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Articolo metodologico

L'uso di un venoso Central Line per fluidi, farmaci e nutrienti Administration in un modello murino di malattia critica

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DOI:

10.3791/55553

2 maggio 2017

In questo articolo

Sommario

Questo protocollo descrive un modello murino cateterizzato centralmente di malattia critica prolungata. Combiniamo il metodo della legatura e della puntura cecale per indurre la sepsi con l'uso di una linea venosa centrale per la somministrazione di fluidi, farmaci e nutrienti per imitare l'ambiente clinico umano.

Abstract

Questo protocollo descrive un modello di topo cateterizzato centrale di malattia critica prolungata. Uniamo legatura cecale e metodo puntura per indurre sepsi con l'uso di un catetere venoso centrale per fluidi, farmaci e somministrazione di nutrienti per imitare l'impostazione clinica umana. I pazienti critici richiedono il supporto medica intensiva per poter sopravvivere. Mentre la maggior parte dei pazienti si riprenderà in pochi giorni, circa un quarto dei pazienti ha bisogno di una prolungata terapia intensiva e sono ad alto rischio di morire di non risolvere insufficienza multiorgano. Inoltre, la fase di prolungata malattia critica si caratterizza per una profonda debolezza muscolare, ed endocrino e cambiamenti metabolici, la cui patogenesi è attualmente completamente compresa. Il modello animale più ampiamente utilizzati nella ricerca di terapia intensiva è la legatura e la puntura modello cecal per indurre la sepsi. Questo è un modello molto riproducibile, con alterazioni infiammatorie ed emodinamici acuti simili alla SEP umanasis, che è stato progettato per studiare la fase acuta della malattia critica. Tuttavia, questo modello si caratterizza per una elevata letalità, che è diversa dalla situazione clinica umana, e non è sviluppato per studiare la prolungata fase di malattia critica. Pertanto, abbiamo adattato la tecnica posizionando un catetere venoso centrale nella vena giugulare che ci permette di amministrare clinicamente rilevante terapia di supporto, per simulare meglio la situazione clinica umana della malattia critica. Questo modello di topo richiede un ampio intervento chirurgico e terapia intensiva quotidiana degli animali, ma si traduce in un modello rilevante della fase acuta e prolungata della malattia critica.

Introduzione

malattia critica è uno stato di malattia in cui la funzione di uno o più sistemi di organi è ostacolato nella misura in cui il paziente muore, a meno che il supporto mediche intensive viene somministrato. Considerando che la causa iniziale per l'ammissione al reparto di terapia intensiva (ICU) può variare, che vanno da traumi, interventi chirurgici complicati, le ustioni, le riacutizzazioni della malattia a sepsi, tutti i pazienti critici soffrono di danni cellulari, causati da ipoperfusione, ipossia e l'infiammazione eccessiva tra gli altri , che porta a insufficienza d'organo. La maggior parte dei pazienti sopravvivono loro insulto acuto, ma una frazion....

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Protocollo

Il protocollo è stato approvato dalla University of Leuven Ethical Review Board per la ricerca sugli animali.

1. Preparazione della linea venosa

  1. Preparare la punta del catetere venoso immergendo rapidamente la parte centrale di 60 cm microrenathane (MRE) tubi in caldo olio di sesamo (> 220 ° C). Successivamente allungare la parte centrale del tubo per produrre un diametro ristretto (diametro esterno (OD) <0,5 mm) delicatamente spostando le estremità del tubo distanti.
  2. Utilizzare una lama di bisturi per tagliare il tubo in due parti di 30 cm ciascuno (vedere Figura 1, Tabella 1).
  3. ....

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Risultati

Topi C57BL / 6 sono state fatte in condizioni critiche come descritto sopra. Abbiamo eseguito due esperimenti per valutare la sopravvivenza post-CLP fino a due punti di tempo: la sopravvivenza fino al giorno 5 (n = 15) e la sopravvivenza fino al giorno 7 (n = 22) post-CLP. curve di sopravvivenza dei due esperimenti non erano significativamente differenti (rispetto fino al giorno 5), che indica la riproducibilità del setup sperimentale. gli animali non sopravvissuti sono stati trovati mor.......

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Discussione

Abbiamo sviluppato un modello murino più clinicamente rilevante di malattia critica, combinando il metodo di legatura e puntura cecale indurre sepsi con l'uso di un catetere venoso centrale per fluidi, farmaci e amministrazione nutrienti. Questo apparato sperimentale è riproducibile, permette di studiare la prolungata fase di malattia critica e si traduce in un tasso di mortalità stabile, con la presente imitando la situazione clinica umana 1.

Legatura cecale e la.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

GVdB, tramite l'Università di Lovanio (KU Leuven), riceve supporto a lungo termine per la ricerca strutturale dal Programma Matusalemme finanziato dal Governo Fiammingo (METH08/07) e detiene un Advanced Grant AdvG-2012-321670 del Programma Idee del settimo programma quadro dell'Unione Europea. SET ha ricevuto una borsa di studio per assistente di ricerca della Research Foundation-Flanders (FWO).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
BuprenorfinaEcupharVetergesic 0,3 mg/mL
C57BL/6 Janvier labsC57BL/6JRj
colloidiFresenius KabiVolulyte 6%
crystalloidsBaxterPlasmalyte a viaflo
Ethilon 3.0EthiconF3211
ImipenemMSDTienam 500  mg polvere per iniezione fluido
IsofluranoEurovetIso-vet
KetaminaEurovetNimatek 100 mg/mL
LocTite Super colla3 tutte le materie plastiche Rectavit119818
Mersilk 3.0EthiconL192
Mersilk 5.0EthiconF682
Microrenathane .025" O.D. x .012" I.D.BiosebMRE-025
olimel N7EBaxter
PE10 - Polietilene .011" x .024" Instech SolomonBTPE-10
PE-50 tubo .023" x.038"Instech SolomonBTPE-50
Roditore Girevole 20 GBiosebRS-20G 
Ropivacaï neAstrazenicaNaropin 2  mg/mL
di xilazinaVMDxilazina cloridrato 2%

Riferimenti

  1. Angus, D. C., van der Poll, T. Severe sepsis and septic shock. N Engl J Med. 369 (9), 840-851 (2013).
  2. Singer, M., et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).
  3. Remick, D. G., Newcomb, D. E., Bolgos, G. L., Call, D. R.

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Ristampe e permessi

Tag

Legazione e punzione del ciecomodello murino di malattia criticasomministrazione di fluidi e farmacicateterismo della vena giugularetecnica di procedura chirurgicaanalisi del tasso di sopravvivenzanutrizione parenterale totalemisure di terapia intensivamalattia critica prolungata