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Articolo metodologico

Laterale cronica cranica finestra Preparazione Attiva In Vivo Condizioni seguito distale Medio occlusione dell'arteria cerebrale nei topi

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DOI:

10.3791/54701

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29 dicembre 2016

In questo articolo

Sommario

l'occlusione chirurgica di un ramo distale dell'arteria cerebrale media (MCAO) è un modello di uso frequente nella ricerca ictus sperimentale. Questo manoscritto descrive la tecnica base di MCAO permanente, combinata con l'inserimento di una finestra cranica laterale, che offre la possibilità di longitudinale microscopia intravitale nei topi.

Abstract

Ischemia cerebrale focale (cioè, ictus ischemico) può causare gravi lesioni cerebrali, portando ad una grave perdita della funzione neuronale e di conseguenza ad una serie di motore e disabilità cognitive. La sua alta prevalenza pone un grave onere di salute, come l'ictus è tra le principali cause di disabilità a lungo termine e morte nel mondo 1. Recupero della funzione neuronale è, nella maggior parte dei casi, solo parziale. Finora, le opzioni di trattamento sono molto limitate, in particolare a causa della finestra temporale ristretta per la trombolisi 2,3. Che determina i metodi per accelerare il recupero da ictus rimane un obiettivo medico prime; tuttavia, questo è stato ostacolato dalla insufficienti intuizioni meccanicistici nel processo di recupero. ricercatori ictus sperimentali utilizzano spesso modelli di roditori di ischemia cerebrale focale. Al di là della fase acuta, la ricerca corsa è sempre più focalizzata sulla fase sub-acuta e cronica dopo ischemia cerebrale. applicare la maggior parte dei ricercatori ictus permanente o tranl'occlusione sient del MCA nei topi o ratti. Nei pazienti, occlusioni di MCA sono tra le più frequenti cause di ictus ischemico 4. Oltre l'occlusione prossimale del MCA utilizzando il modello filamento, l'occlusione chirurgica del distale MCA è probabilmente il modello più utilizzato nella ricerca ictus sperimentale 5. L'occlusione di un distale (la ramificazione delle arterie lenticulo-striate) ramo MCA risparmia tipicamente striato e colpisce soprattutto la neocorteccia. Vessel l'occlusione può essere permanente o transitorio. Alta ripetibilità volume lesione e mortalità molto bassi rispetto al risultato a lungo termine sono i principali vantaggi di questo modello. Qui, dimostriamo come eseguire una cronica finestra del cranio (CW) la preparazione lateralmente al seno sagittale, e poi come chirurgicamente indurre un ictus distale sotto la finestra utilizzando un approccio craniotomia. Questo approccio può essere applicato per l'imaging sequenziale di alterazioni acute e croniche seguente ischemia viaepi-illuminante, confocale a scansione laser, e due fotoni microscopia intravitale.

Introduzione

L'ictus è tra le principali cause di disabilità e morte a lungo termine in tutto il mondo1, al secondo posto dopo la malattia coronarica. Inoltre, l'ictus è la causa principale della disabilità a lungo termine, sottolineando il suo enorme impatto socioeconomico6-8. Al di là del trattamento acuto, lo studio di nuovi approcci e meccanismi per accelerare e migliorare il recupero dopo l'ictus rimane un obiettivo medico primario7.

Negli ultimi decenni, i dati della ricerca sperimentale sull'ictus hanno contribuito in modo sostanziale alla comprensione delle complesse cascate fisiopatologiche innescate dall'ische....

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Protocollo

ETICA DICHIARAZIONE: Gli esperimenti che coinvolgono soggetti animali sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e regolamenti stabiliti dalla Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, Berlino, Germania (G0298 / 13) ei criteri arrivano, a seconda dei casi. Per questo studio, 10 a 12 settimane di età maschi C57Bl / 6J sono stati utilizzati.

1. laterale cronica cranica finestra Preparazione

  1. Eseguire anestesia con una iniezione sottocutanea di ketamina (90 mg / kg) e xilazina (10 mg / kg). Test per la sedazione adeguata con uno stimolo dolore.
  2. Sterilizzare gli strumenti chirurgici e campo chirurgico con il 70% di....

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Risultati

La linea temporale e risultati rappresentativi sono mostrati nelle figure 2 e 3. La preparazione finestra del cranio, con una piccola finestra laterale cranica al seno longitudinale superiore (Figura 2 B, C, D) comporta un basso tasso di mortalità e morbilità quando eseguita da un chirurgo esperto. Tutti i 10 animali sopravvissuti, e tutto CW cronico potrebbe essere utilizzato per l'imaging di alta qualità, anche 28 giorni dopo l'interve.......

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Discussione

L'ictus è tra le principali cause di disabilità a lungo termine e morte nel mondo 1. Al di là di trattamento acuto, indagare nuovi approcci e meccanismi per accelerare e migliorare il recupero dopo l'ictus rimane un obiettivo medica primaria 7. ricercatori ictus sperimentali utilizzano spesso modelli di roditori di ischemia cerebrale focale. Infatti, modelli inducono transitoria o permanente MCAO imitano uno dei tipi più comuni di ischemia cerebrale focale in pazienti 4. Oltre l&.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

VP partecipa al Programma Charité Clinical Scientist, finanziato dalla Charité - Universitätsmedizin Berlin e dall'Istituto di Salute di Berlino. TB è un borsista di mobilità post-dottorato del FNS. Gli autori ricevono sovvenzioni da EinsteinStiftung/A-2012-153 a PV.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Microscopio chirurgico binoculareZeissStemi 2000 C
Sorgente luminosa per microscopioZeissCL 6000 LED
Piastra riscaldante con sonda rettaleFST21061-10
Telaio stereotassicoKopfModello 930
Sistema di anestesia per isofluranoDraeger
IsofluranoPinza Abott
Dumont #5FST11251-10
Pinza Dumont #7FST11271-30
Pinza bipolareErbe20195-501
Pinza bipolare Erbe                                                          20195-022
MicrotrapanoFST                                                          18000-17                 
Porta aghiFST12010-14
5-0 sutura di setaFeuerstein,
7-0Feuerstein,
8-0Feuerstein, Suprama
Camera di recupero veterinariaPeco ServicesV1200
sutura di seta Suprama sutura di seta Suprama

Riferimenti

  1. Mukherjee, D., Patil, C. G. Epidemiology and the global burden of stroke. World Neurosurg. 76 (6), Suppl 85-90 (2011).
  2. Ebinger, M., Prüss, H., et al. Effect of the use of ambulance-based thrombolysis on time to thrombolysis in acute ischemi....

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Ristampe e permessi

Tag

Imaging in vivoocclusione dell'MCA distalemicroscopia intravitalemodello di ictus nel toporicerca sull'ischemia cerebralescansione laser confocalemicroscopia a due fotoni