-Aldrich | 156914 | 99,96% |
| Pompa per vuoto | Gardner Denver Welch Vacuum Tech, Inc. | Pressione finale 1x10-4 torr | |
| Drierit con indicatore, 8 mesh | Sigma-Aldrich | 238988 | Rigenerato a 230 ° C per 2 ore |
Riferimenti
- Dickerson, T. J., Reed, N. N., Janda, K. D. Soluble Polymers as Scaffolds for Recoverable Catalysts and Reagents. Chemical Reviews. 102, 3325-3344 (2002).
- van Heerbeek, R., Kamer, P. C. J., van Leeuwen, P. W. N. M., Reek, J. N. H. Dendrimers as Support for Recoverable Catalysts an....
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Ristampe e permessi
