Murine tutto spessore trapianto della pelle

Sommario

Murino di trapianto a tutto spessore della pelle è un modello consolidato per studiare il rifiuto in un ambiente alloimmune. Qui, mettiamo a disposizione un tutorial di ogni passo coinvolti in esecuzione di un BALB / c -> C57BL / 6 a tutto spessore trapianto di pelle.

Abstract

Murino di trapianto a tutto spessore della pelle è un modello in vivo consolidata per studiare alloimmune risposta e rigetto del trapianto. Nonostante la sua limitata applicazione per gli esseri umani, il trapianto di pelle nei topi è stato ampiamente impiegato per la ricerca sui trapianti. La procedura è facile da imparare ed eseguire, e non richiede tecniche microchirurgiche delicate né una formazione completa. Inoltre, il rigetto in questo modello si verifica in una reazione immunologica molto riproducibili ed è facilmente monitorato mediante ispezione diretta e palpazione. Inoltre, il trapianto di pelle secondario con innesti donatore corrispondenza o pelle di terze parti può essere eseguita su più modelli di trapianto complessi come un metodo alternativo e semplice per valutare la tolleranza specifici per donatore. Le complicazioni sono bassi e sono in genere limitati a overdose anestesia o distress respiratorio dopo la procedura. fallimento Graft, invece, si verifica comunemente come a causa della scarsa preparazione del gra poppa, errato posizionamento nel letto trapianto, o il posizionamento inadeguato del bendaggio. In questo articolo, vi presentiamo un protocollo per il trapianto di pelle a tutto spessore nei topi e descrivere i passi importanti necessari per una procedura di successo.

Introduzione

Il trapianto di organi è il trattamento di scelta per i pazienti con insufficienza terminale d'organo, ed i risultati hanno migliorato notevolmente con i progressi nelle procedure chirurgiche e protocolli immunosoppressione. Tuttavia, immunosoppressione a lungo termine è associato ad effetti collaterali significativi, e lo sviluppo di nuove strategie che promuovano la tolleranza rimane l'obiettivo della ricerca trapianti moderna.

Numerosi modelli animali sono stati sviluppati per la ricerca di base nel trapianto, per studiare i meccanismi di rigetto e per testare immunosoppressione approcci per prevenire il rigetto del trapianto e....

Protocollo

Tutte le procedure sono state condotte in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio del National Institute of Health (NIH) e sono stati approvati dal Comitato Johns Hopkins University Animal Care e Usa (JHUACUC). Le procedure specifiche sono state eseguite sotto la protocolli ACUC approvato MO13M292 e MO13M370.

1. donatore Harvest pelle

1. Anestetizzare il mouse donatore con isoflurano (vaporizzatore induzione a 4%, manutenzione a 1 - 2% attraverso il cono del mouse). Utilizzare la punta pizzico di ritiro reflex per monitorare la profondità dell'anestesia.
2. Usando un rasoio elettrico, r....

Risultati

Il posizionamento del bendaggio sul mouse destinatario è un importante passo della procedura. L'innesto di pelle è posizionato sul tronco destinatario, tra la spalla, anca e colonna vertebrale (Figura 1). La benda è realizzata con garza piegata e la combinazione di due bende adesive plastica. Il mouse destinatario è posizionato con l'innesto giù sopra la garza sul centro della benda. Utilizzando due micro pinze curve, l'estremità inferiore della benda è tirat.......

Discussione

Dalla sua introduzione da Medawar, prima in studi sull'uomo e poi nei conigli e topi, il trapianto di pelle è stato un modello prezioso per lo studio delle risposte immunitarie allogeniche ^6,7. In questo manoscritto, vi presentiamo un modello di grandi dimensioni, non vascolarizzato, il trapianto a tutto spessore della pelle con la pelle posteriore superiore e inferiore. Vari metodi alternativi, tra cui l'uso della pelle coda o la pelle dell'orecchio del mouse come fonte innesto di tessuto, sono s.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Micro pinze dritte	Sigma	F4017
Micro pinze curve	Aesculap	BD333R
Forbici per tenotomia curve Stevens	Aesculap	BC905R
Forbici da dissezione Mayo	Sigma	S3146
Micro porta aghi	Aesculap	BM563R
Garza sterile	Covidien
6-0 Sutura in nylon	MWI	31849
Strisce di plastica Band- Aiuto	Johnson &		Ottenuto dalla farmacia
Piastra di Petri da 10 cm	Fisherbrand	FB0875712
PBS	Qualità Biologica 119069131
Buprenorfina			DEA Numero richiesto; Ottenuto dalla farmacia ospedaliera
Enrofloxacin	Bayer Health Care	186599

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